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CTRP3调控SeVGMT重编程心脏纤维母细胞为心肌样细胞的机制
1
作者
宋延彬
张云清
+1 位作者
刘惠玉
陈俊明
《中国比较医学杂志》
北大核心
2025年第8期14-28,共15页
目的探究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)调控仙台病毒(SeV)载体过表达Gata4、Mef2c和Tbx5(SeVGMT)重编程心脏纤维母细胞(CFs)为心肌样细胞(iCMs)的效率及作用机制。方法将CFs分为Control组、NC-Lv组、CTRP3-Lv组、NC-sh组和CTRP3-sh...
目的探究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)调控仙台病毒(SeV)载体过表达Gata4、Mef2c和Tbx5(SeVGMT)重编程心脏纤维母细胞(CFs)为心肌样细胞(iCMs)的效率及作用机制。方法将CFs分为Control组、NC-Lv组、CTRP3-Lv组、NC-sh组和CTRP3-sh组。使用Lipofectamine 3000试剂将NC-Lv、CTRP3-Lv、NC-sh和CTRP3-sh转染至CFs,转染48 h。然后将Lipofectamine 3000试剂与SeVGMT混合并在室温下孵育48 h,更换培养基后继续培养21 d。显微镜下观察不同培养时间点(0、3、7、14、21 d)的细胞形态。通过细胞免疫荧光、RT-qPCR和Western blot检测不同时间点的心肌特异性蛋白α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的表达,并计算不同时间点的跳动细胞比例。结果随着培养时间的延长,各组CFs中α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的相对荧光强度、mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05),并且培养14 d时的上述心肌特异性蛋白的表达水平较培养7 d时大幅度升高(P<0.05)。培养3、7、14和21 d时,与NC-Lv组比较,CTRP3-Lv组CFs中α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的相对荧光强度、mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05)。与NC-sh组比较,CTRP3-sh组CFs中α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的相对荧光强度、mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.05)。培养7 d时,各组CFs中出现跳动细胞,随着培养时间的延长,各组CFs中的跳动细胞比例显著升高(P<0.05),并且培养14 d时的跳动细胞比例较培养7 d时大幅度升高(P<0.05)。培养7、14和21 d时,与NC-Lv组比较,CTRP3-Lv组CFs中的跳动细胞比例显著升高(P<0.05)。与NC-sh组比较,CTRP3-sh组CFs中的跳动细胞比例显著降低(P<0.05)。结论CTRP3可增强SeVGMT重编程CFs为iCMs。
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关键词
心肌梗死
C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3
SeVGMT
重编程
心脏纤维母细胞
心肌样细胞
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职称材料
题名
CTRP3调控SeVGMT重编程心脏纤维母细胞为心肌样细胞的机制
1
作者
宋延彬
张云清
刘惠玉
陈俊明
机构
延安大学附属医院心血管中心
延安大学附属医院
病理科
延安大学附属医院
骨科
出处
《中国比较医学杂志》
北大核心
2025年第8期14-28,共15页
基金
国家自然科学基金(81960080,81760069)。
文摘
目的探究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)调控仙台病毒(SeV)载体过表达Gata4、Mef2c和Tbx5(SeVGMT)重编程心脏纤维母细胞(CFs)为心肌样细胞(iCMs)的效率及作用机制。方法将CFs分为Control组、NC-Lv组、CTRP3-Lv组、NC-sh组和CTRP3-sh组。使用Lipofectamine 3000试剂将NC-Lv、CTRP3-Lv、NC-sh和CTRP3-sh转染至CFs,转染48 h。然后将Lipofectamine 3000试剂与SeVGMT混合并在室温下孵育48 h,更换培养基后继续培养21 d。显微镜下观察不同培养时间点(0、3、7、14、21 d)的细胞形态。通过细胞免疫荧光、RT-qPCR和Western blot检测不同时间点的心肌特异性蛋白α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的表达,并计算不同时间点的跳动细胞比例。结果随着培养时间的延长,各组CFs中α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的相对荧光强度、mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05),并且培养14 d时的上述心肌特异性蛋白的表达水平较培养7 d时大幅度升高(P<0.05)。培养3、7、14和21 d时,与NC-Lv组比较,CTRP3-Lv组CFs中α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的相对荧光强度、mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05)。与NC-sh组比较,CTRP3-sh组CFs中α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的相对荧光强度、mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.05)。培养7 d时,各组CFs中出现跳动细胞,随着培养时间的延长,各组CFs中的跳动细胞比例显著升高(P<0.05),并且培养14 d时的跳动细胞比例较培养7 d时大幅度升高(P<0.05)。培养7、14和21 d时,与NC-Lv组比较,CTRP3-Lv组CFs中的跳动细胞比例显著升高(P<0.05)。与NC-sh组比较,CTRP3-sh组CFs中的跳动细胞比例显著降低(P<0.05)。结论CTRP3可增强SeVGMT重编程CFs为iCMs。
关键词
心肌梗死
C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3
SeVGMT
重编程
心脏纤维母细胞
心肌样细胞
Keywords
myocardial infarction
C1q tumor necrosis factor-related protein 3
SeVGMT
reprogramming
cardiac fibroblasts
cardiomyocyte-like cells
分类号
R542.2 [医药卫生—心血管疾病]
R363 [医药卫生—病理学]
R-33 [医药卫生]
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出处
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1
CTRP3调控SeVGMT重编程心脏纤维母细胞为心肌样细胞的机制
宋延彬
张云清
刘惠玉
陈俊明
《中国比较医学杂志》
北大核心
2025
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