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火麻仁α-葡萄糖苷酶抑制肽的快速筛选、鉴定及抑制机理研究
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作者 李焯颖 刘精杏 +3 位作者 廖丹葵 李卫国 兰雄雕 刘彭如 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第22期264-271,共8页
利用菠萝蛋白酶对火麻仁蛋白进行酶解,以α-葡萄糖苷酶抑制率为考察指标,通过单因素以及正交试验对酶解条件进行优化,得到最佳的酶解条件:酶解pH值为8.0,酶解温度为45℃,菠萝蛋白酶与蛋白质的比例为6000 U/g,酶解时间为0.5 h。在该条件... 利用菠萝蛋白酶对火麻仁蛋白进行酶解,以α-葡萄糖苷酶抑制率为考察指标,通过单因素以及正交试验对酶解条件进行优化,得到最佳的酶解条件:酶解pH值为8.0,酶解温度为45℃,菠萝蛋白酶与蛋白质的比例为6000 U/g,酶解时间为0.5 h。在该条件下,制备得到的酶解液对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为(2.65±0.063)mg/mL。对酶解液进行超滤,收集<100 kDa的馏分,并使用生物复合材料3-MPBA/AG@aZIF-7/PDA对其进行亲和纯化,然后用LC-MC/MC质谱和计算机虚拟筛选,获得了5个具有潜在降血糖活性的新型多肽KFL、KFY、SLFK、SWG和YFK。体外实验和分子对接研究表明,KFY的活性最好[IC_(50)为(3.10±0.22)mmol/L],5个多肽均能与α-葡萄糖苷酶上的氨基酸残基形成氢键和疏水作用,从而结合到α-葡萄糖苷酶上,形成稳定的复合物。该研究为火麻仁蛋白的高值化利用提供理论依据和数据支撑,同时也为天然降血糖药物的筛选提供参考。 展开更多
关键词 火麻仁 α-葡萄糖苷酶抑制肽 计算机筛选 分子对接
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