离子液体-水共溶剂作用下木质素转化为酚类物质的研究 被引量：7

1

作者 杜芳黎 黎演明 +1 位作者 冼学权 卢波 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期144-148,共5页

以离子液体-水为共溶剂,磷钼酸铯为催化剂,对木质素进行降解制备酚类化合物。考察了共溶剂中水的加入量对木质素转化率及酚类物质选择性的影响;同时,考察了温度、催化剂质量分数及反应时间对木质素转化率和酚类物质选择性的影响。结果表... 以离子液体-水为共溶剂,磷钼酸铯为催化剂,对木质素进行降解制备酚类化合物。考察了共溶剂中水的加入量对木质素转化率及酚类物质选择性的影响;同时,考察了温度、催化剂质量分数及反应时间对木质素转化率和酚类物质选择性的影响。结果表明,在反应温度为180℃、催化剂质量分数为6%、离子液体质量为150 mg、水的用量为20μL、反应时间为100 min时,木质素的转化率及酚类物质收率均达到最大值,分别为87. 78%和20. 08%。GC-MS分析结果表明,降解产物中酚类物质主要包括二甲氧基苯酚、苯酚、4-乙基苯酚、2,6-二甲氧基苯酚。 展开更多

关键词 离子液体-水 木质素 降解 酚类

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细胞色素P450酶生物转化及新催化反应的最新进展 被引量：4

2

作者 潘丽霞 朱婧 +1 位作者 王青艳 杨登峰 《广西科学》 CAS 2018年第3期258-261,共4页

细胞色素P450酶(P450s或CYPs)是一类广泛存在于生命体中,依赖于亚铁血红素催化多种底物的单加氧酶。一方面,它涉及许多高活性天然产物生物合成的关键步骤,对其生物转化研究有助于提高活性分子的产率和活性;另一方面,其催化涉及金属元素... 细胞色素P450酶(P450s或CYPs)是一类广泛存在于生命体中,依赖于亚铁血红素催化多种底物的单加氧酶。一方面,它涉及许多高活性天然产物生物合成的关键步骤,对其生物转化研究有助于提高活性分子的产率和活性;另一方面,其催化涉及金属元素以及辅助因子,其蛋白质改造和新催化反应的研发也不断取得新突破。本文就细胞色素P450酶这两方面的最近研究进展进行了总结与论述。 展开更多

关键词 酶工程 细胞色素P450酶 生物转化 新催化反应

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链霉菌抗生素生物合成中的细胞色素P450酶 被引量：2

3

作者 潘丽霞 朱婧 +1 位作者 王青艳 杨登峰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2019年第2期153-159,共7页

作为酶工程、有机化学和合成生物学领域的研究热点,细胞色素P450酶以其独特的催化特性以及广泛的存在性,吸引了大量研究人员的兴趣。近年来,随着全基因组测序技术、合成生物学和结构生物学的迅猛发展,在抗生素的生物合成过程中P450酶的... 作为酶工程、有机化学和合成生物学领域的研究热点,细胞色素P450酶以其独特的催化特性以及广泛的存在性,吸引了大量研究人员的兴趣。近年来,随着全基因组测序技术、合成生物学和结构生物学的迅猛发展,在抗生素的生物合成过程中P450酶的功能研究得到了进一步解析。同时,细胞色素P450酶的蛋白质改造和新催化反应的研发不断取得新突破。本文就链霉菌属来源的细胞色素P450酶的特点以及最近的研究进展进行了总结与论述。 展开更多

