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庆大霉素不同部位聚积引起的耳蜗外植体毛细胞梯度缺失模式
1
作者 潘旭 宣伟军 丁大连 《听力学及言语疾病杂志》 北大核心 2025年第4期381-385,共5页
目的探讨庆大霉素诱导体外培养耳蜗外植体毛细胞的缺失模式。方法用含0、0.1、0.5、1.0、1.5、3.0 mM庆大霉素的培养液体外培养耳蜗外植体(各组10个耳蜗)24 h后,应用FITC标记鬼笔环肽染色特异性显示耳蜗毛细胞的静纤毛,在荧光显微镜下... 目的探讨庆大霉素诱导体外培养耳蜗外植体毛细胞的缺失模式。方法用含0、0.1、0.5、1.0、1.5、3.0 mM庆大霉素的培养液体外培养耳蜗外植体(各组10个耳蜗)24 h后,应用FITC标记鬼笔环肽染色特异性显示耳蜗毛细胞的静纤毛,在荧光显微镜下观察耳蜗基底膜的毛细胞形态和数量。Rhodamine标记的0.5 mM庆大霉素的培养液培养耳蜗外植体12、24、36 h(各组10个耳蜗)后,在荧光显微镜下观察耳蜗不同位置庆大霉素的含量。结果不同浓度庆大霉素培养耳蜗基底膜24 h后,0.1 mM庆大霉素对耳蜗毛细胞损伤甚微,0.5、1.0、1.5、3.0 mM庆大霉素均可造成耳蜗毛细胞损害,以底回毛细胞最严重,随着庆大霉素浓度升高,逐渐向顶回毛细胞发展。用0.5 mM庆大霉素培养后,庆大霉素最先积聚在底回外毛细胞,随培养时间增加逐渐向底回内毛细胞、顶回内外毛细胞蔓延,毛细胞损害程度也逐渐加重;且耳蜗外植体毛细胞的破坏部位和程度与荧光标记的庆大霉素在毛细胞中积聚的部位和程度相一致。结论庆大霉素在不同部位内外毛细胞的积聚不同导致了耳蜗外植体毛细胞的梯度损伤模式,这可能与不同位置毛细胞的摄药能力差别有关。 展开更多
关键词 庆大霉素 耳蜗 毛细胞 体外培养
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复方健耳剂对C57BL/6J小鼠AHL毛细胞的保护作用 被引量：7
2
作者 宣伟军 丁大连 +4 位作者 蒋海燕 杨琨 韦瑀龙 陈壮 唐俊波 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第2期272-277,共6页
目的探讨老年性耳蜗毛细胞损害与中药复方健耳剂两种喂药方法干预的作用。方法选择1月龄C57BL/6J小鼠22只用于本实验,其中4只小鼠每日饮用自来水直到出生后3个月作为幼龄对照组;6只小鼠每日饮用自来水直到出生后7个月作为老年性聋对照... 目的探讨老年性耳蜗毛细胞损害与中药复方健耳剂两种喂药方法干预的作用。方法选择1月龄C57BL/6J小鼠22只用于本实验,其中4只小鼠每日饮用自来水直到出生后3个月作为幼龄对照组;6只小鼠每日饮用自来水直到出生后7个月作为老年性聋对照组;6只小鼠每日自动饮用中药复方健耳剂直到出生后7个月;另6只小鼠每日自动饮用同样中药至4个月后改用每日人工灌服直到出生后7个月。各组动物实验到期终止后,取耳蜗进行全耳蜗基底膜铺片,将全耳蜗内、外毛细胞计数结果输入计算机并应用耳蜗图软件进行耳蜗毛细胞密度对比分析,其中选择基底膜上重要的病变区间的毛细胞密度进行统计学分析。结果 3月龄对照组小鼠耳蜗外、内毛细胞缺损仅仅出现在耳蜗底回钩端区域;7月龄对照组外、内毛细胞缺损从底回基底膜起始端扩展到距离耳蜗顶端约40%区域;7月龄中药灌服组和自动饮用组动物的内、外毛细胞缺损范围和程度相似,均显著比7月龄对照组为轻(P<0.001)。结论中药复方健耳剂能够有效延缓C57BL/6J小鼠老年性耳蜗毛细胞损害的发生和发展,两种喂药方式所起作用相同(P>0.05),其药理机制可能与其改善微循环,清除活性氧,保护线粒体等作用相关。 展开更多
