延边牛PLIN2基因CDS区克隆、生物信息学分析及其表达规律研究 被引量：3

1

作者 孙建富 崔岩 +6 位作者 张军芳 王英 孙斌 李强 Seong H.Choi Jong S.Shin 李香子 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第3期829-838,共10页

本研究旨在克隆延边牛脂肪分化相关蛋白PLIN2基因完整CDS区,通过生物信息学分析PLIN2基因CDS区序列和蛋白质基本特性,探讨其在延边牛不同组织及前体脂肪细胞成脂过程中的表达规律。选取18月龄去势的延边牛为研究对象,利用RT-PCR和基因... 本研究旨在克隆延边牛脂肪分化相关蛋白PLIN2基因完整CDS区,通过生物信息学分析PLIN2基因CDS区序列和蛋白质基本特性,探讨其在延边牛不同组织及前体脂肪细胞成脂过程中的表达规律。选取18月龄去势的延边牛为研究对象,利用RT-PCR和基因克隆获得延边牛PLIN2基因,与其他物种进行同源性比对及系统进化树构建,利用生物信息学方法预测PLIN2编码蛋白质的理化性质、潜在磷酸化位点及糖基化位点、二硫键分析、信号肽、亚细胞定位、蛋白高级结构,利用实时荧光定量PCR检测PLIN2基因在延边牛不同组织中的表达水平。结果显示,延边牛PLIN2基因CDS长1353 bp,编码450个氨基酸;同源性比对发现延边牛PLIN2基因与黄牛、水牛、绵羊、山羊、野猪、人、小鼠和野鸡的同源性分别为100%、98.7%、96.7%、97.1%、85.5%、86.3%、47.3%和49.1%;系统进化树表明,延边牛与黄牛、水牛的亲缘关系最近,与野鸡的亲缘关系最远。PLIN2蛋白为不稳定蛋白,具有一定亲水性,存在61个潜在的磷酸化位点、16个O-糖基化潜在位点、12个N-糖基化潜在位点,存在2个二硫键,不存在信号肽,主要分布于细胞核中,细胞质和线粒体中有少量分布。PLIN2蛋白高级结构预测该蛋白是由α-螺旋、延伸链、无规则卷曲和β-转角组成,为混合型蛋白,通过无规则卷曲连接,以α-螺旋为主。实时荧光定量PCR结果显示,PLIN2基因在延边牛小肠组织中表达量最高,其次为背最长肌和肾脏组织。本研究结果可为进一步研究PLIN2基因的功能提供借鉴。 展开更多

关键词 延边牛 PLIN2基因 克隆 生物信息学分析 表达

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基于体外产气法的不同种类菌糠肉牛日粮效果评价 被引量：2

2

作者 杜云龙 冯鑫 +4 位作者 栾嘉明 杨东旭 金英海 张敏 耿春银 《饲料工业》 CAS 北大核心 2024年第9期70-77,共8页

试验旨在通过体外产气法对用不同食用菌菌糠设计的低成本肉牛日粮配方进行效果评定。试验采用单因素试验设计,以不同种类菌糠全混合日粮(TMR)为发酵底物,设计对照(CON)、香菇、木耳、平菇、元蘑、白玉菇、榆黄蘑、羊肚菌、杏鲍菇处理,... 试验旨在通过体外产气法对用不同食用菌菌糠设计的低成本肉牛日粮配方进行效果评定。试验采用单因素试验设计,以不同种类菌糠全混合日粮(TMR)为发酵底物,设计对照(CON)、香菇、木耳、平菇、元蘑、白玉菇、榆黄蘑、羊肚菌、杏鲍菇处理,通过体外产气法,根据产气量、产气参数、发酵参数和营养物质体外消化率等指标,结合隶属函数进行综合分析。结果表明:①在发酵4~10 h时,CON产气量显著高于其他处理(P<0.05);在发酵12~16 h时,木耳处理、白玉菇处理、榆黄蘑处理、羊肚菌处理产气量均显著低于CON(P<0.05);在发酵48 h时,木耳处理、元蘑处理、白玉菇处理、榆黄蘑处理、羊肚菌处理产气量均显著低于CON(P<0.05)。②除木耳处理和元蘑处理外,其他处理理论最大产气量均显著高于CON(P<0.05);除元蘑处理外,其他处理产气速率均显著低于CON(P<0.05)。③CON和杏鲍菇处理pH显著高于其他处理(P<0.05);各处理氨态氮(NH3-N)、挥发性脂肪酸(VFA)和甲烷产量均无显著差异(P>0.05)。④除香菇处理和平菇处理外,其他处理可消化有机物(DOM)、有机物降解率(OMD)、代谢能(ME)值均显著低于CON(P<0.05)。⑤在体外发酵24 h时,除香菇处理和平菇处理外,其他各处理营养物质体外消化率均显著低于CON(P<0.05);在体外发酵48 h时,除香菇处理、平菇处理和杏鲍菇处理外,其他各处理营养物质体外消化率均显著低于CON(P<0.05)。综合分析认为,不同种菌糠肉牛日粮的瘤胃发酵参数和降解特性存在一定差异,其中香菇和平菇菌糠具有作为肉牛日粮的潜力。 展开更多

关键词 体外产气 菌糠 肉牛日粮 瘤胃发酵 隶属函数

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珲春敬信湿地候鸟白额雁恶臭假单胞菌的分离鉴定及药物敏感性分析

