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合成生物与基因操作技术改造酿酒酵母的研究进展
1
作者 覃丽垚 孙喜华 +7 位作者 宾秋丽 雷丽萍 邹浩 单欣然 林岁殷 何东东 王桂文 吴仁智 《中国酿造》 北大核心 2025年第8期22-27,共6页
酿酒酵母作为经典模式真核生物,凭借其遗传操作的便捷性、高效的糖酵解能力及完善的分子工具库,在工业生物技术中持续发挥核心作用。随着现代生命科学的快速发展,酿酒酵母的应用场景在广度及深度方面均得到进一步拓展。该文系统梳理了... 酿酒酵母作为经典模式真核生物,凭借其遗传操作的便捷性、高效的糖酵解能力及完善的分子工具库,在工业生物技术中持续发挥核心作用。随着现代生命科学的快速发展,酿酒酵母的应用场景在广度及深度方面均得到进一步拓展。该文系统梳理了近五年基于基因工程、基因编辑、代谢工程和合成生物等技术改造酿酒酵母的最新研究成果,从技术创新与应用突破视角剖析发展动态,并对改造酿酒酵母的未来发展方向进行了展望,为深度开发酿酒酵母的生物制造潜力提供了系统化的技术路线参考。 展开更多
关键词 酿酒酵母 基因工程 基因编辑 代谢工程 合成生物
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拉曼光谱技术在微生物细胞代谢动态研究中的应用进展 被引量：1
2
作者 陈屿川 覃丽垚 +1 位作者 姜明国 吴仁智 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第7期21-26,共6页
拉曼光谱是一种基于拉曼散射的光谱分析技术,具有高效率、非接触和实时性的优点,常用于微生物学研究中的微生物细胞生理生化分析。该文简单介绍了拉曼光谱在微生物细胞分析中的优势,主要总结了其在真菌(酵母、动植物病原真菌)、细菌(产... 拉曼光谱是一种基于拉曼散射的光谱分析技术,具有高效率、非接触和实时性的优点,常用于微生物学研究中的微生物细胞生理生化分析。该文简单介绍了拉曼光谱在微生物细胞分析中的优势,主要总结了其在真菌(酵母、动植物病原真菌)、细菌(产芽孢细菌、病原细菌)和微藻细胞研究中的应用,并展望了拉曼光谱分析技术未来的发展方向。为深入开发利用微生物资源和微生物快速分类鉴定及选育等提供新的思路。 展开更多
关键词 拉曼光谱 光谱分析 微生物 细胞生物学 病原微生物
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柑橘黄龙病致病机理和防控技术研究进展 被引量：2
3
作者 陈先锐 吴艳玲 +3 位作者 林甲胜 毛俊儒 吴钊龙 黄志民 《广西科学》 北大核心 2025年第2期245-254,共10页
柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing, HLB)是由韧皮部杆菌属革兰氏阴性细菌Candidatus Liberibacter spp.引起的极具毁灭性的病害,传播速度快、致死率高,至今仍缺乏根治的方法,给世界各地柑橘产业造成了难以估计的损失,严重威胁柑橘种植... 柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing, HLB)是由韧皮部杆菌属革兰氏阴性细菌Candidatus Liberibacter spp.引起的极具毁灭性的病害,传播速度快、致死率高,至今仍缺乏根治的方法,给世界各地柑橘产业造成了难以估计的损失,严重威胁柑橘种植业的发展。本文对柑橘黄龙病的病原菌致病机理,以及利用物理、化学、生物等技术防控柑橘黄龙病的研究进展进行了综述,以期分析和探讨柑橘黄龙病防控面临的难题和未来研究方向。 展开更多
关键词 黄龙病 病原菌 致病机理 防控 微波
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几丁质脱乙酰酶Ca CDA1的克隆表达与酶活测定
4
作者 陈龙智 陈建荣 +3 位作者 黄引旧 潘丽霞 陈海兰 阳丽艳 《广西科学》 北大核心 2025年第3期538-547,共10页