关键词 链霉菌 抗生素 生物合成 酶工程 细胞色素P450酶

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生物法合成乙偶姻手性异构体的研究进展 被引量：2

4

作者 谢能中 石毓梅 +3 位作者 李检秀 黄艳燕 杜奇石 黄日波 《广西科学》 CAS 2017年第1期33-39,共7页

乙偶姻是一种重要的四碳平台化合物,在食品、医药、烟草、化妆品、化工等行业具有广泛的用途,其手性异构体(R)?乙偶姻和(S)-乙偶姻由于具有独特的立体结构,还可用于合成高附加值手性药物、化学中间体、液晶材料。本文综述了近年来利用... 乙偶姻是一种重要的四碳平台化合物,在食品、医药、烟草、化妆品、化工等行业具有广泛的用途,其手性异构体(R)?乙偶姻和(S)-乙偶姻由于具有独特的立体结构,还可用于合成高附加值手性药物、化学中间体、液晶材料。本文综述了近年来利用酶法、全细胞催化法和基因工程菌发酵法制备手性乙偶姻的研究成果,介绍了利用代谢工程、合成生物学等技术在构建基因工程菌株,以及在提高乙偶姻产量、转化率和光学纯度方面所取得的研究进展。最后讨论了目前所存在的问题和难点,以及今后应该重点关注的研究方向。 展开更多

关键词 (R)-乙偶姻 (S)-乙偶姻 手性合成 代谢工程 合成生物学 细胞工厂

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催化非脱羧克莱森缩合反应的新型酮酶

5

作者 潘丽霞 杨登峰 《广西科学》 CAS 2017年第1期67-72,共6页

酮酶对于多种生物代谢途径至关重要,且对碳碳键的生物合成起关键作用。目前,对脱羧的克莱森缩合反应研究较为深入,而催化非脱羧克莱森缩合反应的酮酶的研究工作相对较少。最近,在这方面的研究取得了一些新的进展。本文论述了与之相关的... 酮酶对于多种生物代谢途径至关重要,且对碳碳键的生物合成起关键作用。目前,对脱羧的克莱森缩合反应研究较为深入,而催化非脱羧克莱森缩合反应的酮酶的研究工作相对较少。最近,在这方面的研究取得了一些新的进展。本文论述了与之相关的新型酮酶的酶学特性、结构基础、催化机制以及应用前景。 展开更多

关键词 非脱羧 克莱森缩合反应 酮酶

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里氏木霉纤维二糖水解酶基因cbh1的分子改造 被引量：4

6

作者 陈小玲 张穗生 +2 位作者 黄俊 雷富 陈东 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1739-1743,共5页

【目的】用分子改造的方法改造里氏木霉（Trichoderma reesei）的纤维二糖水解酶基因cbh1，提高其纤维素酶活力，为工业化生产纤维素酶提供参考。【方法】用DNase Ⅰ消化里氏木霉cbb1，回收100bp左右的片段后用T4DNA连接酶连接，以连接... 【目的】用分子改造的方法改造里氏木霉（Trichoderma reesei）的纤维二糖水解酶基因cbh1，提高其纤维素酶活力，为工业化生产纤维素酶提供参考。【方法】用DNase Ⅰ消化里氏木霉cbb1，回收100bp左右的片段后用T4DNA连接酶连接，以连接产物作为模板进行PCR扩增，将PCR改造的cbh1基因转化里氏木霉原生质体，使改造的cbh1基因与里氏木霉原有的cbh1基因发生同源重组。通过比较滤纸酶活力的方法筛选纤维素酶活力提高的突变菌株，在NCBI上比对分析突变菌株的cbh1序列。【结果】经克隆测序获得基因片段大小为637bp，与里氏木霉同属菌株cbh1基因的相似性在88％-98％，确定为里氏木霉cbh1的基因片段。经DNaseⅠ消化15min、T4DNA连接酶连接、经PCR扩增获得改造后的cbh1基因。将改造cbh1基因片段转化里氏木霉原生质体，得到cbh1基因突变体库。从cbh1基因突变体库中筛选获得1株纤维素酶滤纸酶活比出发菌株高1．7518倍的突变菌株E2-1。序列比对分析发现，与出发菌株相比，突变菌株E2-1的cbh1基因有14个碱基发生了突变，其中5个碱基为置换突变，8个碱基为缺失突变，1个碱基为插入突变，分布于cbh1基因的9个位置。【结论】改造后的cbhI基因能与里氏木霉的染色体DNA发生同源重组，进而提高突变菌株的纤维素滤纸酶活力。 展开更多

关键词 里氏木霉 纤维素酶 纤维二糖水解酶基因 分子改造 碱基突变

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基因敲除提高大肠杆菌工程菌生产异丁醇产量的研究 被引量：5

