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基于环介导等温扩增微流控芯片技术检测4种鱼类病毒方法的建立: 1; 作者任向阳丁宁 +7 位作者苗子毅黄献培潘一峰柏建山黎浩权袁建文陈进会张险朋《广东海洋大学学报》北大核心 2025年第5期106-112,共7页; 【目的】建立适合鲤春病毒血症病毒(SVCV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、神经坏死病毒(NNV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV)联合检测的环介导等温扩增(LAMP)微流控芯片检测体系,为4种鱼类病毒等温快速联检提供技术支撑。【方法】根据病毒SVCV、... 展开更多; 关键词环介导等温扩增微流控芯片技术鲤春病毒血症病毒锦鲤疱疹病毒神经坏死病毒病毒性出血性败血症病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

南美白对虾急性肝胰腺坏死病荧光RAA检测方法的建立和应用: 2; 作者邓艳何淑华 +4 位作者黄燕琼卢嘉贤戴金韦浩延柏建山《中国动物传染病学报》北大核心 2025年第4期111-117,共7页; 为建立南美白对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)的重组酶介导等温扩增(RAA)检测方法,本研究以急性肝胰腺坏死病原菌相关的毒力基因pirA和pirB为检测靶标,设计引物和探针,通过反应条件的优化,建立了恒温荧光RAA检测方法。结果显示:建立的RAA... 展开更多; 关键词南美白对虾急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌重组酶介导等温扩增; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛙病毒3型类和桑蒂库帕蛙病毒类双重荧光定量PCR检测方法的建立与应用: 3; 作者邓艳柏建山 +5 位作者徐浩季新成黄燕琼何淑华曾伟伟蒋茗《中国预防兽医学报》北大核心 2025年第1期48-53,79,共7页; 为建立一种可快速鉴别检测蛙病毒3型(FV3)类和桑蒂库帕蛙病毒(SCRV)类的双重荧光定量PCR(qPCR)方法,本研究根据FV3类和SCRV类的主要衣壳蛋白(MCP)基因序列,设计一对特异性引物和两种不同荧光标记的探针,采用特异性引物扩增虎纹蛙病毒(T... 展开更多; 关键词蛙病毒双重荧光定量PCR TAQMAN探针; 在线阅读下载PDF 职称材料

十二齿小蠹形态特征及DNA条形码技术快速鉴定研究: 4; 作者胡淑青李献锋 +1 位作者魏霜丁钿《安徽农业科学》 CAS 2022年第10期119-122,共4页; 介绍了我国口岸进口木材中多次截获的松十二齿小蠹,对该虫的分类地位、分布、寄主、危害及成虫形态特征进行了描述。将获得的该虫COⅠ序列通过GenBank数据库比对分析,以及用邻接法(NJ)构建的系统发育树,建立了该虫的DNA条形码检测方法,... 展开更多; 关键词十二齿小蠹分布形态特征 DNA条形码; 在线阅读下载PDF 职称材料

进境粮谷中截获检疫性豆象疫情来源分析: 5; 作者徐强吴晓薇 +3 位作者陈芳颜素娟李新浩马骏《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期1035-1042,共8页; 我国是粮食进口大国,口岸截获的检疫性豆象疫情频发,对粮谷安全构成严重威胁。2015-2018年,国内口岸截获至少19种豆象类害虫,其中绿豆象截获批次最高。这些豆象主要随进口豆类等粮谷传播,来源复杂,数量大。截获数据显示,缅甸、越南和泰... 展开更多; 关键词口岸豆象生物入侵植物检疫风险分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