3

作者 马振 王隆胜 +5 位作者 唐泽宇 闵鹏飞 赵健豪 孟凡奇 薛书江 贾立军 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第1期461-469,共9页

[目的]了解中、俄、朝边境地区珲春敬信湿地候鸟携带病原菌情况,为候鸟疫病防控提供科学依据。[方法]本研究在珲春敬信湿地采集155份候鸟白额雁新鲜粪便样本,用PBS进行稀释,接种到LB固体培养基和血液琼脂培养基上培养,挑取单个菌落进行... [目的]了解中、俄、朝边境地区珲春敬信湿地候鸟携带病原菌情况,为候鸟疫病防控提供科学依据。[方法]本研究在珲春敬信湿地采集155份候鸟白额雁新鲜粪便样本,用PBS进行稀释,接种到LB固体培养基和血液琼脂培养基上培养,挑取单个菌落进行分离纯化后,采用革兰染色镜检、生化鉴定、16S rRNA基因PCR扩增及测序等方法进行细菌分离鉴定,并对分离菌进行耐药性分析。[结果]分离菌为革兰阴性菌,呈紫红色短杆状。生化鉴定结果显示,分离菌尿素、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、半固体等呈阳性;硫化氢、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐等呈阴性。PCR扩增出大小为1 500 bp的单一条带,扩增序列与NCBI中恶臭假单胞菌MZ836867序列相似性最高,为99.6%。系统进化树显示,分离菌与恶臭假单胞菌MZ836867属于同一个分支,说明分离菌为恶臭假单胞菌。药敏试验结果显示,分离菌对氯霉素、复方新诺明、诺氟沙星等13种药物敏感;对多黏菌素B、克林霉素、亚胺培南等9种药物中介;对万古霉素、氟苯尼考、林可霉素、苯唑西林等8种药物耐药,其中对林可霉素、苯唑西林2种药物耐药性最强。[结论]本研究从珲春敬信湿地候鸟白额雁粪便中成功分离出具有耐药性的恶臭假单胞菌,为珲春敬信湿地候鸟白额雁肠道菌群的深入研究提供了参考。 展开更多

关键词 珲春 白额雁 恶臭假单胞菌 分离鉴定 耐药性

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双氢青蒿素对新孢子虫感染雄性小鼠精子质量和生精功能基因的影响

4

作者 赵芳琳 刘萌 +3 位作者 唐泽宇 赵健豪 李璐 贾立军 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第4期1796-1806,共11页

【目的】新孢子虫病是引起孕畜流产、死胎或新生儿运动障碍等临床症状的一种原虫病,目前尚无有效的药物防治该病。试验旨在确定双氢青蒿素对新孢子虫感染雄性小鼠精子质量和生精功能基因的影响作用,以期达到抗虫效果。【方法】以新孢子... 【目的】新孢子虫病是引起孕畜流产、死胎或新生儿运动障碍等临床症状的一种原虫病,目前尚无有效的药物防治该病。试验旨在确定双氢青蒿素对新孢子虫感染雄性小鼠精子质量和生精功能基因的影响作用,以期达到抗虫效果。【方法】以新孢子虫感染BALB/c雄性小鼠模型为研究对象,进行双氢青蒿素灌胃给药,给药剂量为0.2 g/kg,连续给药7 d,同时设置空白对照组和模型组。给药后检测雄性小鼠的生殖器官指数和精子质量,采用改良巴氏染色法观察精子形态变化。在给药第7、14、21、35、42天分别检测生精功能基因C-kit、Plzf、Sycp3、Stra8的表达情况。在给药第7天,应用流式细胞术检测生精细胞的凋亡情况。【结果】试验成功建立了新孢子虫感染雄性小鼠模型,与空白对照组相比,模型组小鼠生殖器官指数、精子密度、精子活力均极显著降低(P<0.01),精子畸形率极显著升高(P<0.01),C-kit、Plzf、Sycp3、Stra8基因表达量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),生精细胞凋亡率极显著升高(P<0.01);双氢青蒿素组小鼠生殖器官指数(除第21天外)、精子密度、精子活力均极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05),精子畸形率极显著升高(P<0.01),Plzf、C-kit、Sycp3和Stra8基因表达量均降低,部分时间点达显著水平(P<0.05),生精细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。与模型组相比,双氢青蒿素组小鼠生殖器官指数显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),精子密度增加,精子活力增强,精子畸形率极显著降低(P<0.01),C-kit、Plzf、Sycp3和Stra8基因表达量均升高,部分时间点达显著或极显著水平(P<0.05;P<0.01),生精细胞凋亡率极显著降低(P<0.01)。【结论】双氢青蒿素能够调节雄性小鼠生殖器官指数,提高精子质量,减少畸形精子的产生,提高生精功能基因Sycp3、C-kit、Plzf、Stra8的表达量,改善新孢子虫对雄性小鼠精子质量和生精功能基因的损伤。本研究结果为抗新孢子虫有效药物的研究提供了参考依据。 展开更多

