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纳米抗体及其在兽医领域的研究现状 被引量:3
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作者 胡湘云 曹艳红 +4 位作者 吕玲燕 刘征 黄发才 吴柱月 肖正中 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3164-3172,共9页
纳米抗体是一种衍生于骆驼科和鲨鱼类动物的单域抗体,与传统抗体相比,它具有分子量小、结构稳定、易于改造和表达、低免疫原性、高抗原结合性、组织穿透性强等优点,独特的分子特性使其在诊断和治疗各种疾病及检测方面展现出良好应用前... 纳米抗体是一种衍生于骆驼科和鲨鱼类动物的单域抗体,与传统抗体相比,它具有分子量小、结构稳定、易于改造和表达、低免疫原性、高抗原结合性、组织穿透性强等优点,独特的分子特性使其在诊断和治疗各种疾病及检测方面展现出良好应用前景。本文总结了纳米抗体的结构、特性、文库类型、筛选与表达策略,及其在动物疫病预防、诊断和治疗,动物产品食源性病原体和药物残留检验中的研究现状,并对纳米抗体的局限性和未来发展方向进行分析。 展开更多
关键词 纳米抗体 特性 动物疫病防控 动物产品检验
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陆川猪MYL 2基因生物信息学分析、真核表达载体构建及组织表达研究 被引量:2
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作者 潘鹏丞 雷宗全 +6 位作者 李显 胡湘云 秦谦涛 覃兆鲜 关志惠 陈宝剑 谢炳坤 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1796-1806,共11页
【目的】了解陆川猪肌球蛋白轻链2(myosin light chain 2,MYL2)基因CDS区序列及其编码蛋白的结构和功能,探究MYL 2基因对肌肉生长发育的影响,为陆川猪的开发利用提供分子基础。【方法】采用RT-PCR技术扩增陆川猪MYL 2基因CDS区,利用MegA... 【目的】了解陆川猪肌球蛋白轻链2(myosin light chain 2,MYL2)基因CDS区序列及其编码蛋白的结构和功能,探究MYL 2基因对肌肉生长发育的影响,为陆川猪的开发利用提供分子基础。【方法】采用RT-PCR技术扩增陆川猪MYL 2基因CDS区,利用MegAlign软件对陆川猪MYL 2基因与不同物种进行相似性比对和系统进化树构建,并通过生物信息学软件分析MYL2蛋白理化性质、疏水性和跨膜结构等;构建MYL2基因真核表达载体,利用脂质体法将重组质粒转染C2C12细胞并观察荧光;通过实时荧光定量PCR检测MYL 2基因在陆川猪不同组织中的表达情况。【结果】陆川猪MYL 2基因CDS区全长501 bp,编码166个氨基酸,与NCBI上公布的野猪MYL 2基因相似性为99.6%,存在2处突变:156 bp处C突变为T,为同义突变;404 bp处T突变为C,使异亮氨酸(I)突变为苏氨酸(T)。生物信息学分析显示,MYL2蛋白原子总数为2633个,分子质量为18.879 ku,理论等电点(pI)为4.83,不存在跨膜结构,无信号肽,为非分泌蛋白。MYL2蛋白有16个位点可能会被磷酸化,在第78位氨基酸有1个N-糖基化位点。亚细胞定位结果显示,MYL2蛋白主要存在于细胞质(56.5%)、细胞骨架(21.7%)、线粒体(8.7%)、细胞核(8.7%)和液泡(4.3%)中。MYL2蛋白二级结构主要由α-螺旋、无规则卷曲、β-转角和延伸链组成,占比分别为57.83%、29.52%、9.04%和3.61%。细胞试验结果显示,转染48 h后试验组和对照组均有荧光,与对照组相比,试验组MYL 2基因表达量极显著升高(P<0.01)。不同组织中MYL 2基因表达量由高到低依次为心脏、背最长肌、肝脏、皮下脂肪、肺脏、脾脏和肾脏,且在背最长肌中的表达量显著高于除心脏外的其他组织(P<0.05)。【结论】本试验成功克隆陆川猪MYL 2基因CDS区,构建了真核表达载体和组织表达谱,并对其所编码蛋白的结构和功能进行了分析,为探究MYL 2基因在肌肉生长发育中的作用及陆川猪的开发利用提供了分子依据。 展开更多
关键词 陆川猪 MYL2基因 生物信息学 真核表达载体
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