拉曼光谱技术在微生物细胞代谢动态研究中的应用进展 被引量：1

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作者 陈屿川 覃丽垚 +1 位作者 姜明国 吴仁智 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第7期21-26,共6页

拉曼光谱是一种基于拉曼散射的光谱分析技术,具有高效率、非接触和实时性的优点,常用于微生物学研究中的微生物细胞生理生化分析。该文简单介绍了拉曼光谱在微生物细胞分析中的优势,主要总结了其在真菌(酵母、动植物病原真菌)、细菌(产... 拉曼光谱是一种基于拉曼散射的光谱分析技术,具有高效率、非接触和实时性的优点,常用于微生物学研究中的微生物细胞生理生化分析。该文简单介绍了拉曼光谱在微生物细胞分析中的优势,主要总结了其在真菌(酵母、动植物病原真菌)、细菌(产芽孢细菌、病原细菌)和微藻细胞研究中的应用,并展望了拉曼光谱分析技术未来的发展方向。为深入开发利用微生物资源和微生物快速分类鉴定及选育等提供新的思路。 展开更多

关键词 拉曼光谱 光谱分析 微生物 细胞生物学 病原微生物

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鸡Caspase3基因的克隆表达、酶活性及生物信息学分析

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作者 陈扬 项燕华 +1 位作者 李宜海 何秀苗 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4200-4210,共11页

【目的】构建鸡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(chCaspase 3)基因表达载体,鉴定表达蛋白酶活性,并进行生物信息学分析,为后续研究chCaspase 3功能奠定基础。【方法】以鸡法氏囊组织cDNA为模板,通过PCR扩增chCaspase 3基因,构建chCaspase 3基... 【目的】构建鸡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(chCaspase 3)基因表达载体,鉴定表达蛋白酶活性,并进行生物信息学分析,为后续研究chCaspase 3功能奠定基础。【方法】以鸡法氏囊组织cDNA为模板,通过PCR扩增chCaspase 3基因,构建chCaspase 3基因的原核和真核表达载体。将原核表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达重组蛋白后利用Western blotting分析chCaspase 3原核表达产物。将真核表达载体以不同剂量(0、0.5、1.0、1.5、2.0μg)转染DF-1细胞进行表达,利用Western blotting和间接免疫荧光技术(IFA)分析chCaspase 3真核表达产物。用Caspase 3活性检测试剂盒分别检测原核和真核表达蛋白的酶活性;利用生物信息学软件分析chCaspase 3的相似性,并预测chCaspase 3蛋白的结构域和三级结构。【结果】chCaspase 3基因CDS区长852 bp,编码283个氨基酸。本研究成功构建了原核pET28a(+)-chCaspase 3和真核p3×Flag-CMV7.1-chCaspase 3重组质粒,原核表达产物分子质量为36 ku,与预期相符;真核表达产物表达量随转染的真核表达载体量的增加而增加。原核和真核表达产物均具有Caspase 3酶活性。生物信息学分析发现,chCaspase 3与其他物种相似性较低,且亲缘关系较远,chCaspase 3蛋白含有Caspase家族的保守五肽QACRG和经典的CASc结构域,其三维结构与人Caspase 3(hCaspase 3)十分吻合。【结论】试验成功克隆并表达了chCaspase 3基因,重组蛋白具有Caspase 3酶活性,生物信息学预测chCaspase 3蛋白与hCaspase 3蛋白有相似的三维结构,为揭示chCaspase 3蛋白的功能及探索其抗病毒天然免疫机制奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡Caspase 3基因 原核表达 真核表达 酶活性 生物信息学

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雨生红球藻藻渣多糖提取条件优化及降血脂活性分析

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作者 藏颖 梁钟文 +4 位作者 刘松 高丹 黄羽诺 李媚 刘红全 《食品研究与开发》 CAS 2024年第22期102-110,共9页

为提高雨生红球藻藻渣多糖的提取率,采用单因素和响应面法优化雨生红球藻藻渣多糖提取条件,并对获得的多糖进行降血脂试验。结果表明,雨生红球藻藻渣多糖最佳提取条件为NaOH质量分数2.5%、料液比1∶25(g/mL)、超声功率250 W、超声时间10... 为提高雨生红球藻藻渣多糖的提取率,采用单因素和响应面法优化雨生红球藻藻渣多糖提取条件,并对获得的多糖进行降血脂试验。结果表明,雨生红球藻藻渣多糖最佳提取条件为NaOH质量分数2.5%、料液比1∶25(g/mL)、超声功率250 W、超声时间10 min、提取时间2.5 h,在此条件下,多糖的提取率为(5.744±0.030)%。藻渣多糖浓度为5 mg/mL时,对胰脂肪酶有较好的抑制效果,抑制率达到(94.19±0.02)%。 展开更多