关键词 新孢子虫 双氢青蒿素 生殖器官指数 精子质量 生精功能基因

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畜牧场蚊蝇防控方法及应用研究进展 被引量：2

5

作者 张晗 吕思潼 +3 位作者 杨文静 金英海 张敏 耿春银 《家畜生态学报》 北大核心 2022年第5期81-85,共5页

良好的畜牧场环境是家畜健康生长与繁殖的前提条件和基本保障,蚊蝇防控是检验畜牧场环境控制的重要组成部分,有效的减少畜牧场内蚊蝇将极大程度的提高经济效益。该文综述了畜牧场常见的蚊蝇防控方法、效果和应用前景,旨为畜牧场蚊蝇防... 良好的畜牧场环境是家畜健康生长与繁殖的前提条件和基本保障,蚊蝇防控是检验畜牧场环境控制的重要组成部分,有效的减少畜牧场内蚊蝇将极大程度的提高经济效益。该文综述了畜牧场常见的蚊蝇防控方法、效果和应用前景,旨为畜牧场蚊蝇防控提供参考。 展开更多

关键词 蚊蝇防控 杀虫剂 畜牧场 环境

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基于转录组测序的油酸诱导延边牛骨骼肌卫星细胞成脂分化差异表达基因的分析

6

作者 孙建富 孙斌 +6 位作者 张军芳 王英 崔岩 李强 CHOI Seong H SHIN Jong S 李香子 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期2263-2277,共15页

本研究旨在研究油酸(OA)引起延边牛骨骼肌卫星细胞成脂分化途径的分子调控机制。对从12日龄延边牛中分离得到的骨骼肌卫星细胞进行体外培养,加入不同浓度OA的诱导分化培养液,进行分化处理,试验设1个空白对照组[CON组,5%马血清(HS)],3个... 本研究旨在研究油酸(OA)引起延边牛骨骼肌卫星细胞成脂分化途径的分子调控机制。对从12日龄延边牛中分离得到的骨骼肌卫星细胞进行体外培养,加入不同浓度OA的诱导分化培养液,进行分化处理,试验设1个空白对照组[CON组,5%马血清(HS)],3个不同浓度OA诱导组:OAL组(5%HS+50μmol/L OA)、OAM组(5%HS+100μmol/L OA)、OAH组(5%HS+200μmol/L OA),诱导96 h后,对延边牛骨骼肌卫星细胞进行了转录组测序及分析。结果表明:共得到13951条单基因,对4个组差异表达基因进行比较发现,与CON组相比,OAL组有3412个差异表达基因,OAM组有1045个差异表达基因,OAH组有1428个差异表达基因,各组之间共有278个差异表达基因。GO富集分析显示,差异基因参与了多种生物过程,包括代谢过程、细胞过程、生物调节过程等;在分子功能类别上,大多数的基因功能与结合活性、转录调节活性、催化活性等相关;在细胞组分范畴内,大部分的基因被富集到细胞、细胞器、膜等。KEGG富集分析表明,差异表达基因主要富集通路为单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)信号通路、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路、脂肪酸代谢通路、脂肪酸降解通路等。不同浓度OA差异基因荧光定量PCR结果显示,所选的5个差异基因与转录组测序结果基本一致,表明了测序结果的可靠性。本试验完成了OA诱导延边牛骨骼肌卫星细胞成脂分化的转录组测序分析,获取差异基因的功能注释信息,初步揭示了OA诱导牛骨骼肌卫星细胞成脂分化的潜在基因和通路。 展开更多

关键词 转录组测序 油酸 延边牛骨骼肌卫星细胞 成脂分化

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不同浓度油酸对延边牛骨骼肌卫星细胞成脂转分化的影响

7

作者 孙建富 张军芳 +6 位作者 孙斌 王英 崔岩 李强 CHOI Seong H SHIN Jong S 李香子 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第4期1188-1195,共8页

试验旨在探究油酸对延边牛骨骼肌卫星细胞成脂转分化的影响。试验设1个空白对照组(CON)和3个油酸(OA)诱导组:50、100、200μmol/L油酸组(OAL、OAM、OAH)。油酸诱导96 h后,通过测定细胞大小及活力评估油酸对细胞的影响。通过油红O染色和... 试验旨在探究油酸对延边牛骨骼肌卫星细胞成脂转分化的影响。试验设1个空白对照组(CON)和3个油酸(OA)诱导组:50、100、200μmol/L油酸组(OAL、OAM、OAH)。油酸诱导96 h后,通过测定细胞大小及活力评估油酸对细胞的影响。通过油红O染色和测定甘油三酯来验证脂滴的形成,通过实时荧光定量PCR测定相关成肌成脂基因的表达水平来验证脂肪细胞的生成。结果显示,与对照组相比,添加油酸后,延边牛骨骼肌卫星细胞内有脂滴生成,并且脂滴形成量、甘油三酯累积量与油酸呈剂量依赖关系;实时荧光定量PCR测定结果表明,成肌相关因子Pax3、MyoD显著下调(P<0.05),成脂相关因子C/EBPβ、PPARγ显著上调(P<0.05),脂肪酸代谢相关因子SCD显著下调(P<0.05),PLIN2基因显著上调(P<0.05)。综合上述试验结果,用油酸诱导处理延边牛骨骼肌卫星细胞可促进细胞的成脂转分化。 展开更多

关键词 油酸 延边牛 骨骼肌卫星细胞 成脂

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中精粗比饲粮条件下中链脂肪酸对肉牛体外瘤胃发酵的影响 被引量：10

8

作者 栾嘉明 杨东旭 +5 位作者 冯鑫 杨濛 周金影 金英海 张敏 耿春银 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期3032-3045,共14页

