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奶牛附红细胞体的分类鉴定及诊断方法的建立 被引量:6
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作者 陈明 黄维义 +5 位作者 张为宇 韦家周 石云良 周春明 张诗新 张宇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第1期3-7,共5页
为了从分子水平上确定奶牛附红细胞体(E.wenyoni)的分类学地位及建立奶牛附红细胞体感染诊断方法。本研究通过利用原核生物16S rRNA基因通用引物,对分离得到的奶牛附红细胞体(广西株,E.wenyoni-GX)进行16S rRNA基因的克隆及测序,并建立... 为了从分子水平上确定奶牛附红细胞体(E.wenyoni)的分类学地位及建立奶牛附红细胞体感染诊断方法。本研究通过利用原核生物16S rRNA基因通用引物,对分离得到的奶牛附红细胞体(广西株,E.wenyoni-GX)进行16S rRNA基因的克隆及测序,并建立系统发育进化树;同时根据测序结果设计诊断引物,建立奶牛附红细胞体感染的PCR诊断方法。结果扩增出长约1.5kbp的奶牛附红细胞体的16S rRNA基因片段;特异性试验和敏感性试验表明,所建立的PCR方法与常见支原体、细菌及原虫无交叉反应,能检测奶牛附红细胞体最低DNA量为0.145fg。通过试验结果分析,建议将奶牛附红细胞体这类血营养菌划归入支原体科、支原体属;同时,所建立的PCR诊断方法是特异、敏感、快速的,可应用于临床检测。 展开更多
关键词 附红细胞体 16S RRNA基因 PCR 克隆 系统发育进化树
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奶牛附红细胞体感染PCR诊断方法的建立 被引量:8
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作者 陈明 黄维义 +5 位作者 张为宇 周学光 周春明 韦家周 阳玉梅 张宇 《中国畜牧兽医》 CAS 2005年第4期22-23,共2页
为建立特异、敏感、快速的奶牛附红细胞体感染诊断方法,该研究根据本实验室已测得的奶牛附红细胞体16 S r RNA基因序列,设计1对种特异性引物,建立了奶牛附红细胞体的PCR诊断方法。特异性试验和敏感性试验结果表明,该诊断方法与猪肺炎支... 为建立特异、敏感、快速的奶牛附红细胞体感染诊断方法,该研究根据本实验室已测得的奶牛附红细胞体16 S r RNA基因序列,设计1对种特异性引物,建立了奶牛附红细胞体的PCR诊断方法。特异性试验和敏感性试验结果表明,该诊断方法与猪肺炎支原体、鸡毒支原体、大肠杆菌、肠道沙门氏菌、葡萄球菌、鸡艾美耳球虫、牛双芽巴贝斯虫无交叉反应,能检测的奶牛附红细胞体最低DNA量为0 .15 4 fg,同时能检测出在4℃存放长达3个月的血样。通过临床血样检测,证明该方法可用于本病的早期诊断。 展开更多
关键词 奶牛 附红细胞体 PCR
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