几丁质脱乙酰酶(Chitin deacetylase,CDA)是一种重要的生物催化剂,可在温和条件下将几丁质转化为具有更高生物活性的壳聚糖,但目前成功实现异源表达的几丁质脱乙酰酶种类有限,制约了对其的深入研究和应用开发。本研究从实验室前期分离... 几丁质脱乙酰酶(Chitin deacetylase,CDA)是一种重要的生物催化剂,可在温和条件下将几丁质转化为具有更高生物活性的壳聚糖,但目前成功实现异源表达的几丁质脱乙酰酶种类有限,制约了对其的深入研究和应用开发。本研究从实验室前期分离的几丁质降解菌Chitinilyticum aquatile CSC-1中,鉴定出一种新颖的几丁质脱乙酰酶Ca CDA1。采用PCR技术扩增获得了Ca CDA1基因及其截短突变体Ca CDA1_CD的基因序列,随后构建重组质粒,并转化至Escherichia coli BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL宿主菌中进行诱导表达。利用对硝基乙酰苯胺法测定酶活性,结果显示该酶的最适温度为45℃,最适pH值为5.0,在此条件下Ca CDA1粗酶液活性为(7.70±0.47)U/mL,而Ca CDA1_CD粗酶液活性为(6.12±0.57)U/mL。本研究成功克隆、表达并初步表征了Ca CDA1及其截短突变体,为深入解析Ca CDA1的功能特性及其潜在应用价值奠定了理论基础。 展开更多
关键词 几丁质脱乙酰酶 截短突变体 克隆 诱导表达 酶活测定
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龟甲活性肽的制备及其免疫作用的研究
5
作者 张鹏飞 黄艳燕 +2 位作者 莫君明 韦丹丹 潘丽霞 《广西科学》 北大核心 2025年第3期548-555,共8页
龟甲作为传统中药具有重要药用价值,其活性成分的提取与作用机制尚待深入研究。本研究以石金钱龟(Mauremys mutica)龟甲为研究对象,通过熬煮提取、石油醚脱脂、透析除杂获得龟甲蛋白质;采用复合蛋白酶酶解结合超滤纯化,制备得到多肽组分... 龟甲作为传统中药具有重要药用价值,其活性成分的提取与作用机制尚待深入研究。本研究以石金钱龟(Mauremys mutica)龟甲为研究对象,通过熬煮提取、石油醚脱脂、透析除杂获得龟甲蛋白质;采用复合蛋白酶酶解结合超滤纯化,制备得到多肽组分;通过体外小鼠脾脏细胞、巨噬细胞试验对多肽组分进行免疫功能验证;利用液质联用技术对龟甲活性肽进行序列鉴定,筛选具有免疫活性的肽段。结果表明,龟甲活性肽可显著提高小鼠脾脏细胞存活率;在RAW264.7巨噬细胞中,龟甲活性肽能显著提高巨噬细胞的存活率、中性红吞噬能力及一氧化氮(NO)分泌量,并有效抑制脂多糖(LPS)诱导的炎症过度反应。质谱鉴定共得到179条肽段,通过神经网络预测分析,筛选出9条具有免疫活性的肽段。本研究揭示了龟甲活性肽通过双向调节免疫细胞功能发挥治疗潜力,不仅为龟甲药用物质基础研究提供了新依据,而且为开发新型免疫调节剂奠定了技术基础。 展开更多
关键词 龟甲 多肽 免疫 巨噬细胞 质谱鉴定
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水生几丁质降解菌来源双功能几丁质酶截短突变体的异源表达和酶学性质研究
6
作者 顾晨曦 陈建荣 +3 位作者 唐莹华 韦权峰 姜明国 潘丽霞 《广西科学》 北大核心 2025年第3期526-537,共12页
为促进几丁质的绿色、高效降解及其高值化利用,本研究从Chitinilyticum aquatile CSC-1中克隆几丁质酶基因CaChi18B及其截短突变体CaChi18B_ΔChBD_(1)并诱导表达、纯化,同时对获取的重组几丁质酶Ca Chi18B_ΔChBD_(1)进行酶学性质研究... 为促进几丁质的绿色、高效降解及其高值化利用,本研究从Chitinilyticum aquatile CSC-1中克隆几丁质酶基因CaChi18B及其截短突变体CaChi18B_ΔChBD_(1)并诱导表达、纯化,同时对获取的重组几丁质酶Ca Chi18B_ΔChBD_(1)进行酶学性质研究。实验结果表明,截短几丁质结合域(ChBD_(1))后,目的蛋白的可溶性表达水平提高。以胶体几丁质为底物时,Ca Chi18B_ΔChBD_(1)比活力为3.05 U·mg^(-1),最适温度为50℃,最适pH值为7;米氏常数(K_(m))为0.6626 mg·mL^(-1),最大反应速率(V_(max))为1.104μmol·L^(-1)·min^(-1)·mg^(-1),转换频率(k_(cat))为11.04 s^(-1)。利用高效液相色谱(HPLC)对水解产物进行分析,结果表明重组几丁质酶Ca Chi18B_ΔChBD_(1)是具有几丁二糖外切酶和β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性的双功能酶。本研究构建的重组几丁质酶具有较好的酶活力和环境耐受性,在降解几丁质及虾蟹壳生物质方面有一定的应用前景。 展开更多