7

作者 郭媛 林丽华 +3 位作者 郭玲 庞浩 彭建新 黄日波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期170-175,共6页

探究pflB、frdAB、fnr和AdhE四基因缺失突变株对大肠杆菌工程菌发酵生产异丁醇的影响。运用Red重组系统敲除大肠杆菌BW25113的pflB、frdAB、fnr和AdhE基因,构建pflB、frdAB、fnr和AdhE四基因缺失突变株E.coliBW25113H,结合本实验室已经... 探究pflB、frdAB、fnr和AdhE四基因缺失突变株对大肠杆菌工程菌发酵生产异丁醇的影响。运用Red重组系统敲除大肠杆菌BW25113的pflB、frdAB、fnr和AdhE基因,构建pflB、frdAB、fnr和AdhE四基因缺失突变株E.coliBW25113H,结合本实验室已经构建的表达质粒pSTV29-alsS-ilvC-ilvD-kdcA,并检测该工程菌在1L发酵罐的发酵过程中的生物量、突变菌株的稳定性、异丁醇产量及有机酸含量的变化情况。成功获得pflB、frdAB、fnr和AdhE四基因缺失突变株BW25113H。发酵结果表明,该工程菌能以较长时间,较高比生长速率保持对数生长期,其稳定性较好,异丁醇产量增加了40%。成功构建pflB、frdAB、fnr和AdhE四基因缺失突变株BW25113H,结合非自身发酵途径使异丁醇的产量由3 g/L提升至4.2 g/L。 展开更多

关键词 大肠杆菌工程菌 基因敲除 异丁醇 非发酵途径 RED重组系统

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基于易错PCR技术的黏质沙雷氏菌脂肪酶基因LipA的定向进化 被引量：2

8

作者 陈英 朱绮霞 +2 位作者 张搏 陈东 黄日波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期181-185,共5页

利用易错PCR技术对黏质沙雷氏菌脂肪酶基因LipA进行定向进化,经过筛选最终获得一个比活力比野生酶提高了425 U/mg的突变体ep1,测序分析ep1有5个氨基酸发生了突变,与野生酶相比ep1的最适pH值由原来的8.5降低为7.5,Tm值提高3℃,Km值由原来... 利用易错PCR技术对黏质沙雷氏菌脂肪酶基因LipA进行定向进化,经过筛选最终获得一个比活力比野生酶提高了425 U/mg的突变体ep1,测序分析ep1有5个氨基酸发生了突变,与野生酶相比ep1的最适pH值由原来的8.5降低为7.5,Tm值提高3℃,Km值由原来的40 mg/mL降低为12.5 mg/mL。对其三维结构进行分析,推测酶学性质的改变可能与处在活性中心右前方双螺旋发卡结构上的I58A、和处在下部β卷曲折叠拐角处的S375G的突变有关。 展开更多

关键词 黏质沙雷氏菌 脂肪酶 易错PCR 定向进化

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眉斑并脊天牛纤维素酶性质的研究 被引量：4

9

作者 杨登峰 关妮 +3 位作者 米慧芝 杜奇石 张穗生 黄日波 《广西科学》 CAS 2011年第3期261-263,268,共4页

为了了解眉斑并脊天牛(Glenea cantor)纤维素酶的性质,选取以木棉树(Bombax ceiba)为食的眉斑并脊天牛为研究对象,按照IUPAC的标准测定方法,测定和定位眉斑并脊天牛肠道中的内切-β-1,4葡聚糖酶、纤维二糖酶以及滤纸酶活力,考察内切-β-... 为了了解眉斑并脊天牛(Glenea cantor)纤维素酶的性质,选取以木棉树(Bombax ceiba)为食的眉斑并脊天牛为研究对象,按照IUPAC的标准测定方法,测定和定位眉斑并脊天牛肠道中的内切-β-1,4葡聚糖酶、纤维二糖酶以及滤纸酶活力,考察内切-β-1,4葡聚糖酶的最适pH值和最适温度。结果表明:在眉斑并脊天牛肠道中同时存在以上3种纤维素酶,3种纤维素酶都具有酶活力,并且主要集中在天牛肠道的中肠。内切-β-1,4葡聚糖酶具有广泛的pH值和温度适应范围,最适pH值为9.2,最适温度为50℃。 展开更多

