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猪APOBEC3F基因克隆及真核表达载体的构建与鉴定
被引量：
4
1
作者
孙宇
罗佳
+1 位作者
马玉媛
章金刚
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第18期1904-1906,共3页
目的克隆猪载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F(apolipoprotein B mRNA editing enzyme,catalyticpolypeptide 3F,APOBEC3F)基因,构建真核表达载体实现其在体外表达与鉴定。方法分离4头21周龄,体质量25～30kg的雌性健康五指山猪的外...
目的克隆猪载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F(apolipoprotein B mRNA editing enzyme,catalyticpolypeptide 3F,APOBEC3F)基因,构建真核表达载体实现其在体外表达与鉴定。方法分离4头21周龄,体质量25～30kg的雌性健康五指山猪的外周血单个核细胞,Trizol法提取细胞总RNA,RT-PCR特异性扩增目的基因,目的基因插入真核表达载体pDsRed1-N1及改造的pCDNA3-Flage载体构建表达质粒并在PK-15细胞中进行表达。激光共聚焦显微镜及Western blot鉴定目的基因的表达。结果克隆的目的基因与公布的基因序列同源性达99%;激光共聚焦显微镜显示目的基因在PK-15细胞表达,且表达产物定位于细胞质内;Western blot检测示表达的目的蛋白大小与预期相符。结论成功构建了猪APOBEC3F真核表达载体。
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关键词
APOBEC3F
克隆
真核表达载体
鉴定
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职称材料
题名
猪APOBEC3F基因克隆及真核表达载体的构建与鉴定
被引量：
4
1
作者
孙宇
罗佳
马玉媛
章金刚
机构
军事医学
科学
院野战输血研究所
解放军第
广西大学动物科学技术学院预防兽医系
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第18期1904-1906,共3页
基金
国家自然科学基金(3107185)~~
文摘
目的克隆猪载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F(apolipoprotein B mRNA editing enzyme,catalyticpolypeptide 3F,APOBEC3F)基因,构建真核表达载体实现其在体外表达与鉴定。方法分离4头21周龄,体质量25～30kg的雌性健康五指山猪的外周血单个核细胞,Trizol法提取细胞总RNA,RT-PCR特异性扩增目的基因,目的基因插入真核表达载体pDsRed1-N1及改造的pCDNA3-Flage载体构建表达质粒并在PK-15细胞中进行表达。激光共聚焦显微镜及Western blot鉴定目的基因的表达。结果克隆的目的基因与公布的基因序列同源性达99%;激光共聚焦显微镜显示目的基因在PK-15细胞表达,且表达产物定位于细胞质内;Western blot检测示表达的目的蛋白大小与预期相符。结论成功构建了猪APOBEC3F真核表达载体。
关键词
APOBEC3F
克隆
真核表达载体
鉴定
Keywords
apolipoprotein B mRNA editing enzyme
catalytic polypeptide-like 3F
clone
eukaryotic expression vector
identification
分类号
R394-33 [医药卫生—医学遗传学]
R394.3 [医药卫生—医学遗传学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪APOBEC3F基因克隆及真核表达载体的构建与鉴定
孙宇
罗佳
马玉媛
章金刚
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
4
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