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PRRSV广西分离株GXYL-1403全基因克隆与序列分析被引量：11: 1; 作者林思远洪绍锋 +4 位作者黄加滨韦莹陈樱黄伟坚韦祖樟《动物医学进展》北大核心 2016年第2期44-49,共6页; 对本实验室所分离的1株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）毒株GXYL-1403进行全基因组克隆和序列分析。参考已发表的扩增全长PRRSV序列的13对特异性引物,用RT-PCR方法对病毒基因组进行分段扩增。将扩增得到的PCR片段克隆到pMD18-T载体上,... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒克隆序列分析遗传进化分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

广西PRRSV分离株GXNN1396全基因序列分析被引量：1: 2; 作者黄加滨韦莹 +5 位作者洪绍锋林思远何荣祥陈樱黄伟坚韦祖樟《动物医学进展》北大核心 2016年第1期1-6,共6页; 前期我们实验室分离鉴定了一株nsP2蛋白缺失49个氨基酸（aa）的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GXNN1396株。为了进一步对该毒株全基因组序列特性进行分析,将GXNN1396株病毒在Marc-145细胞上传至第3代,收集细胞上清,抽提该病毒RNA。用R... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因序列分析同源性分析遗传进化分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

2015年—2016年度南宁部分地区猪戊型肝炎病毒基因型分析被引量：4: 3; 作者贺微姚静 +8 位作者覃一峰林思远邹柳黄加滨韦莹欧阳康陈樱黄伟坚韦祖樟《动物医学进展》北大核心 2017年第3期5-10,共6页; 为了解广西猪群中戊型肝炎病毒(HEV)基因型,利用套式RT-PCR用对南宁周边猪场采集到的104份新鲜猪粪便进行HEV检测、分离并成功扩增和克隆了11株阳性毒株的ORF2基因部分保守片段。序列测定结果表明,11株HEV ORF2序列自身核苷酸同源性为97... 展开更多; 关键词戊型肝炎病毒基因型猪; 在线阅读下载PDF 职称材料

ISG15蛋白泛素结合酶UBCH6的原核表达及多克隆抗体制备被引量：4: 4; 作者李玉霄唐榕泽 +5 位作者高跃美冯佳佳李晓泉梁晶晶李晓宁罗廷荣《动物医学进展》北大核心 2020年第12期28-33,共6页; 通过抽提接毒猪瘟病毒(CSFV)的PK-15细胞RNA,以RT-PCR方法克隆UBCH6基因,并与pMD18-T载体连接,再通过双酶切法将UBCH6基因与原核表达载体pGEX-4T-1、真核表达载体pcDNA3.0连接。重组原核表达载体pGEX-UBCH6用感受态细胞BL21转化,并在低... 展开更多; 关键词 ISG15蛋白 UBCH6基因多克隆抗体猪瘟病毒蛋白诱导表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

钦北区强化农村家犬免疫促进狂犬病的防控被引量：2: 5; 作者苏萍谢民 +8 位作者班克满曹频英何大展张红云梁星雪曹晗梁晶晶李晓宁罗廷荣《广西畜牧兽医》 2019年第6期265-267,共3页; 狂犬病(Rabies)是由弹状病毒科的狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)侵入中枢神经系统(Central Nervous System,CNS)引起的一种高度嗜神经性急性致死性人兽共患传染病,也称“恐水症”,俗称“疯狗病”,可导致包括人在内的几乎所有温血动物死... 展开更多; 关键词人兽共患传染病狂犬病病毒弹状病毒科嗜神经性钦北区免疫促进恐水症犬咬伤; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪MAVS基因原核表达载体的构建及其多克隆抗体的制备: 6; 作者赵倩楠应雪 +4 位作者李晓泉张珂李晓宁梁晶晶罗廷荣《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期39-42,共4页; 通过RT-PCR从PK-15细胞系中扩增克隆MAVS(mitochondrial antiviral signaling protein)基因,构建原核表达载体p ET-MAVS220,转化感受态细胞Rosetta(DE3),利用IPTG诱导表达,重组MAVS经纯化后免疫4周龄昆明系小鼠制备抗线粒体抗病病毒信... 