本试验旨在揭示不同添加量、不同种类的中链脂肪酸对50∶50精粗比饲粮体外瘤胃发酵的影响,为中链脂肪酸种类及添加量的选择及后续的相关研究提供理论依据。试验采用体外产气法,采用单因素试验设计,以全价混合日粮(TMR,精粗比50∶50)为... 本试验旨在揭示不同添加量、不同种类的中链脂肪酸对50∶50精粗比饲粮体外瘤胃发酵的影响,为中链脂肪酸种类及添加量的选择及后续的相关研究提供理论依据。试验采用体外产气法,采用单因素试验设计,以全价混合日粮(TMR,精粗比50∶50)为发酵底物,在体外瘤胃液(取自延边黄牛)中分别添加0 (对照组)、0.2%、0.8%、1.2%、2.0%(干物质基础)的辛酸(C_(8))、癸酸(C_(10))和月桂酸(C_(12))。每个中链脂肪酸5个组(CON组、T1组、T2组、T3组和T4组),每组3个平行。研究它们对肉牛体外瘤胃发酵产气量、产气参数、甲烷产量、瘤胃原虫数量、发酵参数、体外营养物质表观消化率等的影响。结果表明:1)各时间点辛酸和癸酸各试验组的产气量与对照组相比均无显著差异(P>0.05);月桂酸T2~T4组产气量从24 h开始与对照组相比显著降低(P<0.05),且随着月桂酸添加量的增加,产气量在24、36 h呈先降低后升高的二次曲线变化(P<0.05)。2)随着3种中链脂肪酸添加量的增加,甲烷产量和瘤胃原虫数量均呈线性下降(P<0.05),其中辛酸T3、T4组瘤胃原虫数量显著低于对照组(P<0.05)。3)辛酸T4组丁酸含量随着辛酸添加量的增加呈先升高后降低的二次曲线变化(P<0.05);癸酸T2~T4组氨态氮含量与对照组相比显著降低(P<0.05),且随着癸酸添加量的增加呈线性下降趋势(P<0.05),T3、T4组乳酸含量与对照组相比显著降低(P<0.05),各组间总挥发性脂肪酸及乙酸、丙酸、丁酸含量均无显著差异(P>0.05);月桂酸T3、T4组pH、各试验组氨态氮含量及T4组丁酸含量与对照组相比显著降低(P<0.05),且随着月桂酸添加量的增加呈线性下降(P<0.05),各试验组丙酸含量与对照组相比显著升高(P<0.05),且随着月桂酸添加量的增加呈线性上升(P<0.05)。4)辛酸和癸酸各试验组有机物消化率(OMD)、代谢能(ME)值及微生物蛋白(MCP)产量与对照组相比均无显著差异(P>0.05);月桂酸各试验组OMD、ME值及MCP产量与对照组相比显著降低(P<0.05)。5)辛酸、癸酸和月桂酸各试验组的粗蛋白质体外消化率(IVCPD)与对照组相比显著降低(P<0.05)。由此可见,在本试验条件下,不同种类及添加量的中链脂肪酸对瘤胃液体外发酵参数均有一定程度的改善,且与添加量有关。 展开更多

关键词 体外瘤胃发酵 中链脂肪酸 产气量 甲烷 瘤胃原虫数量

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补饲活性干酵母对延边黄牛生长性能、屠宰性能、肉品质和基质金属蛋白酶的影响 被引量：5

9

作者 冯鑫 栾嘉明 +3 位作者 杨东旭 张敏 金英海 耿春银 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期933-940,共8页

本试验旨在探究补充活性干酵母(ADY)对延边黄牛生长性能、屠宰性能、肉品质和基质金属蛋白酶(MMPs)的影响。选取初始体重为(485±38)kg的延边黄牛(公牛)20头,随机分为2组(CON组和ADY组),每组10头。CON组饲喂基础饲粮(全混合日粮),AD... 本试验旨在探究补充活性干酵母(ADY)对延边黄牛生长性能、屠宰性能、肉品质和基质金属蛋白酶(MMPs)的影响。选取初始体重为(485±38)kg的延边黄牛(公牛)20头,随机分为2组(CON组和ADY组),每组10头。CON组饲喂基础饲粮(全混合日粮),ADY组在饲喂基础饲粮的基础上补饲1 g/(头·d)ADY[菌株为酿酒酵母CNCMI-1077(Saccharomyces cerevisiae CNCMI-1077),活菌数≥8.0×10^(9)CFU/g]。试验期100 d,其中预试期10 d,正试期90 d。结果表明:1)与CON组相比,ADY组的干物质采食量显著提高(P<0.05);2)与CON组相比,补饲ADY显著提高了牛肉的大理石花纹评分和胶原蛋白溶解度(P<0.05),使肌内脂肪含量具有一定上升趋势(P=0.067),同时显著降低了剪切力(P<0.05),趋向于增加肌纤维密度(P=0.067),趋向于减小肌纤维直径(P=0.071);3)与CON组相比,ADY组血清中MMP-2、MMP-9、MMP-13和牛肉中MMP-2的浓度显著升高(P<0.05)。综上可知,补饲1 g/(头·d)ADY可提高延边黄牛的采食量和大理石花纹评分,ADY可能通过增加MMPs的浓度、胶原蛋白在牛肉中的溶解度以及肌内脂肪的含量,改善肌纤维密度和肌纤维直径,进而影响牛肉的嫩度。 展开更多

