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猪伪狂犬病病毒GXBB株的分离鉴定及gE基因的克隆分析
被引量：
10
1
作者
王仰杰
刘芳
+6 位作者
华俊
马玲
陈忠伟
张伟
黄红梅
陈凤莲
吴健敏
《中国畜牧兽医》
CAS
2008年第11期32-35,共4页
从广西玉林博自某猪场采集的发病仔猪大脑和内脏病料中分离到一株病毒。病毒接种家兔后引起典型的奇痒、神经症状，接种PK-15细胞出现典型的细胞病变，病毒效价（TCID50）为10^-7.22／0．1ml。设计扩增PRVgE胞外区基因的引物，能扩增出...
从广西玉林博自某猪场采集的发病仔猪大脑和内脏病料中分离到一株病毒。病毒接种家兔后引起典型的奇痒、神经症状，接种PK-15细胞出现典型的细胞病变，病毒效价（TCID50）为10^-7.22／0．1ml。设计扩增PRVgE胞外区基因的引物，能扩增出约947bp的特异性片段，将扩增出的目的片段进行克隆、测序，并与国内外不同PRV毒株进行分析比较，发现该毒株与国内MinA株、Ea株、SH株、LA株、GXB株、GXW株核苷酸同源性在98．7％～99．4％之间，氨基酸同源性在98．1％～99．1％之间，上述结果证实该分离毒株为伪狂犬病病毒，命名为GXBB株。GXBB株与国内流行毒株同源性很高，说明目前广西PRV流行株变异不大。这为下一步广西伪狂犬病的预防和净化工作提供科学的理论基础。
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关键词
猪
伪狂犬病病毒
PK-15细胞
gE胞外区基因
分离鉴定
序列分析
在线阅读
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职称材料
猪伪狂犬病病毒gE抗体胶体金免疫层析检测方法的建立及应用
被引量：
9
2
作者
廖文军
吴健敏
+4 位作者
谭攀
覃绍敏
陈凤莲
马玲
张伟
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010年第9期12-16,32,共6页
以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)-猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为诊断抗原和胶体金标记物,以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,制作检测猪伪狂犬病毒gE抗体的双抗原胶体金试纸条。利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳...
以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)-猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为诊断抗原和胶体金标记物,以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,制作检测猪伪狂犬病毒gE抗体的双抗原胶体金试纸条。利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳工作浓度为17.6μg,检测线诊断抗原最佳标记量为1.76μg,血清最佳稀释度为1∶10,作用时间15 min,与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪布鲁菌(Brucella)阳性血清和PRVgE缺失疫苗接种的猪免疫血清检测线均不出现红色条带,与PRV标准阳性血清反应检测线出现红色条带。试纸条操作简单,肉眼于15 min内可判定结果;试纸条在室温保存6个月,其特异性和敏感性没有明显变化;与美国IDEXX和法国LSI gE-ELISA抗体检测诊断试剂盒检测结果比较,1 164份猪血清的符合率均为90.55%。制备的胶体金试纸条具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。
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关键词
伪狂犬病毒
金标免疫层析法
GE基因
抗体检测
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职称材料
题名
猪伪狂犬病病毒GXBB株的分离鉴定及gE基因的克隆分析
被引量：
10
1
作者
王仰杰
刘芳
华俊
马玲
陈忠伟
张伟
黄红梅
陈凤莲
吴健敏
机构
广西
大学
动物
科学技术学院
广西
兽医研究所
广西博白县动物疾病预防控制中心
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
2008年第11期32-35,共4页
基金
广西壮族自治区科技攻关项目(桂科攻0537008-3A3桂科攻0632002-1-2)
文摘
从广西玉林博自某猪场采集的发病仔猪大脑和内脏病料中分离到一株病毒。病毒接种家兔后引起典型的奇痒、神经症状，接种PK-15细胞出现典型的细胞病变，病毒效价（TCID50）为10^-7.22／0．1ml。设计扩增PRVgE胞外区基因的引物，能扩增出约947bp的特异性片段，将扩增出的目的片段进行克隆、测序，并与国内外不同PRV毒株进行分析比较，发现该毒株与国内MinA株、Ea株、SH株、LA株、GXB株、GXW株核苷酸同源性在98．7％～99．4％之间，氨基酸同源性在98．1％～99．1％之间，上述结果证实该分离毒株为伪狂犬病病毒，命名为GXBB株。GXBB株与国内流行毒株同源性很高，说明目前广西PRV流行株变异不大。这为下一步广西伪狂犬病的预防和净化工作提供科学的理论基础。
关键词
猪
伪狂犬病病毒
PK-15细胞
gE胞外区基因
分离鉴定
序列分析
Keywords
pseudorabies virus
PK-15 cell
gE gene
isolation and identification
sequence analysis
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
猪伪狂犬病病毒gE抗体胶体金免疫层析检测方法的建立及应用
被引量：
9
2
作者
廖文军
吴健敏
谭攀
覃绍敏
陈凤莲
马玲
张伟
机构
广西
兽医研究所
深圳三方圆生物科技有限公司
广西博白县动物疾病预防控制中心
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010年第9期12-16,32,共6页
基金
广西科技攻关项目(桂科攻0537008-3A3
桂科攻0632002-1-2)
文摘
以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)-猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为诊断抗原和胶体金标记物,以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,制作检测猪伪狂犬病毒gE抗体的双抗原胶体金试纸条。利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳工作浓度为17.6μg,检测线诊断抗原最佳标记量为1.76μg,血清最佳稀释度为1∶10,作用时间15 min,与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪布鲁菌(Brucella)阳性血清和PRVgE缺失疫苗接种的猪免疫血清检测线均不出现红色条带,与PRV标准阳性血清反应检测线出现红色条带。试纸条操作简单,肉眼于15 min内可判定结果;试纸条在室温保存6个月,其特异性和敏感性没有明显变化;与美国IDEXX和法国LSI gE-ELISA抗体检测诊断试剂盒检测结果比较,1 164份猪血清的符合率均为90.55%。制备的胶体金试纸条具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。
关键词
伪狂犬病毒
金标免疫层析法
GE基因
抗体检测
Keywords
Pseudorabies virus
colloidal gold immunochromatographic assay
gE gene
antibody detection
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪伪狂犬病病毒GXBB株的分离鉴定及gE基因的克隆分析
王仰杰
刘芳
华俊
马玲
陈忠伟
张伟
黄红梅
陈凤莲
吴健敏
《中国畜牧兽医》
CAS
2008
10
在线阅读
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职称材料
2
猪伪狂犬病病毒gE抗体胶体金免疫层析检测方法的建立及应用
廖文军
吴健敏
谭攀
覃绍敏
陈凤莲
马玲
张伟
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010
9
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