关键词 雨生红球藻藻渣 多糖 超声辅助提取 工艺优化 降血脂

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生物油水蒸气重整制氢过程中的积碳研究 被引量：1

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作者 廖丽芳 张正东 +3 位作者 蓝平 许庆利 刘文晋易 颜涌捷 《石油化工》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期518-522,共5页

以浸渍法制备的Ni/Al_(2)O_(3)为催化剂,在固定床反应器中对生物油水蒸气重整制氢过程的积碳进行了研究。实验结果表明,随反应温度的升高,积碳速率和整体积碳率先升高后降低,在600℃左右积碳速率和整体积碳率达到最大值,分别为143.68 mg... 以浸渍法制备的Ni/Al_(2)O_(3)为催化剂,在固定床反应器中对生物油水蒸气重整制氢过程的积碳进行了研究。实验结果表明,随反应温度的升高,积碳速率和整体积碳率先升高后降低,在600℃左右积碳速率和整体积碳率达到最大值,分别为143.68 mg/(g·h)和24.89%。随水碳摩尔比的增加,积碳速率和整体积碳率逐渐降低,当水碳摩尔比从1增加到4时,积碳速率降低了72.79%,整体积碳率下降了72.77百分点。催化剂积碳分析结果表明,积碳和烧结是造成催化剂失活的主要原因,催化剂积碳主要以丝状碳形式存在。 展开更多

关键词 生物油 催化剂 重整 积碳 氢气

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肠膜明串珠菌HDE1的分离鉴定及其胞外多糖抗氧化和牛奶凝结特性研究 被引量：9

5

作者 臧文晶 刘丽娜 赵丹 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第4期155-162,共8页

为了拓展产乳酸菌胞外多糖的来源,获得来源明确、产量稳定、具有优良生物学特性的乳酸菌胞外多糖。本研究从自制橘子发酵液中利用产黏菌落法分离筛选得到一株高产胞外多糖的乳酸菌,综合形态学观察及16S rDNA序列分析结果、API 50 CHL试... 为了拓展产乳酸菌胞外多糖的来源,获得来源明确、产量稳定、具有优良生物学特性的乳酸菌胞外多糖。本研究从自制橘子发酵液中利用产黏菌落法分离筛选得到一株高产胞外多糖的乳酸菌,综合形态学观察及16S rDNA序列分析结果、API 50 CHL试验,对其进行鉴定,利用抗氧化及牛奶凝结试验研究了该乳酸菌胞外多糖的抗氧化及牛奶凝结等特性。结果表明,本研究获得了一株肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides),该菌株16S rDNA序列片段长度为1444 bp,GenBank登录号为OM302141。菌株HDE1胞外多糖的总糖、蛋白质、糖醛酸含量分别为41.73%±1.74%、0.29%±0.03%和7.69%±0.42%。该胞外多糖在浓度为3 mg/mL时展现出良好的抗氧化活性,当胞外多糖浓度为5 mg/mL时DPPH自由基清除能力达到50.00%±0.05%,ABTS+自由基清除能力达到40.00%±0.02%,H_(2)O_(2)^(-)自由基清除能力超过了50%,羟基自由基清除能力达到49.96%±0.03%,胞外多糖的总还原力为38.82%±0.09%。牛奶凝结研究结果表明,HDE1在36 h能够使添加3%(w/v)蔗糖的脱脂牛奶完全凝结。这些结果表明菌株HDE1胞外多糖具有良好的抗氧化和牛奶凝结特性,在食品、医药及益生领域展现出良好应用潜力。 展开更多

关键词 肠膜明串珠菌 胞外多糖 牛奶凝结 抗氧化活性

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小球藻胞内多糖提取纯化及其抗氧化活性 被引量：5

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作者 李思雨 刘红全 +6 位作者 孙寒 徐琰杰 黄磊恒 龙寒 凌宏林 成江弈 杨堃峰 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第15期209-219,共11页

