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里氏木霉纤维二糖水解酶基因cbh1的分子改造
被引量：
4
1
作者
陈小玲
张穗生
+2 位作者
黄俊
雷富
陈东
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期1739-1743,共5页
【目的】用分子改造的方法改造里氏木霉（Trichoderma reesei）的纤维二糖水解酶基因cbh1，提高其纤维素酶活力，为工业化生产纤维素酶提供参考。【方法】用DNase Ⅰ消化里氏木霉cbb1，回收100bp左右的片段后用T4DNA连接酶连接，以连接...
【目的】用分子改造的方法改造里氏木霉（Trichoderma reesei）的纤维二糖水解酶基因cbh1，提高其纤维素酶活力，为工业化生产纤维素酶提供参考。【方法】用DNase Ⅰ消化里氏木霉cbb1，回收100bp左右的片段后用T4DNA连接酶连接，以连接产物作为模板进行PCR扩增，将PCR改造的cbh1基因转化里氏木霉原生质体，使改造的cbh1基因与里氏木霉原有的cbh1基因发生同源重组。通过比较滤纸酶活力的方法筛选纤维素酶活力提高的突变菌株，在NCBI上比对分析突变菌株的cbh1序列。【结果】经克隆测序获得基因片段大小为637bp，与里氏木霉同属菌株cbh1基因的相似性在88％-98％，确定为里氏木霉cbh1的基因片段。经DNaseⅠ消化15min、T4DNA连接酶连接、经PCR扩增获得改造后的cbh1基因。将改造cbh1基因片段转化里氏木霉原生质体，得到cbh1基因突变体库。从cbh1基因突变体库中筛选获得1株纤维素酶滤纸酶活比出发菌株高1．7518倍的突变菌株E2-1。序列比对分析发现，与出发菌株相比，突变菌株E2-1的cbh1基因有14个碱基发生了突变，其中5个碱基为置换突变，8个碱基为缺失突变，1个碱基为插入突变，分布于cbh1基因的9个位置。【结论】改造后的cbhI基因能与里氏木霉的染色体DNA发生同源重组，进而提高突变菌株的纤维素滤纸酶活力。
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关键词
里氏木霉
纤维素酶
纤维二糖水解酶基因
分子改造
碱基突变
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职称材料
干燥方法对木薯淀粉基碳气凝胶制备和吸附性能的影响
被引量：
4
2
作者
杨辉
冼学权
+2 位作者
黎演明
潘丽霞
李秉正
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期127-132,共6页
为研究干燥方法对淀粉基碳气凝胶的结构及吸附能力的影响,以木薯淀粉为碳源,采用常压干燥和冷冻干燥制备气凝胶,再将其高温碳化制备相应的碳气凝胶。利用红外光谱仪、X射线衍射仪、扫描电镜和全自动物理/化学吸附仪对所制备的淀粉基气...
为研究干燥方法对淀粉基碳气凝胶的结构及吸附能力的影响,以木薯淀粉为碳源,采用常压干燥和冷冻干燥制备气凝胶,再将其高温碳化制备相应的碳气凝胶。利用红外光谱仪、X射线衍射仪、扫描电镜和全自动物理/化学吸附仪对所制备的淀粉基气凝胶和碳气凝胶进行表征,并考察了淀粉基碳气凝胶对阳离子染料的吸附能力。研究结果表明,2种干燥方法制备的淀粉基气凝胶化学结构与晶体结构基本相同,但采用冷冻干燥制备的淀粉基气凝胶(SA-FD)成孔数量更多,所对应的淀粉基碳气凝胶(SCA-FD)具有更大的比较面积(887.4 m^2/g)、孔容积(0.444cm^3/g)和更强的阳离子染料吸附能力,与常压干燥法相比更具优势。
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关键词
木薯淀粉
碳气凝胶
冷冻干燥
比表面积
吸附能力
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职称材料
题名
里氏木霉纤维二糖水解酶基因cbh1的分子改造
被引量：
4
1
作者
陈小玲
张穗生
黄俊
雷富
陈东
机构
广西科学院非粮生物质酶解国家重点实验室/国家非粮生物质能源工程技术研究中心/广西生物质炼制重点实验室
广西
科学院
广西
近海海洋环境
科学
重点
实验室
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期1739-1743,共5页
