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题名山药Actin基因片段的克隆及表达分析
被引量：6
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作者
龚明霞
周芸伊
王爱勤
罗海玲
何龙飞
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机构
广西大学农学院
广西农科院作物遗传改良生物技术重点实验室
广西农科院蔬菜研究所
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期73-80,共8页
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基金
国家自然科学基金项目(30760126)
公益性行业(农业)科研专项(200903022)
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文摘
通过山药Actin基因的克隆和表达分析,为研究山药生长发育中肌动蛋白的作用及其他基因的表达和调控奠定基础。根据Gen Bank中已经公布的其他植物肌动蛋白基因(Actin)的保守序列设计一对简并引物,采用RT-PCR技术从山药块茎中分离出1个Actin基因cDNA片段,命名为DoActin。片段长度为1 091 bp,编码357个氨基酸,并提交Gen Bank(登录号:KU669295)。与NCBI核酸和蛋白质数据库序列比对,该序列与其他植物Actin基因核苷酸序列的同源性均在83%以上,氨基酸序列的同源性均在97%以上。进化分析结果显示,DoActin与海枣Actin-2、木本棉Actin-7的亲缘关系最近。实时定量PCR结果显示,DoActin在山药叶片、地上茎和地下块茎以及不同发育期的块茎和叶片中表达量相对稳定,表明其适宜作为山药的内参基因。
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关键词
山药
ACTIN基因
克隆
表达分析
序列分析
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Keywords
Dioscorea opposite
Actin gene
cloning
expression analysis
sequence analysis
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分类号
Q943.2
[生物学—植物学]
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题名用磁珠富集法从AFLP片段中分离微卫星DNA标记
被引量：3
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作者
高国庆
He Guohao
李杨瑞
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机构
广西农科院作物遗传改良生物技术实验室
TuskegeeUniversity
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出处
《花生学报》
2003年第B11期272-276,共5页
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文摘
研究将花生基因组DNA经酶切后转变成AFLP DNA片段,然后用生物素标记的简单重复序列(SSR)作探针与其杂交,杂交复合物固定到包被有链亲和素的磁珠上,经过一系列的洗涤过程,含有SSR的AFLP片段被吸附在磁珠表面。这些片段经洗脱下来后,先用对应的AFLP引物扩增,再进行克隆和测序,根据SSR两端的保守序列设计引物,经过多态性分析后,便可得到微卫星DNA标记。整个实验过程操作简单、消耗少,可在一周内完成,可作为从植物中分离SSR的一种简单有效的方法。
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关键词
花生
AFLP片段
微卫星DNA标记
分离
磁珠富集法
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分类号
S188
[农业科学—农业基础科学]
S565.2
[农业科学—作物学]
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