为提高小球藻胞内粗多糖得率,并探究小球藻胞内多糖纯化组分的抗氧化作用。本研究采取超声波破碎和热水浸提相结合的方法提取小球藻胞内粗多糖,利用响应面法进行提取条件优化,在此基础上,采用阴离子交换柱和葡聚糖凝胶柱层析对提取得到... 为提高小球藻胞内粗多糖得率,并探究小球藻胞内多糖纯化组分的抗氧化作用。本研究采取超声波破碎和热水浸提相结合的方法提取小球藻胞内粗多糖,利用响应面法进行提取条件优化,在此基础上,采用阴离子交换柱和葡聚糖凝胶柱层析对提取得到的粗多糖进行分离纯化,并进行结构表征和抗氧化试验。响应面结果显示,小球藻胞内粗多糖最优提取条件为:NaOH质量分数为2.0%,料液比为1:25(g/mL),超声功率为200 W,超声时间为20 min,提取温度为80℃,提取时间为1.5 h,在此条件下,小球藻胞内粗多糖的得率为18.086%±0.143%。结构表征和体外抗氧化结果显示,纯化多糖(Purification of intracellular polysaccharide,SCIP),主要由葡萄糖、鼠李糖及半乳糖成分组成,是一种含有糖醛酸的吡喃糖。其在20 mg/mL时,对1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的清除率最大,为75.64%±1.56%,在25 mg/mL时,对羟基自由基清除率最大,为71.08%±0.58%,IC分别6.42 mg/mL和8.59 mg/mL。研究结果为深入了解小球藻胞内多糖理化性质及小球藻多糖的开发利用提供基础。 展开更多

关键词 小球藻 胞内多糖 提取优化 分离纯化 抗氧化

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一株海洋来源高效产角蛋白酶菌株的筛选、鉴定及其酶学性质研究 被引量：12

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作者 张妮 张红岩 +4 位作者 杨梦莹 刘聪 杨立芳 申乃坤 姜明国 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第18期98-104,共7页

为获得高效产角蛋白酶的菌株,提高产酶能力,研究角蛋白酶酶学性质,该文从广西北部湾海鸭养殖羽毛废弃物土壤通过富集、初筛和复筛获得1株高效降解羽毛角蛋白的菌株Gxun-30,综合形态、生理生化和16S rDNA序列的系统进化分析结构,鉴定为... 为获得高效产角蛋白酶的菌株,提高产酶能力,研究角蛋白酶酶学性质,该文从广西北部湾海鸭养殖羽毛废弃物土壤通过富集、初筛和复筛获得1株高效降解羽毛角蛋白的菌株Gxun-30,综合形态、生理生化和16S rDNA序列的系统进化分析结构,鉴定为拟蕈状芽孢杆菌(Bacillus paramycoides)。该菌株产酶条件及所产酶学性质研究结果为,菌株产酶最适温度35℃,发酵48 h,整根羽毛几乎完全降解,酶活性可达434.54 U/mL;所产角蛋白酶最适温度为75℃,最适pH为6.5;该酶热稳定性较好,在70℃以下,能保持酶活的稳定性;金属离子中Ca ^2+、Na+对该酶活性起到激活作用,而Mn ^2+、Cu ^2+对该酶有显著抑制作用;酶活性可被苯甲基磺酰氟(phenyl methy sulfonyl fluoride,PMSF)和乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraacetic acid,EDTA)抑制,表明可能为含金属离子的丝氨酸蛋白酶类;异丙醇对酶活性有明显激活作用,相对酶活性可提高至114%;且在十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)、吐温-40溶液中具有良好的稳定性;该酶降解羽毛、角蛋白及酪蛋白的能力较强,但对人发及胶原蛋白降解能力较弱,该特性使B.paramycoides Gxun-30菌株及所产角蛋白酶在羽毛降解、酪蛋白肽及医用胶原材料制备等方面具有潜在应用价值。 展开更多

关键词 海洋菌株 羽毛降解 分离鉴定 角蛋白酶 酶学性质

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一株产胞外多糖微藻的分离鉴定及其多糖抗氧化活性的研究 被引量：8

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作者 吴思伟 李思雨 +6 位作者 孙寒 刘红全 何秀苗 黄莹 吴嘉惠 黄柳媚 龙寒 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第24期193-200,共8页

从广西北部湾防城港红树林筛选到1株高产胞外多糖的微藻GF02,结合形态学与分子生物学鉴定为小球藻属Chlorella Sorokiniana。初步表征结果表明GF02胞外粗多糖以α-型吡喃糖为主,通过响应面法优化GF02产胞外多糖的条件,实验表明,GF02产... 从广西北部湾防城港红树林筛选到1株高产胞外多糖的微藻GF02,结合形态学与分子生物学鉴定为小球藻属Chlorella Sorokiniana。初步表征结果表明GF02胞外粗多糖以α-型吡喃糖为主,通过响应面法优化GF02产胞外多糖的条件,实验表明,GF02产胞外多糖最佳培养条件为NaNO_(3)2.1 g/L,Na_(2)CO_(3)0.02 g/L,MgSO_(4)0.086 g/L,K_(2)HPO_(4)0.06 g/L,在此条件下,其胞外多糖积累量为216.268 mg/L,是优化前的1.60倍。对胞外多糖抗氧化活性进行了初步的研究,抗氧化活性结果表明,GF02粗多糖对DPPH清除率达到36.53%,对羟基自由基清除率达到67.33%。该研究为小球藻多糖的制备和进一步开发利用提供了实验基础。 展开更多