关键词 活性干酵母 延边黄牛 肉品质 嫩度 基质金属蛋白酶

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延边牛UCP1基因CDS区克隆、生物信息学分析及组织mRNA表达 被引量：2

10

作者 孙斌 唐琳 +6 位作者 张军芳 孙建富 崔岩 王英 王恩泽 李强 李香子 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2021年第6期211-218,共8页

旨在克隆延边牛解偶联蛋白-1(UCP1)CDS区序列,利用RT-PCR技术和基因克隆获得延边牛UCP1基因,与其他物种进行同源性比对及构建系统进化树,利用生物信息学方法预测UCP1编码蛋白质的理化性质、潜在的磷酸化位点等性质,利用实时荧光定量PCR(... 旨在克隆延边牛解偶联蛋白-1(UCP1)CDS区序列,利用RT-PCR技术和基因克隆获得延边牛UCP1基因,与其他物种进行同源性比对及构建系统进化树,利用生物信息学方法预测UCP1编码蛋白质的理化性质、潜在的磷酸化位点等性质,利用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)方法检测UCP1基因在延边牛不同组织的表达丰度。结果显示,延边牛UCP1基因的CDS区全长749 bp,编码249个氨基酸。同源性比对发现延边牛UCP1基因与印度牛同源性为99.47%,系统进化树表明,延边牛与印度牛的亲缘关系最近,和南美羊驼亲缘关系最远。UCP1蛋白缺乏稳定性,脂溶系数是91.53,网状红细胞于体外的半衰期是30 h,总平均亲水性等于0.212,预测其具备一定亲水性。二级结构由α-螺旋(54.03%)、延伸链(12.90%)、无规卷曲(27.42%)和β-转角(5.65%)构成的混合型蛋白。磷酸化位点和糖基化位点分析结果表明,UCP1共有21个磷酸位点,4个潜在的O-糖基化位点,3个N-糖基化潜在位点。UCP1基因的编码产物无跨膜螺旋(TMHs)结构,跨膜螺旋氨基酸残基数量的预测值为19.00857,蛋白质前60个氨基酸的跨膜螺旋数预测值为10.98009,位于膜细胞质侧的总概率为22.995%且属于非分泌蛋白。经实时荧光定量PCR(RT-PCR)可知,延边牛脂肪与小肠内UCP1基因表达水平相对较高,而在肌肉、心脏中的表达水平较低。该试验结果可为进一步研究该基因的功能提供借鉴。 展开更多

关键词 延边牛 UCP1基因 克隆 生物信息学 组织mRNA表达

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猪附红细胞体eno基因重组蛋白对仔猪免疫效果研究 被引量：1

11

作者 韩金成 伍生军 +5 位作者 闫宗斌 于啸洋 金鑫 李文学 许应天 薛书江 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1192-1196,1218,共6页

为了研究猪附红细胞体eno基因重组蛋白对仔猪的免疫效果,本研究将9头仔猪随机平均分为3组:免疫组A皮下多点注射免疫纯化的猪附红细胞体重组蛋白rMseno,剂量为2.5 mg/头;免疫组B皮下注射免疫诱导后的重组菌Mseno/E.coli裂解液,剂量为5... 为了研究猪附红细胞体eno基因重组蛋白对仔猪的免疫效果,本研究将9头仔猪随机平均分为3组:免疫组A皮下多点注射免疫纯化的猪附红细胞体重组蛋白rMseno,剂量为2.5 mg/头;免疫组B皮下注射免疫诱导后的重组菌Mseno/E.coli裂解液,剂量为5×10^(8)cfu/头;对照组C接种等量PBS;共免疫2次,2次免疫间隔21 d。在一免后0、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d采集仔猪血清,通过间接ELISA方法检测血清中重组蛋白特异性抗体、IgG_(1)、IgG_(2a)、细胞因子IFN-γ和IL-4水平;流式细胞术检测免疫仔猪CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞水平,评价重组蛋白对仔猪的免疫效果。间接ELISA方法检测结果显示,免疫组A和免疫组B猪血清中重组蛋白特异性抗体、IgG_(1)、IgG_(2a)、细胞因子IL-4和IFN-γ水平均极显著高于对照组C(p<0.01);流式细胞术检测结果显示,免疫组A和免疫组B CD4^(+)T细胞水平极显著高于对照组C(p<0.01);免疫组A和免疫组B的CD8+T细胞水平和CD4^(+)T细胞/CD8+T细胞比值显著高于对照组C(p<0.05);免疫组A与免疫组B比较,上述所测指标均差异不显著(p>0.05)。结果表明,猪附红细胞体eno基因重组蛋白能诱导仔猪产生较高的体液免疫和细胞免疫水平,纯化后的重组蛋白与表达重组蛋白的重组菌裂解液所诱导的免疫效果差异不显著。本研究首次证实猪附红细胞体eno基因重组蛋白对仔猪的免疫效果,为猪附红细胞体病亚单位疫苗的研发提供参考依据。 展开更多

关键词 猪附红细胞体 rMseno重组蛋白 仔猪 免疫效果

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干法成熟工艺对延边黄牛臀肉品质的影响 被引量：2

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作者 孙德鹏 彭安琪 +4 位作者 谭金龙 朴春香 吕爱辉 牟柏德 李官浩 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2023年第5期159-165,172,共8页