关键词 眉斑并脊天牛 纤维素 纤维素酶

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CO2-高温液态水体系下果糖分解制备5-羟甲基糠醛的研究 被引量：1

10

作者 黎演明 李秉正 +1 位作者 吴学众 黄日波 《可再生能源》 CAS 北大核心 2012年第6期50-53,58,共5页

5-羟甲基糠醛(5-HMF)是一种重要的化工中间体,具有非常广泛的应用价值和市场前景。在CO2-高温液态水体系下,探讨了二氧化碳初始压力、反应温度以及果糖初始浓度等因素对果糖制备5-HMF的影响。结果表明,CO2-高温液态水催化体系对果糖脱... 5-羟甲基糠醛(5-HMF)是一种重要的化工中间体,具有非常广泛的应用价值和市场前景。在CO2-高温液态水体系下,探讨了二氧化碳初始压力、反应温度以及果糖初始浓度等因素对果糖制备5-HMF的影响。结果表明,CO2-高温液态水催化体系对果糖脱水分解制备5-HMF具有较高的催化活性,在果糖初始浓度高达10%时也可获得较好的5-HMF收率。在果糖浓度为3%,CO2压力为5.0 MPa,160℃的条件下反应100 min,5-HMF的收率为54.3%,反应生成5-HMF的选择性高达57.7%,催化活性为无CO2的高温液态水的2～3倍。CO2压力对果糖分解制备5-HMF有重要影响,随着体系中CO2压力的增加,5-HMF的收率也逐渐增加,但生成5-HMF的选择性有所下降。 展开更多

关键词 果糖 5-羟甲基糠醛 二氧化碳 生物质能源

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熵最小算法解析中药挥发油GC-MS谱中同分异构体的研究 被引量：1

11

作者 杜芳黎 卢波 张华俊 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1476-1480,共5页

采用以熵最小算法为基本原理的化学计量学方法,结合气相色谱-质谱联用分析法,对玫瑰精油及茉莉花挥发油中的2对同分异构体重叠峰进行重建分析,并分别得到各组分的重建质谱,同时采用NIST数据库相似度检索、质谱碎片信息比对及程序升温指... 采用以熵最小算法为基本原理的化学计量学方法,结合气相色谱-质谱联用分析法,对玫瑰精油及茉莉花挥发油中的2对同分异构体重叠峰进行重建分析,并分别得到各组分的重建质谱,同时采用NIST数据库相似度检索、质谱碎片信息比对及程序升温指数对分析得到的各组分进行定性分析。通过分析,分别从玫瑰精油和茉莉花挥发油的GC-MS重叠峰中分离得到1对同分异构体。分析结果显示,采用熵最小算法可以成功地对重叠峰中的各组分进行定性分析。该研究为类似同分异构体混合物中各组分的测定提供了参考。 展开更多

关键词 化学计量学 重叠信号 同分异构体 熵最小算法

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非离子型表面活性剂对甘蔗渣在二甘醇/甘油溶剂中液化的影响

12

作者 吴学众 李检秀 +1 位作者 师德强 李秉正 《广西科学》 CAS 2011年第3期238-241,252,共5页

将甘蔗渣在二甘醇/丙三醇溶剂体系下液化,考察非离子型表面活性剂(NIS):OP-10,OP-15,AEO-9,AEO-15,Tween-85,Tween-80,Span-60对液化的促进作用。结果AEO-15对提高甘蔗渣液化转化率效果最明显,相对于未使用AEO-15的液化体系,残渣率降低3... 将甘蔗渣在二甘醇/丙三醇溶剂体系下液化,考察非离子型表面活性剂(NIS):OP-10,OP-15,AEO-9,AEO-15,Tween-85,Tween-80,Span-60对液化的促进作用。结果AEO-15对提高甘蔗渣液化转化率效果最明显,相对于未使用AEO-15的液化体系,残渣率降低36.2%,液化产物羟值提高37.7%,重均分子量上升18.8%,液化产物分子量分布更佳,液化产物聚合分散度降低11.3%;而OP-10对液化中间产物在试剂体系中的分散溶解效果最好,液化最终产物羟值提高96%,达到791 mgKOH/g。这说明,NIS可以提高液化试剂对甘蔗渣的渗透能力,增强液化产物在液化试剂体系中的分散溶解,已经显著改善了甘蔗渣在二甘醇/甘油溶剂体系中的液化程度,液化效果接近或超过了甘蔗渣在聚乙二醇/甘油溶剂体系中的液化效果。 展开更多