关键词 小球藻 胞外多糖 分离鉴定 培养条件 抗氧化活性

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杜氏盐藻胞外多糖抗肿瘤活性及其机制研究 被引量：12

9

作者 钟闰 吴思伟 +3 位作者 何秀苗 龙寒 禤金彩 刘红全 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第22期126-133,共8页

海藻多糖是海藻中最重要的药理活性物质之一,已成为肿瘤治疗中新的药物资源,然而,大多数微藻多糖的抗癌机制尚待阐明。为了探究杜氏盐藻胞外多糖(DsEPS)的抗肿瘤机制,本文研究了其对宫颈癌细胞(Hela)的毒性及生长的抑制作用,并利用转录... 海藻多糖是海藻中最重要的药理活性物质之一,已成为肿瘤治疗中新的药物资源,然而,大多数微藻多糖的抗癌机制尚待阐明。为了探究杜氏盐藻胞外多糖(DsEPS)的抗肿瘤机制,本文研究了其对宫颈癌细胞(Hela)的毒性及生长的抑制作用,并利用转录组分析揭示其抗肿瘤活性作用机制。结果表明,DsEPS可抑制Hela细胞增殖,降低细胞活力,改变细胞形态。转录组分析显示,对照组和多糖组之间存在2032个差异表达基因,其中1132个上调,900个下调。基因功能富集分析结果表明,差异表达基因显著富集细胞凋亡和肿瘤相关生物过程,参与了多种癌症和凋亡相关信号通路,包括MAPK信号通路,TNF信号通路,VEGF通路,Ras信号通路等。最后构建蛋白互作网络,并从PPI网络中发现了度中心性最强10个的hub基因。本研究表明,DsEPS有抗肿瘤活性,并初步探明了其抗肿瘤机制,为以后进一步研究提供有效参考。 展开更多

关键词 杜氏盐藻 胞外多糖 抗肿瘤 转录组测序

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硫酸化修饰对小球藻胞内多糖抗氧化及抗肿瘤活性的影响 被引量：4

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作者 孙寒 藏颖 +6 位作者 刘松 郭丽珍 李项娜 黄磊恒 宁紫月 徐程浩 刘红全 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第7期82-88,共7页

为探究小球藻多糖硫酸化修饰对生物活性影响,本研究采用小球藻(Chlorella sp.22)为实验材料,提取胞内多糖经DEAE-52纤维素阴离子交换柱分离纯化得到纯化多糖HDB-1,对纯化多糖HDB-1进行硫酸化修饰得SHDB-1,对硫酸化修饰前后多糖进行抗氧... 为探究小球藻多糖硫酸化修饰对生物活性影响,本研究采用小球藻(Chlorella sp.22)为实验材料,提取胞内多糖经DEAE-52纤维素阴离子交换柱分离纯化得到纯化多糖HDB-1,对纯化多糖HDB-1进行硫酸化修饰得SHDB-1,对硫酸化修饰前后多糖进行抗氧化活性和抗肿瘤活性研究。结果表明,纯化组分HDB-1以α-呋喃糖为主。用三氧化硫-吡啶法对HDB-1进行硫酸化修饰得到SHDB-1,其取代度为1.046。抗氧化活性结果表明,HDB-1与SHDB-1的DPPH自由基清除率IC_(50)(半抑制浓度)值分别为29.28 mg/mL和14.49 mg/mL,羟自由基清除率IC_(50)值分别为36.75 mg/mL和28.59 mg/mL,可知SHDB-1抗氧化效果优于HDB-1。抗肿瘤结果表明,HDB-1及SHDB-1在1 mg/mL浓度下对细胞无毒性,HDB-1与SHDB-1的IC_(50)值分别为960.16μg/mL及658.19μg/mL,可知SHDB-1抑制宫颈癌细胞Hela增殖效果优于HDB-1。以上结果表明,硫酸化修饰的小球藻胞内多糖SHDB-1与HDB-1相比抗氧化活性及体外抑制癌细胞增殖率都有明显提高。 展开更多

关键词 小球藻 胞内多糖 硫酸化修饰 抗氧化活性 抗肿瘤活性

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基因组改组技术快速提高拟微绿球藻油脂含量 被引量：3

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作者 刘红全 袁莎 +5 位作者 卢雨欣 潘艺华 杨海燕 龙寒 禤金彩 何秀苗 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期115-119,共5页