基金
国家科技支撑计划项目(2011BAD22B01-01)
国家"863"计划项目(2012AA022106
+1 种基金
2013AA050701)
广西科学研究与技术开发计划项目(桂科合10100019-21)
文摘
【目的】用分子改造的方法改造里氏木霉（Trichoderma reesei）的纤维二糖水解酶基因cbh1，提高其纤维素酶活力，为工业化生产纤维素酶提供参考。【方法】用DNase Ⅰ消化里氏木霉cbb1，回收100bp左右的片段后用T4DNA连接酶连接，以连接产物作为模板进行PCR扩增，将PCR改造的cbh1基因转化里氏木霉原生质体，使改造的cbh1基因与里氏木霉原有的cbh1基因发生同源重组。通过比较滤纸酶活力的方法筛选纤维素酶活力提高的突变菌株，在NCBI上比对分析突变菌株的cbh1序列。【结果】经克隆测序获得基因片段大小为637bp，与里氏木霉同属菌株cbh1基因的相似性在88％-98％，确定为里氏木霉cbh1的基因片段。经DNaseⅠ消化15min、T4DNA连接酶连接、经PCR扩增获得改造后的cbh1基因。将改造cbh1基因片段转化里氏木霉原生质体，得到cbh1基因突变体库。从cbh1基因突变体库中筛选获得1株纤维素酶滤纸酶活比出发菌株高1．7518倍的突变菌株E2-1。序列比对分析发现，与出发菌株相比，突变菌株E2-1的cbh1基因有14个碱基发生了突变，其中5个碱基为置换突变，8个碱基为缺失突变，1个碱基为插入突变，分布于cbh1基因的9个位置。【结论】改造后的cbhI基因能与里氏木霉的染色体DNA发生同源重组，进而提高突变菌株的纤维素滤纸酶活力。
关键词
里氏木霉
纤维素酶
纤维二糖水解酶基因
分子改造
碱基突变
Keywords
T.reesei
cellulase
cbh1 gene
molecular modification
base mutation
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
干燥方法对木薯淀粉基碳气凝胶制备和吸附性能的影响
被引量：
4
2
作者
杨辉
冼学权
黎演明
潘丽霞
李秉正
机构
广西科学院非粮生物质酶解国家重点实验室/国家非粮生物质能源工程技术研究中心/广西生物质炼制重点实验室
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期127-132,共6页
基金
广西自然科学基金项目(2013GXNSFBA019256
2014GXNSFBA118603
2015GXNSFAA139281)
文摘
为研究干燥方法对淀粉基碳气凝胶的结构及吸附能力的影响,以木薯淀粉为碳源,采用常压干燥和冷冻干燥制备气凝胶,再将其高温碳化制备相应的碳气凝胶。利用红外光谱仪、X射线衍射仪、扫描电镜和全自动物理/化学吸附仪对所制备的淀粉基气凝胶和碳气凝胶进行表征,并考察了淀粉基碳气凝胶对阳离子染料的吸附能力。研究结果表明,2种干燥方法制备的淀粉基气凝胶化学结构与晶体结构基本相同,但采用冷冻干燥制备的淀粉基气凝胶(SA-FD)成孔数量更多,所对应的淀粉基碳气凝胶(SCA-FD)具有更大的比较面积(887.4 m^2/g)、孔容积(0.444cm^3/g)和更强的阳离子染料吸附能力,与常压干燥法相比更具优势。
关键词
木薯淀粉
碳气凝胶
冷冻干燥
比表面积
吸附能力
Keywords
cassava starch
carbon aerogel
freeze drying
surface area
adsorption capacity
分类号
TQ424 [化学工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
里氏木霉纤维二糖水解酶基因cbh1的分子改造
陈小玲
张穗生
黄俊
雷富
陈东
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
干燥方法对木薯淀粉基碳气凝胶制备和吸附性能的影响
杨辉
冼学权
黎演明
潘丽霞
李秉正
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
4
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职称材料
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