关键词 水生几丁质降解菌 几丁二糖外切酶 β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶 异源表达 酶学性质
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黄曲霉果胶酶的酶学特性及其在白玉兰落叶水解中的应用
7
作者 冼亮 秦艳 +7 位作者 蒋永强 陶平 刘思伽 李龙婷 宁健 李亿 梁戈 王青艳 《广西科学》 CAS 北大核心 2024年第4期688-697,共10页
农业残余物还田能够改善土壤质量,然而微生物活性过低使腐熟进程缓慢。为了加快腐熟进程,本研究从土壤中筛选产果胶酶的菌株,并进行菌株鉴定及酶学性质分析,同时研究所产果胶酶对白玉兰(Magnolia denudata)落叶的水解作用。结果显示,从... 农业残余物还田能够改善土壤质量,然而微生物活性过低使腐熟进程缓慢。为了加快腐熟进程,本研究从土壤中筛选产果胶酶的菌株,并进行菌株鉴定及酶学性质分析,同时研究所产果胶酶对白玉兰(Magnolia denudata)落叶的水解作用。结果显示,从土壤中分离得到菌株TPF2-1,被鉴定为黄曲霉(Aspergillus flavus),其所产果胶酶粗酶的酶活力为(0.63±0.02)IU/mL。以聚半乳糖醛酸为底物时,TPF2-1果胶酶粗酶的最适作用pH值为4.5,最适作用温度为50℃;在35℃保温1 h后酶活力无损失;在pH值4.0-7.0、25℃条件下保温24 h后仍残余大于90%的酶活力;1、2和5 mmol/L的Li^(+)、Na^(+)、Mg^(2+)、K^(+)、Cu^(2+)、Zn^(2+)和Co^(2+)对TPF2-1果胶酶粗酶的酶活力均无明显抑制作用,Ca^(2+)、Fe^(2+)和Fe^(3+)在5 mmol/L时表现出抑制作用。TPF2-1果胶酶粗酶可使白玉兰落叶水解体系中还原性物质的量提升至水解前的3.3倍。本研究结果表明黄曲霉果胶酶在树叶还田方面具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 果胶酶 酶学性质 黄曲霉 菌株分离和鉴定 落叶水解
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微波处理对甘蔗种茎萌芽和宿根矮化病脱菌的影响
8
作者 陈先锐 毛俊儒 +4 位作者 林甲胜 吴艳玲 谢斯宇 潘世优 黄志民 《广西植物》 2025年第11期2032-2041,共10页
为研究甘蔗种茎微波脱除宿根矮化病(ratoon stunting disease,RSD)病菌的效果,该文通过对甘蔗种茎摆放方式、微波温度和微波时间等条件进行优化,并检测分析微波处理的甘蔗种茎温度均一性、发芽势、发芽率、芽高和病菌阳性率。结果表明:... 为研究甘蔗种茎微波脱除宿根矮化病(ratoon stunting disease,RSD)病菌的效果,该文通过对甘蔗种茎摆放方式、微波温度和微波时间等条件进行优化,并检测分析微波处理的甘蔗种茎温度均一性、发芽势、发芽率、芽高和病菌阳性率。结果表明:(1)甘蔗种茎5种不同摆放方式中,环绕堆叠状可获得最均匀的微波加热效果。(2)在合适的微波条件下(54~56℃),微波处理对甘蔗种茎的生长有一定的促进作用,但微波温度≥58℃会对其造成较大的损伤作用。(3)微波处理对甘蔗种茎的RSD具有显著的脱菌效果,其中在54℃和56℃、20 min和30 min的微波条件下处理的种茎RSD病菌阳性率均降至0,实现完全脱菌。(4)微波54℃、20 min条件下处理的甘蔗种茎,10 d发芽率达100%,平均芽高比对照组提高11.67%,并且比54℃、30 min的微波条件节约了处理时间和能耗,为该研究中甘蔗种茎微波脱菌的最优处理条件。综上认为,利用微波对甘蔗种茎RSD进行脱菌处理,具有温度均一性好、脱菌效率高和绿色环保等优点,该研究结果为甘蔗健康种茎的制备和繁育提供了新的技术参考。 展开更多
关键词 甘蔗种茎 微波 脱菌 生长发育 宿根矮化病
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