以拟微绿球藻(Nannochloropsis oculata)为原始藻株,经过紫外线和甲基磺酸乙酯分别诱变处理,获得5株油脂含量有所提高的出发藻株。以PEG作为融合剂,对获得的5株出发藻株进行两轮递归式原生质体融合,筛选到遗传稳定的改组藻株F2N2和F2N4... 以拟微绿球藻(Nannochloropsis oculata)为原始藻株,经过紫外线和甲基磺酸乙酯分别诱变处理,获得5株油脂含量有所提高的出发藻株。以PEG作为融合剂,对获得的5株出发藻株进行两轮递归式原生质体融合,筛选到遗传稳定的改组藻株F2N2和F2N4,其油脂含量分别达到55.32%与57.75%,较原始藻株分别提高了69.07%与76.50%。对拟微绿球藻的原始藻株和改组藻株的油脂脂肪酸组成及含量进行分析,结果表明改组前后拟微绿球藻的油脂脂肪酸组成变化不大,但脂肪酸含量有较大差别。 展开更多

关键词 基因组改组 拟微绿球藻 油脂含量

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高产壳聚糖酶菌株筛选鉴定、条件优化及酶学性质分析 被引量：1

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作者 梁颖 刘睿 +6 位作者 宋超东 谢俊杰 殷豆豆 许霞 杨登峰 张红岩 申乃坤 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第20期157-166,共10页

为了筛选出高产壳聚糖酶的菌株,并对其最优产酶条件及酶学性质进行研究。本研究从广西北海养殖虾塘底泥采样,经初筛、复筛选出高产壳聚糖酶菌株,并进行鉴定,再通过单因素实验、Plackett-Burman及正交试验优化产酶工艺,最后对其酶学性质... 为了筛选出高产壳聚糖酶的菌株,并对其最优产酶条件及酶学性质进行研究。本研究从广西北海养殖虾塘底泥采样,经初筛、复筛选出高产壳聚糖酶菌株,并进行鉴定,再通过单因素实验、Plackett-Burman及正交试验优化产酶工艺,最后对其酶学性质及产物进行研究。结果表明,筛选到1株高产壳聚糖酶的菌株Gxun-5.3.3,鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus);菌株Gxun-5.3.3产酶的最优工艺为:麦芽糖5 g/L、酵母粉3 g/L、壳聚糖15 g/L、初始pH6.0、发酵时间84 h,优化后酶活可达62.03±1.18 U/mL,较优化前(39.87±1.24 U/mL)提高了55.58%;酶学性质研究表明,该酶最适反应温度为60℃,最适反应pH为5.0,金属离子中Fe^(2+)、Mn^(2+)对壳聚糖酶有显著(P<0.05)的激活作用,而Al^(3+)、Cu^(2+)则有较强的抑制作用;酶解壳聚糖产物经薄层层析(Thin Layer Chromatography,TLC)测定为聚合度2~4的壳寡糖,表明菌株所产壳寡糖酶为内切型。本研究为B. cereus Gxun-5.3.3壳聚糖酶的生产和壳寡糖的酶法制备提供了理论依据。 展开更多

关键词 壳聚糖酶 蜡样芽孢杆菌 条件优化 酶学性质 壳寡糖

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铜绿假单胞菌Gxun-2产铁载体发酵条件优化及其抑菌效果 被引量：2

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作者 李枢妍 何艳丽 +6 位作者 宋超东 黄夏至 陆君铭 李时勇 张红岩 申乃坤 姜明国 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第10期118-125,共8页

鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)Gxun-2分泌铁载体类型,确定其最佳发酵工艺条件,同时考察铁载体发酵液对植物病原菌拮抗效果,为该菌株在农业中的应用提供理论依据。本试验先用铬天青(chrome azurol sulfonate,CAS)平板和全波... 鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)Gxun-2分泌铁载体类型,确定其最佳发酵工艺条件,同时考察铁载体发酵液对植物病原菌拮抗效果,为该菌株在农业中的应用提供理论依据。本试验先用铬天青(chrome azurol sulfonate,CAS)平板和全波段紫外光吸收法对P.aeruginosa Gxun-2产铁载体进行定性和定量分析,进一步通过单因素、Plackett-Burman及正交试验相结合的方法对其产铁载体培养基及培养条件进行了优化,最后利用平板对峙法测定产铁载体发酵液对香蕉枯萎病病原菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC)的拮抗效果。结果表明,菌株Gxun-2所产铁载体类型为异羟肟酸型,确定产铁载体最佳发酵工艺为:琥珀酸钠2 g/L、甘油10 g/L、硫酸铵1 g/L,初始pH6.8、温度35℃、接种量1%(v/v)、装液量140 mL/250 mL;在此条件下,菌株Gxun-2产铁载体活性单位(Su)达到81.20%±0.24%,较优化前提高了82.84%±0.82%,对FOC的抑菌率达70.60%±1.87%,较优化前提高了52.68%±4.23%。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 铁载体 发酵条件优化 尖孢镰刀菌 拮抗作用