关键词 甘蔗渣 液化 甘油 二甘醇 非离子型表面活性剂

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微气泡-电催化协同氧化降解高浓度垃圾渗滤液的研究 被引量：1

13

作者 梁正义 黄华林 +3 位作者 梁斌 周俊华 黄柠 黄慨 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期155-162,共8页

利用微气泡-电催化协同氧化技术对高浓度垃圾渗滤液进行降解研究,考察了电流密度、pH、微气泡通气量等工艺条件对处理高浓度垃圾渗滤液的影响,对比研究了单一使用微汽泡、双氧水、电催化及其双组合协同工艺方案去除COD和氨氮的效果,并采... 利用微气泡-电催化协同氧化技术对高浓度垃圾渗滤液进行降解研究,考察了电流密度、pH、微气泡通气量等工艺条件对处理高浓度垃圾渗滤液的影响,对比研究了单一使用微汽泡、双氧水、电催化及其双组合协同工艺方案去除COD和氨氮的效果,并采用Design Expert 8软件进行响应面优化协同氧化工艺。结果表明,响应面预测的最优工艺条件为:电流密度为33.3 mA/cm^(2)、通气量为8.5 L/min、渗滤液初始pH 8.5,在该条件下COD和氨氮的去除率分别为75.3%和97.1%,与预测值(COD为75.0%,氨氮去除率为95.4%)基本相符。 展开更多

关键词 垃圾渗滤液 COD 氨氮 微气泡-电催化 协同氧化

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产异丁醇大肠杆菌工程菌的构建 被引量：7

14

作者 林丽华 郭媛 +1 位作者 庞浩 黄日波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期208-212,共5页

酮酸脱羧酶是异丁醇生物合成的关键酶,而大肠杆菌中没有此基因。将乳脂乳球菌NIZO B1157的2-酮酸脱羧酶基因kdcA克隆到非生产菌株大肠杆菌中,同时串联表达与前体物质酮酸相关的alsS、ilvC和ilvD基因,构建了串联表达质粒pSTV29-alsS-ilvC... 酮酸脱羧酶是异丁醇生物合成的关键酶,而大肠杆菌中没有此基因。将乳脂乳球菌NIZO B1157的2-酮酸脱羧酶基因kdcA克隆到非生产菌株大肠杆菌中,同时串联表达与前体物质酮酸相关的alsS、ilvC和ilvD基因,构建了串联表达质粒pSTV29-alsS-ilvC-ilvD-kdcA。大肠杆菌工程菌成功表达了4个基因,并能利用葡萄糖发酵产异丁醇,发酵24 h后最高产量为3 g/L。 展开更多

关键词 大肠杆菌 异丁醇 kdcA基因 重组菌

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高浓度蔗糖酒精发酵的初步研究 被引量：5

15

作者 米慧芝 杨登峰 +2 位作者 关妮 苏海锋 黄日波 《中国酿造》 CAS 北大核心 2011年第2期46-48,共3页

高产量酒度和快速发酵一直是酒精发酵产业所追求的,而酵母直接利用高浓度蔗糖发酵酒精未见有文献报道。文中所用酿酒酵母能直接发酵30%(w/v)的蔗糖溶液,发酵周期只有2d～3d,其最终产生的酒精可以达到17.08%vol,对发展蔗糖酒精是个很好... 高产量酒度和快速发酵一直是酒精发酵产业所追求的,而酵母直接利用高浓度蔗糖发酵酒精未见有文献报道。文中所用酿酒酵母能直接发酵30%(w/v)的蔗糖溶液,发酵周期只有2d～3d,其最终产生的酒精可以达到17.08%vol,对发展蔗糖酒精是个很好的契机。 展开更多