番茄褐色皱果病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：1: 6; 作者李献锋于璇 +7 位作者冯黎霞于翠丁钿徐强赵菊鹏马骏武目涛魏霜《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期185-193,共9页; 为建立番茄褐色皱果病毒(tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)Taq Man荧光定量RT-PCR方法,本研究针对ToBRFV RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRP)基因序列设计了4组特异性引物和Taq Man探针,构建了标准曲线,并... 展开更多; 关键词番茄褐色皱果病毒 RNA依赖的RNA聚合酶 Taq Man探针荧光定量RT-PCR 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于环介导等温扩增微流控芯片技术检测4种鱼类病毒方法的建立: 1; 作者任向阳丁宁苗子毅黄献培潘一峰柏建山黎浩权袁建文陈进会张险朋; 机构广东省口岸安全智能化检测重点实验室/黄埔海关黄埔海关技术中心广州海关技术中心汕尾市海洋产业研究院广州白云机场海关综合技术服务中心东莞市人兽共患病重点实验室/东莞市动物疫病预防控制中心; 出处《广东海洋大学学报》北大核心 2025年第5期106-112,共7页; 基金广东省口岸安全智能化检测重点实验室资助项目(2023B1212010011) 汕尾市2023年度省级科技专项资金(“大专项+任务清单”)项目(2023A014) +1 种基金东莞市2021年省乡村振兴战略专项资金(“大专项+任务清单”)项目(20211800400112)。; 文摘【目的】建立适合鲤春病毒血症病毒(SVCV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、神经坏死病毒(NNV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV)联合检测的环介导等温扩增(LAMP)微流控芯片检测体系,为4种鱼类病毒等温快速联检提供技术支撑。【方法】根据病毒SVCV、KHV、NNV和VHSV各自保守基因设计LAMP引物,预包埋LAMP引物至微流控芯片,注入等温扩增反应试剂,通过电浸润法将反应试剂驱动至各反应位点,复溶预包埋的LAMP引物,在各反应位点进行等温扩增反应。分析该检测体系的特异性、灵敏性和重复性验证,并应用于实际样品检测。【结果】本研究建立的LAMP微流控芯片检测体系对SVCV、KHV、NNV和VHSV阳性样品均出现特异性扩增反应,且不同病毒间未出现交叉反应;对鱼类易感的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)、大口黑鲈虹彩病毒、传染性脾肾坏死病毒、草鱼呼肠孤病毒、本尼登虫(Benedenia girellae)和刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)等8种常见病原体阳性样品均无特异性扩增反应。灵敏度实验结果表明,对SVCV、VHSV的检测限均为10 fg/μL,对KHV、NNV的检测限均为1 fg/μL。重复性实验结果表明,4种病毒的变异系数均<5%。该检测体系与实时荧光PCR方法相比,对20份实际样品的检测结果均保持一致。【结论】本研究建立的LAMP微流控芯片检测体系于63℃等温扩增30 min即可完成对SVCV、KHV、NNV和VHSV的同时检测,且特异性好、灵敏度高、重复性好,可为鱼类SVCV、KHV、NNV和VHSV等温快速联检提供技术支撑。; 关键词环介导等温扩增微流控芯片技术鲤春病毒血症病毒锦鲤疱疹病毒神经坏死病毒病毒性出血性败血症病毒; Keywords loop-mediated isothermal amplification microfluidic chip technology spring viraemia of carp virus koi herpesvirus nervous necrosis virus viral haemorrhagic septicaemia virus; 分类号 S917.1 [农业科学—水产科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名南美白对虾急性肝胰腺坏死病荧光RAA检测方法的建立和应用: 2; 作者邓艳何淑华黄燕琼卢嘉贤戴金韦浩延柏建山; 机构广州白云机场海关综合技术服务中心广州市花都区动物卫生监督中心; 出处《中国动物传染病学报》北大核心 2025年第4期111-117,共7页; 基金广东省重点领域研发计划项目(2022B1111030001)。