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高效虾壳脱蛋白菌株的筛选、产酶条件优化及酶学性质研究 被引量：1

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作者 宋超东 殷豆豆 +7 位作者 谢晨杰 尹凯波 韦玉玲 李林利 黄宏智 张红岩 申乃坤 姜明国 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期103-111,共9页

该研究旨在筛选高效虾壳脱蛋白菌株并进行工艺优化及酶学性质研究。先通过单因素、Placket-Burman(PB)和正交优化试验对筛选菌株虾壳脱蛋白工艺优化,进一步对酶学性质和降解产物进行研究。结果表明,菌株铜绿假单胞菌(Pseudomonas aerugi... 该研究旨在筛选高效虾壳脱蛋白菌株并进行工艺优化及酶学性质研究。先通过单因素、Placket-Burman(PB)和正交优化试验对筛选菌株虾壳脱蛋白工艺优化,进一步对酶学性质和降解产物进行研究。结果表明,菌株铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)Gxun-7脱蛋白效果最好;最优产酶条件为:虾壳粉40 g/L,玉米浆5 g/L,接种量1%(体积分数),初始pH 7.0,发酵温度35℃,发酵时间48 h,优化后酶活性达(617.13±22.11)U/mL,较优化前提高了43.50%,此时,虾壳脱蛋白率为(82.61±0.54)%;菌株Gxun-7所产蛋白酶为诱导酶,酶的耐盐性较好,最适温度和pH值分别为60℃和7.0,除Cu^(2+)和Al^(3+)对酶活性有显著抑制外,其他金属离子对酶活影响不大,十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)和十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,CTAB)抑制酶活性超过40%,而β-巯基乙醇却能提高酶活性到468%;降解液中共检测出17种氨基酸,含量达1856.14 mg/L。因此,Gxun-7对虾壳具有高效脱蛋白能力,所产蛋白酶稳定性强,降解液中氨基酸含量丰富,为虾壳蛋白降解及利用提供理论依据。 展开更多

关键词 虾壳 脱蛋白 铜绿假单胞菌 条件优化 酶学性质

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降解亚硝酸盐菌株Bacillus velezensis GXMZU-B1的筛选、条件优化及初步应用 被引量：1

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作者 刘睿 梁颖 +7 位作者 殷豆豆 宋超东 莫祖琴 肖骏峰 易晗 张红岩 张彬 申乃坤 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期133-143,共11页

为解决高密度养殖引起的亚硝酸盐危害,筛选高效降解菌。从防城港虾塘采集水体和淤泥样品,先通过亚甲基蓝、碳酸钙平板初筛及亚硝酸盐降解效果复筛,选出降解效果最优的菌株,并进行生理生化及16S rRNA鉴定;进一步对菌株降解亚硝酸盐的温... 为解决高密度养殖引起的亚硝酸盐危害,筛选高效降解菌。从防城港虾塘采集水体和淤泥样品,先通过亚甲基蓝、碳酸钙平板初筛及亚硝酸盐降解效果复筛,选出降解效果最优的菌株,并进行生理生化及16S rRNA鉴定;进一步对菌株降解亚硝酸盐的温度、初始pH及无机盐等条件进行优化,最后对该菌株的安全性及其处理养殖高浓度亚硝酸盐尾水的能力进行了研究。结果表明,从初筛的53株菌中复筛得到1株对0.5 g·L^(-1)亚硝酸盐降解效率可达98%的菌株,并将其鉴定命名为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis GXMZU-B1);该菌株降解亚硝酸盐的最优条件为:温度30℃、pH 6~7、无需添加无机盐,接种发酵12 h对0.5 g·L^(-1)亚硝酸盐的降解可达98%以上;该菌株24 h可将养殖尾水中(28.73±1.08)mg·L^(-1)的亚硝酸盐几乎完全降解。菌株的安全性试验表明,该菌株不产生溶血圈,对常见抗生素敏感。综上所述,菌株B.velezensis GXMZU-B1具有高效降解亚硝酸盐的能力,且对环境安全,为高密度工厂化养殖中亚硝酸盐的积累问题提供了新的解决思路。 展开更多