目的:提高延边黄牛肉的嫩度及风味物质含量。方法:采用3种工艺[A组RH(65±5)%成熟10 d, RH(75±5)%成熟10 d, RH(85±5)%成熟20 d;B组RH(75±5)%成熟20 d, RH(85±5)%成熟20 d;C组RH(85±5)%成熟40 d]对延边黄... 目的:提高延边黄牛肉的嫩度及风味物质含量。方法:采用3种工艺[A组RH(65±5)%成熟10 d, RH(75±5)%成熟10 d, RH(85±5)%成熟20 d;B组RH(75±5)%成熟20 d, RH(85±5)%成熟20 d;C组RH(85±5)%成熟40 d]对延边黄牛臀肉进行干法成熟,并分析其品质变化。结果:随着时间的延长,成熟损失率显著上升,其中A组的最高,为39.14%;C组的TBARS值与TVB-N值分别为1.387和14.833,显著高于其他两组;各组脂肪和蛋白质含量均呈上升趋势,剪切力值下降了50%;各组间的蒸煮损失率、色泽和pH值无显著差异;随着成熟的进行,滋味属性丰富度提升,有较高的鲜味和回味,B组的苦味值较低,且其挥发性风味化合物中醛类、酮类的相对含量较高。结论:延边黄牛臀肉的最佳干法成熟工艺为B组。 展开更多

关键词 延边黄牛 臀肉 干法成熟 风味

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不同来源多肽—矿物质螯合物活性研究进展 被引量：3

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作者 楼钰航 徐红艳 +2 位作者 夏新秀 杨晰茗 王超 《食品与机械》 北大核心 2020年第11期211-216,共6页

文章阐述了不同来源的多肽与金属元素钙、铁、锌和非金属元素硒螯合的制备方法,以及其抗氧化性、抗菌性、增强免疫等方面的研究进展,并分析了现有研究的不足。

关键词 多肽 矿物质 螯合 生物活性

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过表达DGAT2基因对延边牛前体脂肪细胞分化的影响 被引量：1

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作者 郭盼盼 李强 +2 位作者 李香子 严昌国 金鑫 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3045-3055,共11页

【目的】探究二酰基甘油酰基转移酶2(DGAT2)对牛前体脂肪细胞分化的影响及其对脂质代谢相关信号通路的调控作用。【方法】利用ADV1穿梭质粒构建包含目的基因的重组穿梭质粒,将重组穿梭质粒与骨架质粒pGP-Ad-Pac载体共转染293A细胞,制得... 【目的】探究二酰基甘油酰基转移酶2(DGAT2)对牛前体脂肪细胞分化的影响及其对脂质代谢相关信号通路的调控作用。【方法】利用ADV1穿梭质粒构建包含目的基因的重组穿梭质粒,将重组穿梭质粒与骨架质粒pGP-Ad-Pac载体共转染293A细胞,制得过表达腺病毒载体Ad-DGAT2,用Ad-DGAT2与Ad-NC(阴性对照组)感染牛前体脂肪细胞;用油酸诱导分化96 h后,利用油红O染色观察脂滴生成情况,并检测甘油三酯(TAG)和脂联素(ADP)含量;通过实时荧光定量PCR检测脂肪生成相关基因表达情况;最后对其进行转录组测序,筛选差异表达基因并进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。【结果】过表达DGAT 2基因可显著增加脂滴数量及TAG、ADP含量(P<0.05),可显著上调磷酸甘油途径DGAT1、甘油磷酸酰基转移酶4(GPAT4)、酰甘油磷酸酯酰基转移酶4(AGPAT4)以及脂质代谢途径中过氧化物酶体增殖活化受体γ(PPARγ)、脂肪分化相关蛋白(PLIN2)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)和硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)的mRNA表达水平(P<0.05)。转录组测序结果显示,与Ad-NC组相比,Ad-DGAT2感染的前体脂肪细胞中共筛选出110个差异表达基因,其中64个基因上调,46个基因下调。KEGG通路富集分析显示,差异表达基因主要富集在PPAR信号通路、甘油磷脂代谢、脂肪酸生物合成和AMPK信号通路中。【结论】过表达DGAT 2基因可以促进延边牛脂肪细胞中脂滴形成、TAG积累和相关成脂基因的表达,转录组测序筛选出了与脂肪代谢相关的差异表达基因。本研究结果表明DGAT 2基因在前体脂肪细胞分化过程中发挥了重要调控作用,为延边牛的分子育种提供了重要的理论依据。 展开更多

关键词 DGAT 2基因 甘油三酯 前体脂肪细胞 过表达 转录组

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酵母对反刍动物瘤胃调控及应用效果研究进展 被引量：2

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作者 冯鑫 杨东旭 +3 位作者 栾嘉明 杨濛 李成云 耿春银 《饲料研究》 CAS 北大核心 2021年第19期140-145,共6页

