目的:探讨转化生长因子-β_1诱导的大鼠心肌细胞肥大中ERK信号通路的蛋白表达。方法:建立TGF-β_1诱导的体外大鼠心肌细胞肥大模型。PI染色标记细胞双链RNA法检测心肌细胞RNA表达量,间接检测心肌细胞肥大。实时荧光定量PCR(Real time P...目的:探讨转化生长因子-β_1诱导的大鼠心肌细胞肥大中ERK信号通路的蛋白表达。方法:建立TGF-β_1诱导的体外大鼠心肌细胞肥大模型。PI染色标记细胞双链RNA法检测心肌细胞RNA表达量,间接检测心肌细胞肥大。实时荧光定量PCR(Real time PCR)检测心肌细胞肥大相关基因肌球蛋白重链β亚型(β-MHC)的表达。Western-blot检测心肌细胞中ERK1/2蛋白表达。结果:TGF-β_1可诱导体外培养心肌细胞肥大基因的表达,β-MHC的表达明显高于对照组(P<0.01)。TGF-β_1组PI含量明显增高(P<0.01),与对照组相比,TGF-β_1可明显上调ERK通路中磷酸化ERK1/2蛋白表达增加。RNA干扰技术抑制TGF-β_1的特异性通路Smad通路中Smad2蛋白表达后,磷酸化ERK1/2表达也被部分抑制(P<0.01)。结论:TGF-β_1可诱导心肌细胞肥大的形成,同时ERK通路中ERK1/2表达增加,TGF/Smad通路与ERK通路中ERK1/2可能存在交互作用。展开更多
文摘目的:探讨转化生长因子-β_1诱导的大鼠心肌细胞肥大中ERK信号通路的蛋白表达。方法:建立TGF-β_1诱导的体外大鼠心肌细胞肥大模型。PI染色标记细胞双链RNA法检测心肌细胞RNA表达量,间接检测心肌细胞肥大。实时荧光定量PCR(Real time PCR)检测心肌细胞肥大相关基因肌球蛋白重链β亚型(β-MHC)的表达。Western-blot检测心肌细胞中ERK1/2蛋白表达。结果:TGF-β_1可诱导体外培养心肌细胞肥大基因的表达,β-MHC的表达明显高于对照组(P<0.01)。TGF-β_1组PI含量明显增高(P<0.01),与对照组相比,TGF-β_1可明显上调ERK通路中磷酸化ERK1/2蛋白表达增加。RNA干扰技术抑制TGF-β_1的特异性通路Smad通路中Smad2蛋白表达后,磷酸化ERK1/2表达也被部分抑制(P<0.01)。结论:TGF-β_1可诱导心肌细胞肥大的形成,同时ERK通路中ERK1/2表达增加,TGF/Smad通路与ERK通路中ERK1/2可能存在交互作用。
