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H1亚型禽流感病毒RT-RPA-LFD快速检测方法的建立及应用
被引量：
1
1
作者
曾婷婷
李孟
+9 位作者
谢芝勋
李丹
谢丽基
罗思思
张民秀
王盛
谢志勤
范晴
阮志华
粟永春
《江西农业学报》
CAS
2024年第3期61-66,共6页
以H1亚型AIV的HA基因为研究对象,采用重组聚合酶核酸等温扩增技术(RPA),通过RT-PCR方法优选出1套引物,进而优化体系的反应温度、最佳探针及引物浓度,使用优化后的最佳反应体系进行敏感性及特异性试验,并探索该方法能达到的最短反应时间...
以H1亚型AIV的HA基因为研究对象,采用重组聚合酶核酸等温扩增技术(RPA),通过RT-PCR方法优选出1套引物,进而优化体系的反应温度、最佳探针及引物浓度,使用优化后的最佳反应体系进行敏感性及特异性试验,并探索该方法能达到的最短反应时间,利用侧向流动免疫(LFD)试纸条观测反应后的结果,最终建立检测H1亚型AIV的RT-RPA-LFD快速检测方法。结果表明:建立的RT-RPA-LFD快速检测方法在探针工作浓度为0.14 mmol/L,37℃条件下反应20 min,可最低检测到1.5×10^(2)copies/反应的H1亚型AIV RNA,其他常见家禽病原体未见阳性反应。该方法与RT-PCR及鸡胚分离鉴定测序结果完全一致,可满足H1亚型AIV临床快速鉴别诊断的需求,为基层兽医现场快速检测提供技术支撑。
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关键词
H1亚型AIV
等温扩增技术
快速检测
RT-RPA-LFD
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职称材料
题名
H1亚型禽流感病毒RT-RPA-LFD快速检测方法的建立及应用
被引量：
1
1
作者
曾婷婷
李孟
谢芝勋
李丹
谢丽基
罗思思
张民秀
王盛
谢志勤
范晴
阮志华
粟永春
机构
广西
壮族自治区兽医研究所
广西
兽医生物技术重点实验室/农业农村部中国(
广西
)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室
广西金陵农牧集团有限公司/广西博士后创新实践基地
出处
《江西农业学报》
CAS
2024年第3期61-66,共6页
基金
广西重点研发计划项目(桂科AB21076004)
广西自然科学基金项目(2022GXNSFAA035445、2021GXNSFBA196031)
+1 种基金
广西科技基地和人才专项(桂科AD23049005)
广西八桂学者(2019-A50)。
文摘
以H1亚型AIV的HA基因为研究对象,采用重组聚合酶核酸等温扩增技术(RPA),通过RT-PCR方法优选出1套引物,进而优化体系的反应温度、最佳探针及引物浓度,使用优化后的最佳反应体系进行敏感性及特异性试验,并探索该方法能达到的最短反应时间,利用侧向流动免疫(LFD)试纸条观测反应后的结果,最终建立检测H1亚型AIV的RT-RPA-LFD快速检测方法。结果表明:建立的RT-RPA-LFD快速检测方法在探针工作浓度为0.14 mmol/L,37℃条件下反应20 min,可最低检测到1.5×10^(2)copies/反应的H1亚型AIV RNA,其他常见家禽病原体未见阳性反应。该方法与RT-PCR及鸡胚分离鉴定测序结果完全一致,可满足H1亚型AIV临床快速鉴别诊断的需求,为基层兽医现场快速检测提供技术支撑。
关键词
H1亚型AIV
等温扩增技术
快速检测
RT-RPA-LFD
Keywords
H1 subtype AIV
Isothermal amplification technology
Rapid detection
RT-RPA-LFD
分类号
S852.6 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
H1亚型禽流感病毒RT-RPA-LFD快速检测方法的建立及应用
曾婷婷
李孟
谢芝勋
李丹
谢丽基
罗思思
张民秀
王盛
谢志勤
范晴
阮志华
粟永春
《江西农业学报》
CAS
2024
1
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