关键词 高浓度蔗糖酒精 发酵 酿酒酵母

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甘蔗糖蜜酒精高产酵母的发酵特性研究 被引量：8

16

作者 张穗生 陆琦 +1 位作者 陈东 黄日波 《广西科学》 CAS 2010年第4期363-367,共5页

采用20L三联装发酵罐进行甘蔗糖蜜高浓度酒精发酵研究高产酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)MF1001菌株的甘蔗糖蜜酒精发酵特性。结果表明,锤度为20°Bx的糖蜜对菌株生长和发酵均没影响,发酵的适宜温度为30℃,pH值4.0的发酵效果... 采用20L三联装发酵罐进行甘蔗糖蜜高浓度酒精发酵研究高产酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)MF1001菌株的甘蔗糖蜜酒精发酵特性。结果表明,锤度为20°Bx的糖蜜对菌株生长和发酵均没影响,发酵的适宜温度为30℃,pH值4.0的发酵效果明显优于pH值3.80,传代培养16代及不同的接种量对菌株的发酵没有影响。按目前甘蔗糖蜜酒精生产的发酵工艺,用锤度为20°Bx糖蜜培养基培养菌株,制备种子液,然后将种子液与锤度为55°Bx的糖蜜培养基1∶1混合进行发酵,发酵50h的醪液酒精含量达到了13.2%(V/V),60h达13.8%(V/V),72h达14.3%(V/V)。发酵结束时醪液可发酵残糖含量低至0.44%,发酵效率分别为理论值88.6%(50h)、94.3%(60h)和98.6%(72h)。该菌株有望用于甘蔗糖蜜酒精发酵生产,提高甘蔗糖蜜酒精发酵的醪液酒精含量。 展开更多

关键词 酵母菌株 发酵特性 酒精 糖蜜

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甘蔗糖蜜发酵生产L-乳酸工艺条件研究 被引量：7

17

作者 黄靖华 孙靓 +5 位作者 吴军华 孙菲菲 李检秀 黄艳燕 郭铃 黄日波 《广西科学》 CAS 2011年第3期273-277,共5页

以甘蔗糖蜜作为原料,利用经诱变筛选得到的鼠李糖乳杆菌SCT-10-10-60发酵生产L-乳酸。通过设置单因素实验,研究不同初始糖蜜浓度(50%、40%、30%、20%)、不同发酵温度(30℃、37℃、42℃、47℃)、不同pH调节剂碳酸钙加入量(4%、6%、8%、1... 以甘蔗糖蜜作为原料,利用经诱变筛选得到的鼠李糖乳杆菌SCT-10-10-60发酵生产L-乳酸。通过设置单因素实验,研究不同初始糖蜜浓度(50%、40%、30%、20%)、不同发酵温度(30℃、37℃、42℃、47℃)、不同pH调节剂碳酸钙加入量(4%、6%、8%、10%)和氮源替代(尿素替代酵母粉)对L-乳酸产量的影响。结果表明,在初始糖蜜浓度20%(m/V)、温度37℃、碳酸钙浓度4%(m/V)、鼠李糖乳杆菌SCT-10-10-60接种量6%(V/V)的发酵条件下,发酵40h L-乳酸的产量最高可以达到106g/L。尿素不能作为菌株生长所需要的氮源。 展开更多

关键词 L-乳酸 甘蔗糖蜜 鼠李糖乳杆菌

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里氏木霉和黑曲霉产酸性木聚糖酶及酶学特性比较 被引量：4

