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慢性乙型肝炎病毒感染树鼩Kupffer细胞TLR2和TLR4的表达及其意义
被引量：
6
1
作者
阮萍
杨春
+7 位作者
苏建家
欧超
曹骥
骆成漂
唐艳萍
秦虹
孙雯
李瑗
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期686-690,共5页
目的探索慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染树鼩Kupffer细胞Toll样受体(TLR)家族中的TLR2和TLR4在mRNA水平的表达情况及其对Kupffer细胞功能的影响。方法树鼩分为确定慢性感染HBV的树鼩、疑似慢性感染HBV的树鼩和未接种HBV的正常对照树鼩。全...
目的探索慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染树鼩Kupffer细胞Toll样受体(TLR)家族中的TLR2和TLR4在mRNA水平的表达情况及其对Kupffer细胞功能的影响。方法树鼩分为确定慢性感染HBV的树鼩、疑似慢性感染HBV的树鼩和未接种HBV的正常对照树鼩。全部动物定期抽血和进行肝活检手术,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析血清和肝组织的HBV DNA水平;对手术切取的树鼩肝组织进行Kupffer细胞的分离、纯化和原代培养,采用qRT-PCR检测TLR2、TLR4以及TNF-α的mRNA表达水平;采用迁移实验及溶酶体荧光探针等方法分析TLR2和TLR4对Kupffer细胞迁移能力及溶酶体数量的影响。结果确定慢性感染HBV的树鼩TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达水平均低于疑似慢性感染HBV的树鼩和未接种HBV的正常对照树鼩(P<0.05),表达水平均与动物肝组织的HBV DNA拷贝数呈负相关(P<0.05),与Kupffer细胞的细胞迁移数、溶酶体密度及TNF-αmRNA表达水平呈正相关(P<0.05)。结论 Kupffer细胞中的TLR2和TLR4可能通过影响Kupffer细胞功能而参与树鼩HBV感染后肝脏病变的慢性化发展过程。
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关键词
TOLL样受体
KUPFFER细胞
乙型肝炎病毒
树鼩
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职称材料
树鼩慢性感染乙肝病毒过程中枯否细胞变化的意义
被引量：
4
2
作者
阮萍
肖健
+8 位作者
杨春
苏建家
欧超
曹骥
骆成漂
唐艳萍
秦虹
孙雯
李瑗
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期1076-1081,共6页
目的:探索枯否细胞在树鼩感染乙肝病毒(HBV)慢性化过程中的意义。方法:树鼩分为3组:A组6只,为前期实验已确定慢性感染HBV的树鼩;B组3只,为疑似慢性感染HBV的树鼩;C组4只,为未接种HBV的正常对照树鼩。全部动物定期抽血和进行肝活检手术;...
目的:探索枯否细胞在树鼩感染乙肝病毒(HBV)慢性化过程中的意义。方法:树鼩分为3组:A组6只,为前期实验已确定慢性感染HBV的树鼩;B组3只,为疑似慢性感染HBV的树鼩;C组4只,为未接种HBV的正常对照树鼩。全部动物定期抽血和进行肝活检手术;对手术切取的树鼩肝组织进行枯否细胞的分离、纯化和原代培养,采用流式细胞术、细胞免疫组化、溶酶体荧光探针及实时荧光定量RT-PCR等方法检测CD163+细胞数量、溶酶体数量、溶菌酶的表达及肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平。结果:(1)慢性感染HBV的树鼩肝脏枯否细胞比例及肝组织内CD163+细胞数量显著高于其它2组(均P<0.05);(2)慢性感染HBV的树鼩肝脏枯否细胞的溶酶体荧光强度、肝组织内溶菌酶阳性细胞计数和TNF-αmRNA的表达水平均显著低于其它2组(均P<0.05)。结论:枯否细胞在宿主感染HBV的慢性化过程中可能起一定的调节作用。
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关键词
树鼩
肝炎病毒
乙型
枯否细胞
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职称材料
树鼩肝枯否细胞的分离及鉴定
被引量：
2
3
作者
阮萍
杨春
+4 位作者
欧超
骆成漂
秦虹
孙雯
李瑗
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期159-163,共5页
目的建立对树鼩枯否细胞(Kuffer cells,KCs)进行分离、原代培养和鉴定的方法。方法经肝活检手术分别获取6只树鼩的肝组织,后采用胶原酶体外灌注结合机械法分离肝脏细胞,经差速离心法、Percoll梯度密度离心法及贴壁法分离、纯化KCs后进...