展开更多; 关键词猪MAVS 原核表达多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PRRSV广西分离株GXYL-1403全基因克隆与序列分析被引量：11: 1; 作者林思远洪绍锋黄加滨韦莹陈樱黄伟坚韦祖樟; 机构广西大学动物科学技术学院动物传染病研究室; 出处《动物医学进展》北大核心 2016年第2期44-49,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31372444) 广西大学科研基金项目(XGZ130959); 文摘对本实验室所分离的1株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）毒株GXYL-1403进行全基因组克隆和序列分析。参考已发表的扩增全长PRRSV序列的13对特异性引物,用RT-PCR方法对病毒基因组进行分段扩增。将扩增得到的PCR片段克隆到pMD18-T载体上,获得的重组质粒经PCR鉴定后进行序列测定。通过软件对所扩增序列进行拼接,获得GXYL-1403的全长序列,并对GXYL-1403进行比较和遗传进化分析。结果表明GXYL1403株基因序列全长为15 018bp,与国内外多株PRRSV毒株进行同源性比较发现,与VR-2332的相似性为89.1%,与TJ、JXA1、HEB1、HUB1、HUB2、TP株同源性达到了97.9%～98.1%。另外,GXYL-1403分离株nsp2蛋白含有高致病性PRRSV特异的1＋29个氨基酸的缺失。特别重要的是,在缺失29个氨基酸区域的上游,含有连续20个氨基酸缺失,在下游出现了连续74个氨基酸的缺失。遗传进化分析发现美洲型PRRSV主要分为3个亚群,GXYL-1403跟高致病性PRRSV毒株属于同一分支,证实了GXYL-1403株为美洲型PRRSV毒株。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒克隆序列分析遗传进化分析; Keywords Porcine reproductive and respiratory syndrome virus clone sequence analysis phylogenetic a-nalysis; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学] Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名广西PRRSV分离株GXNN1396全基因序列分析被引量：1: 2; 作者黄加滨韦莹洪绍锋林思远何荣祥陈樱黄伟坚韦祖樟; 机构广西大学动物科学技术学院动物传染病研究室广西陆川县陆透水库管理所; 出处《动物医学进展》北大核心 2016年第1期1-6,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31372444) 广西大学科研基金项目(XGZ130959); 文摘前期我们实验室分离鉴定了一株nsP2蛋白缺失49个氨基酸（aa）的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）GXNN1396株。为了进一步对该毒株全基因组序列特性进行分析,将GXNN1396株病毒在Marc-145细胞上传至第3代,收集细胞上清,抽提该病毒RNA。用RT-PCR检测方法对GXNN1396基因组进行分段扩增、克隆、序列比较和遗传进化分析。结果表明,GXNN1 396全长15 263核苷酸（nt）,不包括5′帽子结构和3′Poly A尾。其中,5′非翻译区（5′UTR）长为189nt,3′UTR长151nt,ORF1a、ORF1b、ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6、ORF7分别为7 422、4 382、771、765、537、603、525nt和372nt。与国内外的PRRSV毒株核苷酸序列的同源性进行了比较显示,GXNN1396与欧洲经典毒株LV和VR2332株的同源性分别为61%和88.8%,与TJ、JXwn06、JXA1在全基因上的同源性高达97.2%~97.3%,说明GXNN1396株是一株典型的美洲型PRRSV毒株。遗传进化分析表明美洲型PRRSV主要分为3个亚群,GXNN1396与高致病性PRRSV毒株属于同一分支。