关键词 亚硝酸盐 贝莱斯芽孢杆菌 菌株分离 水产养殖 养殖尾水

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虾蟹壳废弃物中几丁质的制备及应用进展

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作者 尹凯波 郑子露 +6 位作者 金嘉悦 潘小卓 谢勇俊 韦倩倩 申乃坤 王一兵 姜明国 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第20期407-414,共8页

随着虾蟹生产和消费量的逐渐增加,大量虾蟹壳直接当做垃圾处理,造成很大的环境压力。虾蟹壳中含有丰富的几丁质,如能对其进行提取制备,既有助于减轻环境污染又能提高资源利用率。受现有制备技术、生产成本和节能环保的影响,目前利用废... 随着虾蟹生产和消费量的逐渐增加,大量虾蟹壳直接当做垃圾处理,造成很大的环境压力。虾蟹壳中含有丰富的几丁质,如能对其进行提取制备,既有助于减轻环境污染又能提高资源利用率。受现有制备技术、生产成本和节能环保的影响,目前利用废弃虾蟹壳制备几丁质仍处于中小型规模。科研人员一直致力于开发新的制备方法及优化工艺,希望能够扩大虾蟹壳几丁质的生产规模,提高废弃资源利用效率。本文主要阐述了利用化学法、生物法、物理法从虾蟹壳废弃物中制备几丁质的研究现状,分析各种制备方法的优缺点、存在的问题和发展前景,以及几丁质在抑菌剂、吸附剂、生物膜等方面的应用情况。目前工业上主要采用传统酸碱法制备几丁质,其优势在于技术成熟,工艺流程简单,操作方便,但该方法使用强酸强碱,存在对环境二次污染的问题。与之相比,低共熔溶法、酶解法及微生物发酵法更具环境效益,因此开发低成本天然低共熔溶剂、构建重组酶、构建功能菌群,是未来虾蟹壳废弃物中制备几丁质的研究重点。 展开更多

关键词 虾蟹壳 几丁质 制备工艺 应用

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营养盐对波吉卵囊藻生长性能的影响

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作者 张彬 林原有 +4 位作者 原宝龙 朱昔恩 陈田聪 赵永贞 申乃坤 《广东农业科学》 CAS 2024年第10期88-96,共9页

【目的】研究氮、磷、碳和铁营养盐对波吉卵囊藻(Oocystis borgei)生长的影响,筛选出最佳营养盐配方,为其高效扩培提供参考。【方法】先利用单因素试验分析不同氮、磷、碳和铁源对波吉卵囊藻生长的影响,获得各自最佳营养盐及最适浓度,... 【目的】研究氮、磷、碳和铁营养盐对波吉卵囊藻(Oocystis borgei)生长的影响,筛选出最佳营养盐配方,为其高效扩培提供参考。【方法】先利用单因素试验分析不同氮、磷、碳和铁源对波吉卵囊藻生长的影响,获得各自最佳营养盐及最适浓度,再利用正交试验对波吉卵囊藻生长影响较大因素进行优化,得出最佳营养盐配方。【结果】单因素试验结果表明,波吉卵囊藻的最佳氮、磷、碳和铁源及浓度分别是:CO(NH_(2))_(2)160 mg/L、C_(3)H_(7)Na_(2)O_(6)P 8 mg/L、NaHCO_(3)1 g/L、FeCl_(3)0.2 mg/L;正交试验结果表明,各营养盐对波吉卵囊藻生长影响大小为:磷源>氮源>碳源,其中磷源对波吉卵囊藻生长影响最为显著(P<0.05),最佳营养盐配方为:CO(NH_(2))_(2)120 mg/L、C_(3)H_(7)Na_(2)O_(6)P 12 mg/L、NaHCO_(3)2.5 g/L,最优条件下藻细胞密度可达22.07×10^(6)cell/mL,比优化前(1.74×10^(6)cell/mL)提高12倍以上。【结论】确定了波吉卵囊藻最适氮、磷、碳和铁源及其浓度,且通过优化条件得出最佳营养盐配方,显著提高藻细胞密度。 展开更多

关键词 波吉卵囊藻 氮源 磷源 碳源 铁源 营养盐

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HPLC法测定云芝菌发酵茶中9种活性成分及抗氧化活性研究

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作者 王芳 刘洪存 +4 位作者 陆淑雯 杨立芳 黄盈 姜明国 孟娟 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第18期258-264,共7页