目的建立对树鼩枯否细胞(Kuffer cells,KCs)进行分离、原代培养和鉴定的方法。方法经肝活检手术分别获取6只树鼩的肝组织,后采用胶原酶体外灌注结合机械法分离肝脏细胞,经差速离心法、Percoll梯度密度离心法及贴壁法分离、纯化KCs后进行原代培养,最后通过细胞免疫组化、墨汁吞噬实验及透射电镜对KCs进行鉴定。结果树鼩肝组织分离获得的KCs数量为(1.2±0.2)×106个/g肝组织,细胞活力为90%,细胞纯度达85%以上。结论本组建立的胶原酶体外灌注结合机械分离树鼩KCs的方法稳定实用,为同一研究个体的KCs进行多次分离培养和动态观察奠定基础。
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关键词
树鼩
枯否细胞
分离
原代培养
鉴定
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职称材料
题名
慢性乙型肝炎病毒感染树鼩Kupffer细胞TLR2和TLR4的表达及其意义
被引量：
6
1
作者
阮萍
杨春
苏建家
欧超
曹骥
骆成漂
唐艳萍
秦虹
孙雯
李瑗
机构
广西肿瘤医院实验研究部
广西
医科大学
研究
生院
广西
中医药大学附属瑞康
医院
病理科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期686-690,共5页
基金
国家自然科学基金(30660171)
广西自然科学基金项目(桂科自0447087)
文摘
目的探索慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染树鼩Kupffer细胞Toll样受体(TLR)家族中的TLR2和TLR4在mRNA水平的表达情况及其对Kupffer细胞功能的影响。方法树鼩分为确定慢性感染HBV的树鼩、疑似慢性感染HBV的树鼩和未接种HBV的正常对照树鼩。全部动物定期抽血和进行肝活检手术,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析血清和肝组织的HBV DNA水平;对手术切取的树鼩肝组织进行Kupffer细胞的分离、纯化和原代培养,采用qRT-PCR检测TLR2、TLR4以及TNF-α的mRNA表达水平;采用迁移实验及溶酶体荧光探针等方法分析TLR2和TLR4对Kupffer细胞迁移能力及溶酶体数量的影响。结果确定慢性感染HBV的树鼩TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达水平均低于疑似慢性感染HBV的树鼩和未接种HBV的正常对照树鼩(P<0.05),表达水平均与动物肝组织的HBV DNA拷贝数呈负相关(P<0.05),与Kupffer细胞的细胞迁移数、溶酶体密度及TNF-αmRNA表达水平呈正相关(P<0.05)。结论 Kupffer细胞中的TLR2和TLR4可能通过影响Kupffer细胞功能而参与树鼩HBV感染后肝脏病变的慢性化发展过程。
关键词
TOLL样受体
KUPFFER细胞
乙型肝炎病毒
树鼩
Keywords
Toll-like receptor
kupffer cell
hepatitis B virus
tree shrew
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
R373.21 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
树鼩慢性感染乙肝病毒过程中枯否细胞变化的意义
被引量：
4
2
作者
阮萍
肖健
杨春
苏建家
欧超
曹骥
骆成漂
唐艳萍
秦虹
孙雯
李瑗
机构
广西肿瘤医院实验研究部
广西
医科大学
研究
生院
广西
中医药大学附属瑞康
医院
病理科
广西
中医药大学基础医学院
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期1076-1081,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30660171)
广西自然科学基金资助项目(No.桂科自0447087)
文摘
目的:探索枯否细胞在树鼩感染乙肝病毒(HBV)慢性化过程中的意义。方法:树鼩分为3组:A组6只,为前期实验已确定慢性感染HBV的树鼩;B组3只,为疑似慢性感染HBV的树鼩;C组4只,为未接种HBV的正常对照树鼩。全部动物定期抽血和进行肝活检手术;对手术切取的树鼩肝组织进行枯否细胞的分离、纯化和原代培养,采用流式细胞术、细胞免疫组化、溶酶体荧光探针及实时荧光定量RT-PCR等方法检测CD163+细胞数量、溶酶体数量、溶菌酶的表达及肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平。结果:(1)慢性感染HBV的树鼩肝脏枯否细胞比例及肝组织内CD163+细胞数量显著高于其它2组(均P<0.05);(2)慢性感染HBV的树鼩肝脏枯否细胞的溶酶体荧光强度、肝组织内溶菌酶阳性细胞计数和TNF-αmRNA的表达水平均显著低于其它2组(均P<0.05)。结论:枯否细胞在宿主感染HBV的慢性化过程中可能起一定的调节作用。
关键词
树鼩
肝炎病毒
乙型
枯否细胞
Keywords
Tree shrews
Hepatitis B virus
Kupffer cells
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
树鼩肝枯否细胞的分离及鉴定
被引量：
2
3
作者
阮萍
杨春
欧超
骆成漂
秦虹
孙雯
李瑗
机构
广西肿瘤医院实验研究部
广西
医科大学
研究
生院
广西
中医药大学附属瑞康
医院
病理科
出处
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期159-163,共5页
基金
国家自然科学基金(30660171)
广西自然科学基金(桂科自0447087)
文摘
目的建立对树鼩枯否细胞(Kuffer cells,KCs)进行分离、原代培养和鉴定的方法。方法经肝活检手术分别获取6只树鼩的肝组织,后采用胶原酶体外灌注结合机械法分离肝脏细胞,经差速离心法、Percoll梯度密度离心法及贴壁法分离、纯化KCs后进行原代培养,最后通过细胞免疫组化、墨汁吞噬实验及透射电镜对KCs进行鉴定。结果树鼩肝组织分离获得的KCs数量为(1.2±0.2)×106个/g肝组织,细胞活力为90%,细胞纯度达85%以上。结论本组建立的胶原酶体外灌注结合机械分离树鼩KCs的方法稳定实用,为同一研究个体的KCs进行多次分离培养和动态观察奠定基础。
关键词
树鼩
枯否细胞
分离
原代培养
鉴定
Keywords
tree shrews
Kupffer cells
isolation
primary culture
identification
分类号
R332 [医药卫生—人体生理学]
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1
慢性乙型肝炎病毒感染树鼩Kupffer细胞TLR2和TLR4的表达及其意义
阮萍
杨春
苏建家
欧超
曹骥
骆成漂
唐艳萍
秦虹
孙雯
李瑗
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
6
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职称材料
2
树鼩慢性感染乙肝病毒过程中枯否细胞变化的意义
阮萍
肖健
杨春
苏建家
欧超
曹骥
骆成漂
唐艳萍
秦虹
孙雯
李瑗
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
4
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职称材料
3
树鼩肝枯否细胞的分离及鉴定
阮萍
杨春
欧超
骆成漂
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