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鸡新城疫病毒和禽肺炎病毒二重RT-PCR检测方法的建立及应用
被引量：
2
1
作者
谢志勤
谢芝勋
+11 位作者
邓显文
谢丽基
范晴
罗思思
黄莉
黄娇玲
张艳芳
王盛
刘加波
庞耀珊
梁亮
冯务玲
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期546-551,共6页
【目的】建立一次性可同时扩增鉴别鸡新城疫病毒(NDV)和禽肺炎病毒(APV)的二重RT-PCR,为有效防控鸡新城疫和禽肺炎病毒病提供技术支持。【方法】根据Gen Bank已发表NDV的F基因序列(Gen Bank登录号JX840454)和APV的F基因序列(Gene Bank...
【目的】建立一次性可同时扩增鉴别鸡新城疫病毒(NDV)和禽肺炎病毒(APV)的二重RT-PCR,为有效防控鸡新城疫和禽肺炎病毒病提供技术支持。【方法】根据Gen Bank已发表NDV的F基因序列(Gen Bank登录号JX840454)和APV的F基因序列(Gene Bank登录号AF187154)分别设计2对特异性引物,应用这2对引物建立可同时检测鉴别NDV和APV的二重RT-PCR,对扩增条件进行优化,并通过特异性试验、敏感性试验和临床样品检测等验证其实用性。【结果】优化后的二重RT-PCR可特异性扩增出参试NDV毒株(La Sota株、F48E9株、I株)及APV/MN-10毒株的目的条带,其大小分别为247和424 bp,而其他对照参试毒株在247和424 bp处均无特异条带出现。二重RT-PCR针对NDV和APV的最低检出限均为10 pg的RNA。应用建立的二重RT-PCR对132份从广西采集的病鸡样品进行检测,结果得到NDV阳性样品26份、APV阳性样品2份,与血清学方法的鉴定结果一致。随机选取的2份NDV阳性PCR产物与NDV(Gen Bank登录号JX840454)的F基因序列一致,同源性达100%;2份APV阳性PCR产物与APV(Gen Bank登录号AF187154)的F基因序列也完全一致,同源性达100%。【结论】针对NDV和APV建立的二重RT-PCR具有特异性好、灵敏度高、简便快速的特点,可用于临床快速鉴别诊断,为有效防控鸡新城疫和禽肺炎病毒病提供了技术支持。
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关键词
鸡新城疫病毒(NDV)
禽肺炎病毒(APV)
二重RT-PCR
检测
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职称材料
题名
鸡新城疫病毒和禽肺炎病毒二重RT-PCR检测方法的建立及应用
被引量：
2
1
作者
谢志勤
谢芝勋
邓显文
谢丽基
范晴
罗思思
黄莉
黄娇玲
张艳芳
王盛
刘加波
庞耀珊
梁亮
冯务玲
机构
广西兽医研究所/广西动物疫病病原生物学与诊断重点实验室
南宁市良风农牧有限责任公司
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期546-551,共6页
基金
国家“万人计划”领军人才专项项目(2016-37)
广西科技重点研发计划项目(桂科AB16380054)
南宁市科学研究与技术开发计划项目(20152308)
文摘
【目的】建立一次性可同时扩增鉴别鸡新城疫病毒(NDV)和禽肺炎病毒(APV)的二重RT-PCR,为有效防控鸡新城疫和禽肺炎病毒病提供技术支持。【方法】根据Gen Bank已发表NDV的F基因序列(Gen Bank登录号JX840454)和APV的F基因序列(Gene Bank登录号AF187154)分别设计2对特异性引物,应用这2对引物建立可同时检测鉴别NDV和APV的二重RT-PCR,对扩增条件进行优化,并通过特异性试验、敏感性试验和临床样品检测等验证其实用性。【结果】优化后的二重RT-PCR可特异性扩增出参试NDV毒株(La Sota株、F48E9株、I株)及APV/MN-10毒株的目的条带,其大小分别为247和424 bp,而其他对照参试毒株在247和424 bp处均无特异条带出现。二重RT-PCR针对NDV和APV的最低检出限均为10 pg的RNA。应用建立的二重RT-PCR对132份从广西采集的病鸡样品进行检测,结果得到NDV阳性样品26份、APV阳性样品2份,与血清学方法的鉴定结果一致。随机选取的2份NDV阳性PCR产物与NDV(Gen Bank登录号JX840454)的F基因序列一致,同源性达100%;2份APV阳性PCR产物与APV(Gen Bank登录号AF187154)的F基因序列也完全一致,同源性达100%。【结论】针对NDV和APV建立的二重RT-PCR具有特异性好、灵敏度高、简便快速的特点,可用于临床快速鉴别诊断,为有效防控鸡新城疫和禽肺炎病毒病提供了技术支持。
关键词
鸡新城疫病毒(NDV)
禽肺炎病毒(APV)
二重RT-PCR
检测
Keywords
Newcastle disease virus（NDV）
avian pneumovirus（APV）
duplex RT-PCR
detection
分类号
S858.31 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡新城疫病毒和禽肺炎病毒二重RT-PCR检测方法的建立及应用
谢志勤
谢芝勋
邓显文
谢丽基
范晴
罗思思
黄莉
黄娇玲
张艳芳
王盛
刘加波
庞耀珊
梁亮
冯务玲
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
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