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因序列分析同源性分析遗传进化分析; Keywords Porcine reproductive and respiratory syndrome virus full-length sequence analysis homology analysis phylogenetic analysis; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名2015年—2016年度南宁部分地区猪戊型肝炎病毒基因型分析被引量：4: 3; 作者贺微姚静覃一峰林思远邹柳黄加滨韦莹欧阳康陈樱黄伟坚韦祖樟; 机构广西大学动物科学技术学院动物传染病研究室; 出处《动物医学进展》北大核心 2017年第3期5-10,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31372444) 广西大学科研基金项目(XGZ130959); 文摘为了解广西猪群中戊型肝炎病毒(HEV)基因型,利用套式RT-PCR用对南宁周边猪场采集到的104份新鲜猪粪便进行HEV检测、分离并成功扩增和克隆了11株阳性毒株的ORF2基因部分保守片段。序列测定结果表明,11株HEV ORF2序列自身核苷酸同源性为97.7%~100%,推导编码的氨基酸同源性为97.9%~100%;与4型HEV代表毒株Ch-S-1、Ch-T11、swGX40等的核苷酸同源性为84.6%~90.6%,而与其他各型之间的同源性较低。系统发育进化树结果表明,11株HEV广西株为基因4型,其中,10株HEV为4a亚型,1株毒株为4e亚型。结果表明,广西猪群中流行的HEV均为基因4型,且以4a亚型为优势流行毒株。; 关键词戊型肝炎病毒基因型猪; Keywords HEV genotype swine; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ISG15蛋白泛素结合酶UBCH6的原核表达及多克隆抗体制备被引量：4: 4; 作者李玉霄唐榕泽高跃美冯佳佳李晓泉梁晶晶李晓宁罗廷荣; 机构广西大学动物科学技术学院动物传染病研究室亚热带农业生物资源保护利用国家重点实验室; 出处《动物医学进展》北大核心 2020年第12期28-33,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31660722) 广西自然科学基金项目(2017GXNSFAA198137) 国家重点研发计划项目(2018YFD0500104)。; 文摘通过抽提接毒猪瘟病毒(CSFV)的PK-15细胞RNA,以RT-PCR方法克隆UBCH6基因,并与pMD18-T载体连接,再通过双酶切法将UBCH6基因与原核表达载体pGEX-4T-1、真核表达载体pcDNA3.0连接。重组原核表达载体pGEX-UBCH6用感受态细胞BL21转化,并在低温条件下,用低浓度的IPTG诱导表达UBCH6重组蛋白,经SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色结果显示,在30℃、用0.05 mmol/L IPTG诱导时UBCH6表达效果最好,而且UBCH6重组蛋白主要以可溶性的形式在菌液中表达。UBCH6重组蛋白经过Ni-NTA纯化后与弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂等体积混合乳化并免疫4周龄昆明小鼠,从而制备出UBCH6多克隆抗体,重组真核表达载体pcDNA3.0-UBCH6以化学转染人工脂质体法导入293T细胞中,Western blot检测制备的UBCH6多克隆抗体能与真核表达细胞蛋白发生反应,反应效价可达1∶10000,反应性良好。Western blot检测UBCH6多克隆抗体的特异性,ISG15多克隆抗体、UBCH6多克隆抗体都能与接毒CSFV、转染PolyI:C的PK-15细胞蛋白发生良好反应,且蛋白表达量与时间呈正相关。