关键词 C57BL/6J小鼠 老年性聋 毛细胞 中药
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聪耳通窍剂干预豚鼠庆大霉素耳毒性聋作用的机制探讨 被引量：4
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作者 李羴 唐俊波 +4 位作者 韦瑀龙 陈壮 宣毅 陈思仲 宣伟军 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期894-902,共9页
目的探讨基于中医脾肾理论的中药聪耳通窍剂干预庆大霉素(gentamycin,GM)耳毒性聋作用与可能机制。方法选择杂色成年豚鼠60只,随机分为正常对照组,GM对照组,中药+GM组,每组各20只。正常对照组按常规饲养至第11天期满;GM对照组按200mg/kg... 目的探讨基于中医脾肾理论的中药聪耳通窍剂干预庆大霉素(gentamycin,GM)耳毒性聋作用与可能机制。方法选择杂色成年豚鼠60只,随机分为正常对照组,GM对照组,中药+GM组,每组各20只。正常对照组按常规饲养至第11天期满;GM对照组按200mg/kg·d剂量,每天分两次连续注射9天,第11天终止饲养;中药+GM组按3.994g/kg·d剂量(1/2人工灌服,1/2自动饮用),预先服用聪耳通窍剂10天,然后在继续服用中药同时开始注射每天同等剂量GM,连续9天,第11天终止饲养。其中每组6只动物于第5、6、9天检测ABR评估听力;6只动物利用RT-PCR检测耳蜗SOD1;剩余8只动物用于全耳蜗基底膜铺片,琥珀酸脱氢酶染色,进行耳蜗毛细胞形态学研究,以及检测血清BUN和Cr,肾脏切片经苏木素-伊红染色,了解肾功能和肾组织病理变化,其中每组6只动物一侧肾脏应用western blot检测ASK-1、Trx、caspase-3。结果正常对照组ABR阈值一直保持相对恒定正常范围。与正常对照组比较,GM对照组ABR阈值第5天即出现明显差异(P<0.05),与中药+GM组比较,第7天开始出现明显差异(P<0.05),随着天数增加,差异继续扩大(P<0.01)。中药+GM组ABR阈值递增差异不显著(P>0.05)。全耳蜗基底膜检查显示,正常对照组各回三排内、外毛细胞形态正常,数量完整,排列有序;GM对照组各回三排外毛细胞损毁严重,绝大部分细胞出现严重崩解不全,或凋亡缩小,但内毛细胞仍基本存在;中药+GM组各回三排外毛细胞除少量和散在崩解不全外,大多仍存留可辨,形态如常,内毛细胞仍保持完整,各回外毛细胞损毁状况明显少于GM对照组(P<0.01)。中药+GM组对耳蜗SOD1表达明显高于正常对照组和GM对照组(P<0.01,P<0.05),而血清BUN和Cr含量则明显低于GM对照组(P<0.01)。肾脏切片染色显示,与正常对照组比较,GM对照组肾小球和近曲肾小管等受损严重,病理改变明显,而中药+GM组则受损不明显,甚至基本保持正常。中药+GM组对肾组织ASK-1、caspase-3表达明显低于GM对照组(P<0.05),对Trx表达则明显高于GM对照组(P<0.05)。结论一定剂量GM连续使用可造成严重耳、肾毒性损害,耳蜗损害以外毛细胞为主要损害靶细胞,肾脏损害以肾小球和近曲小管为主。聪耳通窍剂具有显著防护GM耳、肾毒性损害作用,其作用机制与其抑制氧化应激反应,干预ROS介导的细胞死亡径路有关,而通过护肾,促进GM排泄,是其间接护耳的重要机制;中医脾肾理论防治耳聋具有科学基础和应用价值。 展开更多
关键词 豚鼠 庆大霉素 耳毒性 肾毒性 中药 氧化应激反应
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