畜牧生产中,为了最大程度地提高生产效率,减少能量损失和环境污染,通常使用饲料添加剂来调控反刍动物的瘤胃发酵。近年来,酵母对瘤胃的调控和作用机制得到广泛研究,包括平衡瘤胃pH值、降低乳酸的产生和积累、防止酸中毒、调控瘤胃挥发... 畜牧生产中,为了最大程度地提高生产效率,减少能量损失和环境污染,通常使用饲料添加剂来调控反刍动物的瘤胃发酵。近年来,酵母对瘤胃的调控和作用机制得到广泛研究,包括平衡瘤胃pH值、降低乳酸的产生和积累、防止酸中毒、调控瘤胃挥发酸比例、提高瘤胃能量利用率、减少瘤胃病原体、改善瘤胃微生物菌群、影响瘤胃的氮代谢和氢代谢等。酵母对反刍动物的生产力和健康水平有明显改善作用,但关于酵母在反刍动物中调控机制的探讨还不够深入,在生产中的应用效果也存在差异性。文章通过对酵母有关反刍动物瘤胃的调控和酵母在生产中的应用效果方面进行综述,旨在为酵母深入开发与合理利用提供参考。 展开更多

关键词 酵母 反刍动物 瘤胃 发酵

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顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用分析延边牛不同肌肉组织的挥发性风味物质 被引量：4

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作者 孙斌 崔岩 +6 位作者 盛万里 张军芳 唐琳 王恩泽 王英 李强 李香子 《肉类研究》 2022年第4期35-40,共6页

为探究延边牛不同肌肉组织的挥发性风味物质,以6头同一月龄、同一生长条件的延边牛屠宰后的臀肉、眼肉、上脑、里脊、脊肋排和牛腩6个部位为材料,采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用对其挥发性风味物质进行检测,通过峰面积归一法... 为探究延边牛不同肌肉组织的挥发性风味物质,以6头同一月龄、同一生长条件的延边牛屠宰后的臀肉、眼肉、上脑、里脊、脊肋排和牛腩6个部位为材料,采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用对其挥发性风味物质进行检测,通过峰面积归一法确定各成分的相对含量,确定不同部位肌肉关键性挥发性风味物质。结果表明:共检测出醛类、醇类、酮类、烷烃类、酯类、胺类和烯烃类共79种挥发性化合物,其中脊肋排29种、里脊40种、上脑28种、臀肉25种、牛腩29种、眼肉35种;6个部位间挥发性化合物的种类及含量存在明显差异,与其他部位相比,牛腩中醛类和胺类化合物的相对含量最高,里脊的酯类与醇类化合物相对含量最高,脊肋排的烯烃类与烷烃类化合物相对含量最高,酮类化合物并没有在脊肋排中被检测到,臀肉中富含较多的酮类化合物。 展开更多

关键词 延边牛 不同部位 风味物质 气相色谱-质谱联用

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营养平衡调和油的研制及氧化稳定性研究 被引量：3

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作者 刘龙龙 姜宏宇 +1 位作者 仇宏图 张华 《粮食与油脂》 北大核心 2021年第4期40-44,共5页

以芥菜籽油和牛油为原料,制备营养平衡、适合人体吸收的调和油。通过数学拟合计算调和油的最佳质量配比,利用单因素及正交试验,以碘值和酸价为指标,优化了调和油的最佳调配时间、调配温度、调配转速,同时对比了添加不同抗氧化剂的调和... 以芥菜籽油和牛油为原料,制备营养平衡、适合人体吸收的调和油。通过数学拟合计算调和油的最佳质量配比,利用单因素及正交试验,以碘值和酸价为指标,优化了调和油的最佳调配时间、调配温度、调配转速,同时对比了添加不同抗氧化剂的调和油氧化稳定性。结果表明:调和油的最佳质量配比为芥菜籽油∶牛油1.73∶1、调配时间30 min、调配温度85℃、转速250 r/min,此时,调和油的酸价最小是0.382 mg/g;白藜芦醇对调和油具有抗氧化效果,在添加量为底物油脂质量的0.04%时,调和油氧化稳定性最佳,用此添加量的白藜芦醇和茶多酚抑制调和油的氧化,生育酚促进调和油的氧化。 展开更多

关键词 调和油 酸价 抗氧化特性

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延边黄牛DGATs基因克隆、生物信息学及组织表达分析

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作者 郭盼盼 金鑫 +3 位作者 孙建富 李强 李香子 严昌国 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第9期3158-3170,共13页

试验旨在克隆延边黄牛二酯酰甘油酰基转移酶(diacylglycerol acyltransferase,DGATs)两种亚型(DGAT1和DGAT2)的CDS区核苷酸序列,并根据生物信息学对两种亚型的氨基酸序列进行分析,以及探讨其在延边黄牛各组织中的表达规律。采用RT-PCR... 试验旨在克隆延边黄牛二酯酰甘油酰基转移酶(diacylglycerol acyltransferase,DGATs)两种亚型(DGAT1和DGAT2)的CDS区核苷酸序列,并根据生物信息学对两种亚型的氨基酸序列进行分析,以及探讨其在延边黄牛各组织中的表达规律。采用RT-PCR和实时荧光定量PCR技术分别进行DGATs基因CDS区的扩增、克隆以及其在延边黄牛8个组织中mRNA表达量的检测,利用NCBI中BLAST将其与其他物种进行相似性分析,并构建系统进化树;通过在线工具对其编码蛋白的理化性质、一级结构及高级结构进行预测。结果显示,DGAT1和DGAT2基因CDS区序列长度分别为1470和1086 bp,分别编码489和361个氨基酸;二者均为稳定的疏水性蛋白。DGAT1存在25个潜在的磷酸化位点、1个N-糖基化位点和8个跨膜结构域;DGAT2存在28个潜在的磷酸化位点、2个N-糖基化位点和1个跨膜结构域。二者均不存在信号肽,即不属于分泌蛋白。DGAT1主要是通过α-螺旋和无规则卷曲连接,而DGAT2以α-螺旋、无规则卷曲和延伸链连接为主。延边黄牛DGAT1和DGAT2基因分别在延边黄牛小肠和脂肪组织中表达量最高,且显著高于其他组织(P<0.05)。本试验结果对进一步研究延边黄牛DGATs基因以及探究其在脂肪沉积过程中的作用机制具有重要意义。 展开更多