; 关键词 ISG15蛋白 UBCH6基因多克隆抗体猪瘟病毒蛋白诱导表达; Keywords ISG15 protein UBCH6 gene polyclonal antibody Classical swine fever virus protein induced expression; 分类号 S852.43 [农业科学—基础兽医学] S852.651 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名钦北区强化农村家犬免疫促进狂犬病的防控被引量：2: 5; 作者苏萍谢民班克满曹频英何大展张红云梁星雪曹晗梁晶晶李晓宁罗廷荣; 机构钦州市钦北区动物疫病预防控制中心广西大学动物科学技术学院动物传染病研究室; 出处《广西畜牧兽医》 2019年第6期265-267,共3页; 基金国家自然科学基金面上项目(31570147); 文摘狂犬病(Rabies)是由弹状病毒科的狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)侵入中枢神经系统(Central Nervous System,CNS)引起的一种高度嗜神经性急性致死性人兽共患传染病,也称“恐水症”,俗称“疯狗病”,可导致包括人在内的几乎所有温血动物死亡。狂犬病呈世界性流行,WHO估计全球每年约5.9万人因该病死亡,其中95%人患狂犬病由疯狗咬伤引起[1]。亚洲每年有1100万人被犬咬伤,中国是受该病危害最严重的国家之一[2],人死亡病例仅次于印度,世界排名第二,集中于广西广东及周边省份等南部地区。目前尚无药物治疗狂犬病,只能做好预防才能有效控制该病的发生和传播。; 关键词人兽共患传染病狂犬病病毒弹状病毒科嗜神经性钦北区免疫促进恐水症犬咬伤; 分类号 S858.292.53 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪MAVS基因原核表达载体的构建及其多克隆抗体的制备: 6; 作者赵倩楠应雪李晓泉张珂李晓宁梁晶晶罗廷荣; 机构广西大学动物科学技术学院动物传染病研究室广西大学亚热带农业生物资源保护利用国家重点实验室; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期39-42,共4页; 基金广西自然科学基金重点项目(2012GXNSFDA053009) 国家自然科学基金项目(31460653); 文摘通过RT-PCR从PK-15细胞系中扩增克隆MAVS(mitochondrial antiviral signaling protein)基因,构建原核表达载体p ET-MAVS220,转化感受态细胞Rosetta(DE3),利用IPTG诱导表达,重组MAVS经纯化后免疫4周龄昆明系小鼠制备抗线粒体抗病病毒信号蛋白(MAVS)多克隆抗体。诱导表达的最佳条件为IPTG 0.05 mmol/L,37℃诱导6 h,重组MAVS以可溶性蛋白和包涵体两种形式表达。应用该重组蛋白免疫小鼠获得的抗MAVS多克隆抗体与纯化的重组MAVS蛋白反应效价可达1∶16 000;该抗体与Poly(I∶C)刺激PK-15细胞产生的MAVS及与转染了重组MAVS基因真核表达载体pcDNA3.0-MAVS的BHK-21细胞表达的MAVS蛋白发生特异性反应,效价可达1∶1 000,特异性良好。; 关键词猪MAVS 原核表达多克隆抗体; Keywords Swine MAVS Prokaryotic expression Polyclonal antibody; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	PRRSV广西分离株GXYL-1403全基因克隆与序列分析	林思远洪绍锋黄加滨韦莹陈樱黄伟坚韦祖樟	《动物医学进展》北大核心	2016	11	在线阅读下载PDF 职称材料
2	广西PRRSV分离株GXNN1396全基因序列分析	黄加滨韦莹洪绍锋林思远何荣祥陈樱黄伟坚韦祖樟	《动物医学进展》北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	2015年—2016年度南宁部分地区猪戊型肝炎病毒基因型分析	贺微姚静覃一峰林思远邹柳黄加滨韦莹欧阳康陈樱黄伟坚韦祖樟	《动物医学进展》北大核心	2017	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	ISG15蛋白泛素结合酶UBCH6的原核表达及多克隆抗体制备	李玉霄唐榕泽高跃美冯佳佳李晓泉梁晶晶李晓宁罗廷荣	《动物医学进展》北大核心	2020	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	钦北区强化农村家犬免疫促进狂犬病的防控	苏萍谢民班克满曹频英何大展张红云梁星雪曹晗梁晶晶李晓宁罗廷荣	《广西畜牧兽医》	2019	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	猪MAVS基因原核表达载体的构建及其多克隆抗体的制备	赵倩楠应雪李晓泉张珂李晓宁梁晶晶罗廷荣	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料