; 文摘为建立南美白对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)的重组酶介导等温扩增(RAA)检测方法,本研究以急性肝胰腺坏死病原菌相关的毒力基因pirA和pirB为检测靶标,设计引物和探针,通过反应条件的优化,建立了恒温荧光RAA检测方法。结果显示:建立的RAA方法仅能扩增出AHPND,与副溶血弧菌、十足目虹彩病毒1(DIV1)等9种水产常见的弧菌和病毒无交叉反应;检测的最低限度可达10 copies/μL,组内变异系数和组间变异系数均小于10%;用该方法对301份样品进行检测,检出27份阳性样品,与荧光定量PCR方法相比总符合率99.3%,与巢氏PCR方法相比总符合率97%。本研究建立了快速、特异、灵敏的RAA检测方法,可以用于AHPND的早期监测和现场快速检测。; 关键词南美白对虾急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌重组酶介导等温扩增; Keywords Penaeusvannamei hepatopancreatic necrosis disease Vibrio parahaemolyticus recombinase-aided amplification(RAA); 分类号 S945.49 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛙病毒3型类和桑蒂库帕蛙病毒类双重荧光定量PCR检测方法的建立与应用: 3; 作者邓艳柏建山徐浩季新成黄燕琼何淑华曾伟伟蒋茗; 机构广州白云机场海关综合技术服务中心深圳海关动植物检验检疫技术中心海关总署国际检验检疫标准与技术法规研究中心佛山科学技术学院生命科学与工程学院; 出处《中国预防兽医学报》北大核心 2025年第1期48-53,79,共7页; 基金广州市科技项目(2023B04J0172) 海关总署科研项目(2022HK006)。; 文摘为建立一种可快速鉴别检测蛙病毒3型(FV3)类和桑蒂库帕蛙病毒(SCRV)类的双重荧光定量PCR(qPCR)方法,本研究根据FV3类和SCRV类的主要衣壳蛋白(MCP)基因序列,设计一对特异性引物和两种不同荧光标记的探针,采用特异性引物扩增虎纹蛙病毒(TFV)和大口黑鲈虹彩病毒(LMBV)的目的基因,构建重组质粒标准品pMD19-T-TFV和pMD19-T-LMBV。采用矩阵法优化各反应条件后,初步建立了检测这两类蛙病毒的双重qPCR方法。标准曲线结果显示两个重组质粒标准品混合物与各自的Ct值均呈良好的线性关系。采用本研究建立的方法分别检测TFV、LMBV、伯勒虹彩病毒(BCV)、蛙病毒3型、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、锦鲤疱疹病毒、罗非鱼湖病毒、病毒性神经坏死病毒、斑点叉尾鮰病毒、鲤浮肿病毒、传染性造血器官坏死病毒、传染性脾肾坏死病毒、呼肠孤病毒Ⅱ型、疱疹病毒Ⅱ型,评估该方法的特异;以100~108稀释的重组质粒标准混合物为模板采用建立的双重qPCR方法检测,评估该方法的敏感性;以10^(2)~10^(8)稀释的重组质粒标准混合物为模板采用该双重qPCR方法分别进行组内和组间的重复性试验。结果显示,该方法仅能扩增出FV3类的TFV、BIV、FV3及EHNV和SCRV类的LMBV,其他病毒均无扩增曲线;对pMD19-T-TFV和pMD19-T-LMBV的检测限分别为1拷贝/µL和10拷贝/µL;组内变异系数和组间变异系数均小于2%。利用建立的双重qPCR方法和WOAH推荐的常规PCR方法分别对298份临床样品分别进行检测,结果显示,双重qPCR方法检出21份SCRV类,2份FV3类,普通PCR方法检出15份SCRV类,2份FV3类,双重PCR方法与常规PCR方法对FV3类和SCRV类的检测结果的阳性符合率均达100%。本研究建立的双重qPCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,对于多种蛙病毒属成员的鉴别检测和早期预警具有重要意义。; 关键词蛙病毒双重荧光定量PCR TAQMAN探针; Keywords Ranavirus duplex real-time PCR TaqMan probe; 分类号 S947.2 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名十二齿小蠹形态特征及DNA条形码技术快速鉴定研究: 4; 作者胡淑青李献锋魏霜丁钿; 机构广州海关技术中心广州白云机场海关综合技术服务中心; 出处《安徽农业科学》 CAS 2022年第10期119-122,共4页; 文摘介绍了我国口岸进口木材中多次截获的松十二齿小蠹,对该虫的分类地位、分布、寄主、危害及成虫形态特征进行了描述。