关键词 延边黄牛 DGATs基因 克隆 生物信息学 表达

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延边牛PPARγ基因的克隆及生物信息学分析 被引量：3

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作者 张军芳 孙建富 +7 位作者 孙斌 唐琳 王英 王恩泽 崔岩 李强 严昌国 李香子 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第8期2695-2704,共10页

研究旨在克隆和分析延边牛过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因,并探讨其在延边牛不同组织中的表达规律。参考GenBank数据库中牛PPARγ的序列(登录号:NM_181024.2)设计引物,以18月龄延边牛为试验对象,利用RT-PCR克隆得到延边牛PPA... 研究旨在克隆和分析延边牛过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因,并探讨其在延边牛不同组织中的表达规律。参考GenBank数据库中牛PPARγ的序列(登录号:NM_181024.2)设计引物,以18月龄延边牛为试验对象,利用RT-PCR克隆得到延边牛PPARγ基因,利用NCBI中的BLAST程序与其他物种进行相似性分析并构建系统进化树;用生物信息学软件分析其核苷酸序列及其编码蛋白的理化性质、疏水性、信号肽、跨膜结构域、亚细胞定位、磷酸化位点、糖基化位点、二级结构、三级结构等;用实时荧光定量PCR检测延边牛心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、皮下脂肪、肌肉8个组织中PPARγ基因的相对表达水平。结果显示,延边牛PPARγ基因CDS区序列为1620 bp,相似性比对和系统进化树结果显示,与黄牛的亲缘关系最近,相似性为99.9%,与鸡的亲缘关系最远,相似性为82.1%;该基因编码505个氨基酸,无信号肽和跨膜结构域,为亲水性蛋白,主要分布在细胞核和细胞质中;延边牛PPARγ蛋白二级结构主要为α-螺旋和无规则卷曲,存在53个潜在的磷酸化位点,24个O-糖基化位点;实时荧光定量PCR结果显示,延边牛PPARγ基因在脾脏、皮下脂肪、肝脏中表达量显著高于心脏(P<0.05),肺脏、肾脏、肌肉和小肠中表达量显著低于心脏(P<0.05)。以上试验结果可为进一步研究PPARγ基因的功能提供借鉴。 展开更多

关键词 PPARΓ 延边牛 生物信息学分析 基因克隆 实时荧光定量PCR

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海藻糖替代部分甘油对延边黄牛冻融精子质量的影响

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作者 陈璇 吕艳秋 +2 位作者 韩越 徐一超 金一 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第1期256-264,共9页

【目的】探讨是否可以通过补充海藻糖来降低冷冻保护剂中甘油的浓度,从而提高冻融精子的质量。【方法】分别用6%甘油(Ⅰ组)及3%甘油+0、50、100和150 mmol/L海藻糖(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组)处理精子,用精子-微生物动(静)态图像检测分析系统(CA... 【目的】探讨是否可以通过补充海藻糖来降低冷冻保护剂中甘油的浓度,从而提高冻融精子的质量。【方法】分别用6%甘油(Ⅰ组)及3%甘油+0、50、100和150 mmol/L海藻糖(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组)处理精子,用精子-微生物动(静)态图像检测分析系统(CASA)检测冻融精子的活力、质膜完整性和顶体完整性及动力学相关参数,筛选出最佳海藻糖处理浓度用于后续试验。通过Western blotting方法检测精子蛋白酪氨酸磷酸化水平评价精子获能状态,Hoechst 33342/PI/JC-1联合染色法检测精子的活率及线粒体膜电位,色霉素A_(3)(CMA_(3))染色法检测精子DNA的完整性,部花青540(M540)和Yo-Pro-1染色检测精子膜脂质紊乱水平。【结果】与Ⅰ组相比,Ⅱ组精子的活力、质膜完整性、顶体完整性以及曲线速度(VCL)和直线率(STR)均显著下降(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组组精子的活力、VCL、直线速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、直线性运动(LIN)和STR均显著升高(P<0.05)。因此,后续试验选用100 mmol/L海藻糖处理精子。与新鲜精子相比,冻融精子获能后其蛋白酪氨酸磷酸化的条带显著减少(P<0.05),冻融精子的活率和线粒体膜电位均显著降低(P<0.05);冻融活精子和死精子的高度膜脂质紊乱水平均显著升高(P<0.05),100 mmol/L海藻糖可显著降低高度膜脂质紊乱水平(P<0.05);冻融精子的鱼精蛋白缺失率显著增加(P<0.05),且Ⅱ组和100 mmol/L海藻糖组精子的鱼精蛋白缺失率显著低于Ⅰ组(P<0.05)。【结论】海藻糖可作为一种新型冷冻保护剂降低甘油毒性,用100 mmol/L海藻糖替代部分甘油可显著改善延边黄牛冻融精子的质量。 展开更多

关键词 延边黄牛 冻融 海藻糖 甘油 精子质量

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