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2020-2022年广西地区猪圆环病毒3型检测及遗传进化分析
1
作者 刘文波 李思雨 +9 位作者 庞燕丽 陈国昌 刘嘉琪 覃建光 覃一峰 陈樱 欧阳康 黄伟坚 黄稳妃 韦祖樟 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第4期213-223,共11页
为了解广西地区猪圆环病毒3型(PCV3)的流行病学特点及遗传变异情况,本研究对2020-2022年采自广西不同地区屠宰场健康猪组织(肝脏、脾脏、肺脏、淋巴结等)和血清样品68份以及规模养猪场或散养户猪场的病死猪组织和血清样品162份,进行PCR... 为了解广西地区猪圆环病毒3型(PCV3)的流行病学特点及遗传变异情况,本研究对2020-2022年采自广西不同地区屠宰场健康猪组织(肝脏、脾脏、肺脏、淋巴结等)和血清样品68份以及规模养猪场或散养户猪场的病死猪组织和血清样品162份,进行PCR检测。随机选取部分PCV3阳性样品进行全基因测序,并与GenBank中收录的23株参考序列进行比对和遗传进化分析。结果显示:PCV3阳性率为17.83%,对随机选取的24份PCV3阳性样品进行扩增测序,经遗传变异分析国内主要流行PCV3a和PCV3b两个基因型,在14株PCV3a毒株中,其中1株属于PCV3a-1亚型,7株属于PCV3a-2亚型,6株属于PCV3a-IM亚型,另外10株属于PCV3b亚型;2020-2021年,广西流行优势毒株为PCV3a,2022年,PCV3b替代PCV3a成为优势毒株;全基因组相似性分析显示,24株PCV3基因序列与参考毒株的相似性为98.6%~99.8%;对PCV3毒株的Cap蛋白进行氨基酸比较分析,结果显示,Cap蛋白共有4个高突变区,有2个高突变区是位于T细胞抗原表位区,这些突变可能对病毒的感染性和抗原性有所影响;值得注意的是,Cap蛋白的24和27位氨基酸残基的突变与PCV3的分型密切相关。研究结果有助于了解广西地区的PCV3流行情况和遗传进化动态。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 CAP蛋白 全基因组扩增 遗传进化分析
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A型塞内卡病毒VP2蛋白多克隆抗体制备与竞争ELISA方法的建立
2
作者 何启杰 农作荣 +7 位作者 王豪 牛晨霞 莫勇芳 欧阳康 陈樱 黄伟坚 黄稳妃 韦祖樟 《动物医学进展》 北大核心 2025年第2期23-29,共7页
依据A型塞内卡病毒(SVA)结构蛋白VP2基因序列构建原核表达质粒pET-30a-VP2,经转化和诱导,表达出VP2重组蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,采集血清获得VP2的多克隆抗体。用间接ELISA方法测定血清中VP2抗体效价,并用Western blot与IFA验证其... 依据A型塞内卡病毒(SVA)结构蛋白VP2基因序列构建原核表达质粒pET-30a-VP2,经转化和诱导,表达出VP2重组蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,采集血清获得VP2的多克隆抗体。用间接ELISA方法测定血清中VP2抗体效价,并用Western blot与IFA验证其特异性。随后建立竞争ELISA方法,并对实验室收集的2016-2019年广西11个地区64个规模猪场592份猪血清进行SVA抗体检测。结果显示,诱导表达出的重组VP2蛋白主要以可溶性形式表达,血清中VP2抗体效价大于1∶64000,且制备的VP2抗体能特异结合SVA感染细胞中的VP2蛋白。竞争ELISA检测结果显示广西地区猪场SVA血清阳性率高达76.6%,血清样品阳性率高达55.9%,研究结果为SVA的检测和研究奠定了基础。 展开更多
关键词 A型塞内卡 VP2蛋白 原核表达 多克隆抗体 竞争ELISA
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表达IFN-α的重组猪繁殖与呼吸综合病毒的构建及生物学特性分析
3
作者 黄静 王玉旭 +5 位作者 王豪 陈樱 欧阳康 黄伟坚 黄稳妃 韦祖樟 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期48-53,共6页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害我国生猪业的重要疫病之一,其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),是一种免疫抑制性病毒。干扰素(IFN)是一类具有免疫调节功能和抗病毒作用的细胞因子。IFN-α除更直接的抗病毒作用外,还可以调节宿主... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害我国生猪业的重要疫病之一,其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),是一种免疫抑制性病毒。干扰素(IFN)是一类具有免疫调节功能和抗病毒作用的细胞因子。IFN-α除更直接的抗病毒作用外,还可以调节宿主的先天性和适应性免疫。论文构建表达IFN-α的重组PRRSV,分析重组病毒的生物学特性以及IFN-α的生物学活性。通过反向遗传操作方法将IFN-α插入到PRRSV ORF1b和ORF2a之间,重组质粒转染细胞后可以拯救出重组病毒(rGXAM-P-IFN-α)。插入到PRRSV基因组中的IFN-α可遗传稳定9代。重组病毒生长特性分析可发现rGXAM-P-IFN-α复制能力显著低于亲本病毒。rGXAM-P-IFN-α感染猪肺泡巨噬细胞(PAM)可显著上调抗病毒基因(PKR,ISG15和ISG54)mRNA表达水平,为进一步研发新型PRRSV疫苗提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 感染性克隆 Α干扰素 抗病毒基因
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