目的:建立同时测定云芝菌发酵茶中9种活性成分含量的高效液相色谱法,并对发酵前后茶叶中9种活性成分含量和抗氧化活性的变化进行研究。方法:采用Agilent C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.05%磷酸溶液和乙腈,梯度洗脱,... 目的:建立同时测定云芝菌发酵茶中9种活性成分含量的高效液相色谱法,并对发酵前后茶叶中9种活性成分含量和抗氧化活性的变化进行研究。方法:采用Agilent C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.05%磷酸溶液和乙腈,梯度洗脱,检测波长为280 nm、流速1.0 mL/min、柱温30℃。结果:与未发酵的对照组绿茶相比,云芝菌发酵茶中咖啡碱的含量无明显变化,没食子酸、可可碱和没食子儿茶素没食子酸酯的含量分别增加了0.4613%、0.3118%和0.5770%,没食子儿茶素、茶碱、表没食子儿茶素、表儿茶素和表没食子儿茶素没食子酸酯含量分别减少了0.0156%、0.0178%、1.2938%、1.1062%和4.0241%。体外抗氧化活性试验结果表明,发酵后茶叶对DPPH·和·OH的清除率均有显著性(P<0.05)降低。当浓度为2.0 mg/mL时,云芝菌发酵茶提取液对DPPH·和·OH的清除率分别为7.79%和9.65%。结论:云芝菌的固体发酵可改变茶叶中活性成分的含量和抗氧化活性,研究为云芝菌发酵茶的开发提供了实验依据。 展开更多

关键词 高效液相色谱法 云芝菌 发酵茶 绿茶 活性成分 抗氧化

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一株副干酪乳杆菌的分离、鉴定及其在酸粥发酵中的应用

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作者 窦瑾 李巧 +5 位作者 覃思绮 满媛媛 吴柳燕 田洪梅 姜明国 刘国芳 《食品研究与开发》 CAS 2024年第18期216-224,共9页

该试验从自然发酵酸粥中分离、鉴定在酸粥发酵中具有应用价值的菌株,并采用稀释涂布平板法从广西扶绥5份自然发酵酸粥中分离出79株隶属于3个属的5种乳酸菌,通过测定其生长特性、耐受性、抑菌性能和发酵粥样的理化指标,鉴定得到1株适于... 该试验从自然发酵酸粥中分离、鉴定在酸粥发酵中具有应用价值的菌株,并采用稀释涂布平板法从广西扶绥5份自然发酵酸粥中分离出79株隶属于3个属的5种乳酸菌,通过测定其生长特性、耐受性、抑菌性能和发酵粥样的理化指标,鉴定得到1株适于酸粥发酵的副干酪乳杆菌GX0002948。该菌株最适生长温度为37℃,具有耐高温、耐高盐、耐酸、耐胆盐的能力;该菌株的发酵液和上清液均能够抑制病原细菌结核分歧杆菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌的生长;该菌株通过人工接种用于发酵酸粥,各种理化指标、总蛋白含量、总氨基酸含量均优于自然发酵酸粥。综上,菌株副干酪乳杆菌GX0002948在酸粥发酵中具有应用和潜在的开发价值。 展开更多

关键词 酸粥 分离鉴定 副干酪乳杆菌 自然发酵 人工接种发酵

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亨氏马尾藻多酚提取工艺优化及稳定性研究

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作者 朱玉章 林坤 +5 位作者 吴金城 刘洪存 孟娟 孔超男 杨立芳 姜明国 《中国食品添加剂》 CAS 2024年第4期12-22,共11页

为探究亨氏马尾藻多酚的提取工艺及稳定性,以亨氏马尾藻为原料,采用超声辅助提取,在单因素实验基础上,以其多酚提取量为响应值,以液料比、乙醇浓度、超声温度、超声时间为考察因素,利用响应面法进行提取工艺优化。同时,探究光照、温度... 为探究亨氏马尾藻多酚的提取工艺及稳定性,以亨氏马尾藻为原料,采用超声辅助提取,在单因素实验基础上,以其多酚提取量为响应值,以液料比、乙醇浓度、超声温度、超声时间为考察因素,利用响应面法进行提取工艺优化。同时,探究光照、温度、pH、金属离子、氧化还原剂、食品添加剂等对多酚稳定性的影响。结果表明,超声功率400 W、超声时间36 min,乙醇浓度43%、液料比35∶1(mL/g)、超声温度54℃,其多酚提取量为748.32μg/g。稳定性研究结果显示,亨氏马尾藻多酚具有较好的光、热稳定性,在弱酸环境下较稳定。存储时应避免和Fe3+、强氧化剂以及柠檬酸接触。采用此优化工艺提取亨氏马尾藻多酚,含量高,且稳定性好,可为其后续在工业生产和产业应用方面提供理论依据。 展开更多

关键词 亨氏马尾藻 多酚 响应面 工艺优化 稳定性

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