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A型塞内卡病毒VP2蛋白多克隆抗体制备与竞争ELISA方法的建立
1
作者
何启杰
农作荣
+7 位作者
王豪
牛晨霞
莫勇芳
欧阳康
陈樱
黄伟坚
黄稳妃
韦祖樟
《动物医学进展》
北大核心
2025年第2期23-29,共7页
依据A型塞内卡病毒(SVA)结构蛋白VP2基因序列构建原核表达质粒pET-30a-VP2,经转化和诱导,表达出VP2重组蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,采集血清获得VP2的多克隆抗体。用间接ELISA方法测定血清中VP2抗体效价,并用Western blot与IFA验证其...
依据A型塞内卡病毒(SVA)结构蛋白VP2基因序列构建原核表达质粒pET-30a-VP2,经转化和诱导,表达出VP2重组蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,采集血清获得VP2的多克隆抗体。用间接ELISA方法测定血清中VP2抗体效价,并用Western blot与IFA验证其特异性。随后建立竞争ELISA方法,并对实验室收集的2016-2019年广西11个地区64个规模猪场592份猪血清进行SVA抗体检测。结果显示,诱导表达出的重组VP2蛋白主要以可溶性形式表达,血清中VP2抗体效价大于1∶64000,且制备的VP2抗体能特异结合SVA感染细胞中的VP2蛋白。竞争ELISA检测结果显示广西地区猪场SVA血清阳性率高达76.6%,血清样品阳性率高达55.9%,研究结果为SVA的检测和研究奠定了基础。
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关键词
A型塞内卡
VP2蛋白
原核表达
多克隆抗体
竞争ELISA
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职称材料
表达IFN-α的重组猪繁殖与呼吸综合病毒的构建及生物学特性分析
2
作者
黄静
王玉旭
+5 位作者
王豪
陈樱
欧阳康
黄伟坚
黄稳妃
韦祖樟
《动物医学进展》
北大核心
2024年第3期48-53,共6页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害我国生猪业的重要疫病之一,其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),是一种免疫抑制性病毒。干扰素(IFN)是一类具有免疫调节功能和抗病毒作用的细胞因子。IFN-α除更直接的抗病毒作用外,还可以调节宿主...
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害我国生猪业的重要疫病之一,其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),是一种免疫抑制性病毒。干扰素(IFN)是一类具有免疫调节功能和抗病毒作用的细胞因子。IFN-α除更直接的抗病毒作用外,还可以调节宿主的先天性和适应性免疫。论文构建表达IFN-α的重组PRRSV,分析重组病毒的生物学特性以及IFN-α的生物学活性。通过反向遗传操作方法将IFN-α插入到PRRSV ORF1b和ORF2a之间,重组质粒转染细胞后可以拯救出重组病毒(rGXAM-P-IFN-α)。插入到PRRSV基因组中的IFN-α可遗传稳定9代。重组病毒生长特性分析可发现rGXAM-P-IFN-α复制能力显著低于亲本病毒。rGXAM-P-IFN-α感染猪肺泡巨噬细胞(PAM)可显著上调抗病毒基因(PKR,ISG15和ISG54)mRNA表达水平,为进一步研发新型PRRSV疫苗提供参考。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
感染性克隆
Α干扰素
抗病毒基因
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职称材料
题名
A型塞内卡病毒VP2蛋白多克隆抗体制备与竞争ELISA方法的建立
1
作者
何启杰
农作荣
王豪
牛晨霞
莫勇芳
欧阳康
陈樱
黄伟坚
黄稳妃
韦祖樟
机构
广西
大学
动物
科学技术
学院
广西
壮族自治区兽用生物制品工程研究中心
广西
畜禽繁育与疾病防控重点实验室
广西
高校
动物
疫病预防与控制重点实验室
广西农业职业技术大学动物科学技术系
出处
《动物医学进展》
北大核心
2025年第2期23-29,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31972666)
来宾市科学研究与技术开发计划项目(来科攻220823,来科产220826)。
文摘
依据A型塞内卡病毒(SVA)结构蛋白VP2基因序列构建原核表达质粒pET-30a-VP2,经转化和诱导,表达出VP2重组蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,采集血清获得VP2的多克隆抗体。用间接ELISA方法测定血清中VP2抗体效价,并用Western blot与IFA验证其特异性。随后建立竞争ELISA方法,并对实验室收集的2016-2019年广西11个地区64个规模猪场592份猪血清进行SVA抗体检测。结果显示,诱导表达出的重组VP2蛋白主要以可溶性形式表达,血清中VP2抗体效价大于1∶64000,且制备的VP2抗体能特异结合SVA感染细胞中的VP2蛋白。竞争ELISA检测结果显示广西地区猪场SVA血清阳性率高达76.6%,血清样品阳性率高达55.9%,研究结果为SVA的检测和研究奠定了基础。
关键词
A型塞内卡
VP2蛋白
原核表达
多克隆抗体
竞争ELISA
Keywords
Senecavirus A
VP2 protein
Prokaryotic expression
Polyclonal antibody
competitive ELISA
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
表达IFN-α的重组猪繁殖与呼吸综合病毒的构建及生物学特性分析
2
作者
黄静
王玉旭
王豪
陈樱
欧阳康
黄伟坚
黄稳妃
韦祖樟
机构
广西
大学
动物
科学技术
学院
动物
传染病与分子免疫学实验室
广西
壮族自治区兽用生物制品工程研究中心
广西
畜禽繁育与疾病防控重点实验室
广西
高校
动物
疫病预防与控制重点实验室
广西农业职业技术大学动物科学技术系
出处
《动物医学进展》
北大核心
2024年第3期48-53,共6页
基金
国家自然科学基金项目(32172889)
广西自然科学基金项目(2018GXNSFDA281021)
来宾市科学研究与技术开发计划(来科攻220823,来科产220826)。
文摘
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是危害我国生猪业的重要疫病之一,其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),是一种免疫抑制性病毒。干扰素(IFN)是一类具有免疫调节功能和抗病毒作用的细胞因子。IFN-α除更直接的抗病毒作用外,还可以调节宿主的先天性和适应性免疫。论文构建表达IFN-α的重组PRRSV,分析重组病毒的生物学特性以及IFN-α的生物学活性。通过反向遗传操作方法将IFN-α插入到PRRSV ORF1b和ORF2a之间,重组质粒转染细胞后可以拯救出重组病毒(rGXAM-P-IFN-α)。插入到PRRSV基因组中的IFN-α可遗传稳定9代。重组病毒生长特性分析可发现rGXAM-P-IFN-α复制能力显著低于亲本病毒。rGXAM-P-IFN-α感染猪肺泡巨噬细胞(PAM)可显著上调抗病毒基因(PKR,ISG15和ISG54)mRNA表达水平,为进一步研发新型PRRSV疫苗提供参考。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
感染性克隆
Α干扰素
抗病毒基因
Keywords
Porcine reproductive and respiratory syndrome virus
infectious clone
IFN-α
antiviral gene
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
A型塞内卡病毒VP2蛋白多克隆抗体制备与竞争ELISA方法的建立
何启杰
农作荣
王豪
牛晨霞
莫勇芳
欧阳康
陈樱
黄伟坚
黄稳妃
韦祖樟
《动物医学进展》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
表达IFN-α的重组猪繁殖与呼吸综合病毒的构建及生物学特性分析
黄静
王玉旭
王豪
陈樱
欧阳康
黄伟坚
黄稳妃
韦祖樟
《动物医学进展》
北大核心
2024
0
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职称材料
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