18

作者 吴仁智 黄俊 +5 位作者 芦志龙 陈英 陆琦 陈小玲 陈东 黄日波 《广西科学》 CAS 2017年第1期112-119,共8页

【目的】对黑曲霉和里氏木霉产酸性木聚糖酶的性能及所产粗酶的酶学特性进行分析比较,尤其是考察pH值为4时木聚糖酶酶活力及稳定性,从而确定潜在的较为理想的酸性木聚糖酶。【方法】将里氏木霉和黑曲霉接种至培养基进行产酶培养,比较分... 【目的】对黑曲霉和里氏木霉产酸性木聚糖酶的性能及所产粗酶的酶学特性进行分析比较,尤其是考察pH值为4时木聚糖酶酶活力及稳定性,从而确定潜在的较为理想的酸性木聚糖酶。【方法】将里氏木霉和黑曲霉接种至培养基进行产酶培养,比较分析两者的酸性木聚糖酶、酸性木糖苷酶的酶活力及酶学特性。【结果】黑曲霉酸性木聚糖酶和酸性木糖苷酶的酶活力最高分别达(52.36±2.61)U/mL和(0.57±0.01)U/mL,酸性木聚糖酶最适温度和pH值分别为55℃、5.0,酸性木糖苷酶最适温度和pH值分别为75℃、5.0;里氏木霉酸性木聚糖酶和酸性木糖苷酶的酶活力最高分别达(10.12±0.95)U/mL和(0.32±0.05)U/mL,酸性木聚糖酶最适温度和pH值分别为65℃、6.5,酸性木糖苷酶最适温度和pH值分别为65℃、4.5。黑曲霉和里氏木霉的酸性木聚糖酶兼有酸性CMCase酶活力,分别为(5.26±0.21)U/mL、(1.72±0.21)U/mL。【结论】黑曲霉所产酸性木聚糖酶明显比里氏木霉的更优良,是潜在的较为理想的酸性木聚糖酶。 展开更多

关键词 黑曲霉 里氏木霉 酸性木聚糖酶 酶学特性

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乙醇耐受性提高的酿酒酵母基因工程菌株的构建 被引量：2

19

作者 秦艳 申乃坤 +3 位作者 王青艳 谢能中 朱绮霞 竺利波 《可再生能源》 CAS 北大核心 2016年第7期1096-1100,共5页

将酿酒酵母转录激活因子Msn4基因置于组成型强启动子PGK下,构建重组整合表达质粒YPKRMsn4,r DNA介导整合到受体菌酵母工业菌株Y49的染色体中,筛选得到酿酒酵母菌YM-27。该菌过量表达酿酒酵母转录激活因子Msn4基因,乙醇耐受性有较大提高... 将酿酒酵母转录激活因子Msn4基因置于组成型强启动子PGK下,构建重组整合表达质粒YPKRMsn4,r DNA介导整合到受体菌酵母工业菌株Y49的染色体中,筛选得到酿酒酵母菌YM-27。该菌过量表达酿酒酵母转录激活因子Msn4基因,乙醇耐受性有较大提高。构建的酿酒酵母工程菌运用在木薯乙醇工业生产中,可克服浓醪发酵中后期酵母菌受高浓度乙醇抑制而发酵活力不足的问题,可应用于乙醇浓醪发酵,为进一步构建具有高潜能的优良菌株奠定基础。 展开更多

关键词 酿酒酵母 转录激活因子 基因Msn4 耐受性

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瑞氏木霉内切-β-1,4葡聚糖酶基因Egl1的分子改造 被引量：6

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作者 陈小玲 陈东 芦志龙 《广西科学》 CAS 2011年第3期264-268,共5页

为了提高瑞氏木霉（Trichoderma reesei）的纤维素酶活力,用分子改造的方法改造其内切-β-1,4葡聚糖酶基因Egl1。用DNaseⅠ消化Egl1,回收50~200bp的片段,用T4 DNA连接酶连接回收的片段,进行PCR反应,将PCR产物转入瑞氏木霉原生质体,用比... 为了提高瑞氏木霉（Trichoderma reesei）的纤维素酶活力,用分子改造的方法改造其内切-β-1,4葡聚糖酶基因Egl1。用DNaseⅠ消化Egl1,回收50~200bp的片段,用T4 DNA连接酶连接回收的片段,进行PCR反应,将PCR产物转入瑞氏木霉原生质体,用比较滤纸酶活力的方法筛选纤维素酶活力提高的菌株。结果筛选到2株滤纸酶活力比出发菌株提高的菌株Egl36-4和Egl33-4B2Z2,其酶活力分别比出发菌株提高了2.8倍和3.6倍。 展开更多

关键词 瑞氏木霉 纤维素酶 分子改造

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