将获得的该虫COⅠ序列通过GenBank数据库比对分析,以及用邻接法(NJ)构建的系统发育树,建立了该虫的DNA条形码检测方法,以期为口岸一线的检测鉴定提供参考。; 关键词十二齿小蠹分布形态特征 DNA条形码; Keywords Ips sexdentatus Distribution Morphological characteristics DNA barcode; 分类号 S41-30 [农业科学—植物保护]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名进境粮谷中截获检疫性豆象疫情来源分析: 5; 作者徐强吴晓薇陈芳颜素娟李新浩马骏; 机构广州海关技术中心从化海关综合技术服务中心广州白云机场海关综合技术服务中心; 出处《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期1035-1042,共8页; 基金国家重点研发计划项目(2021YFD1400100)。; 文摘我国是粮食进口大国,口岸截获的检疫性豆象疫情频发,对粮谷安全构成严重威胁。2015-2018年,国内口岸截获至少19种豆象类害虫,其中绿豆象截获批次最高。这些豆象主要随进口豆类等粮谷传播,来源复杂,数量大。截获数据显示,缅甸、越南和泰国是截获豆象来源最多的国家,昆明、深圳和南京海关是主要截获口岸。豆象种类多,寄生多种豆类,不同豆象对不同寄主的危害特点也有差异。为有效防控豆象传入和扩散,加强口岸检疫和监测至关重要。; 关键词口岸豆象生物入侵植物检疫风险分析; Keywords Ports bean weevil biological invasion plant quarantine risk analysis; 分类号 Q968.1 [生物学—昆虫学] S433 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名番茄褐色皱果病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：1: 6; 作者李献锋于璇冯黎霞于翠丁钿徐强赵菊鹏马骏武目涛魏霜; 机构广州海关技术中心上海海关动植物与食品检验检疫技术中心广州白云机场海关综合技术服务中心; 出处《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期185-193,共9页; 基金国家重点研发计划(2021YFD1400100) 海关总署科研项目(2021HK165,2021HK166)。; 文摘为建立番茄褐色皱果病毒(tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)Taq Man荧光定量RT-PCR方法,本研究针对ToBRFV RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRP)基因序列设计了4组特异性引物和Taq Man探针,构建了标准曲线,并对该方法的特异性、灵敏度和实际样品的检测效率进行评估。结果显示,该方法特异性强,与番茄花叶病毒、番茄斑驳花叶病毒、烟草花叶病毒、黄瓜绿斑驳花叶病毒、番茄环斑病毒、番茄黑环病毒、辣椒轻斑驳病毒、烟草环斑病毒和凤果花叶病毒等9种病毒均无交叉反应。建立的标准曲线的R^(2)为0.999,扩增效率为102.096%,检测灵敏度为10 fg/μL,与EPPO PM 7/146(1)推荐的CaTa28、CSP1325方法相当,是常规RT-PCR的100倍;采用该方法成功从60份番茄和辣椒叶片、种子样品中检出10份阳性样品。建立的Taq Man荧光定量RT-PCR方法特异性强、灵敏度高,适用于实际样品中ToBRFV的快速精准检测。; 关键词番茄褐色皱果病毒 RNA依赖的RNA聚合酶 Taq Man探针荧光定量RT-PCR 检测; Keywords tomato brown rugose fruit virus(ToBRFV) RdRP Taq Man probe real-time RT-PCR detection; 分类号 S436.412.11 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基于环介导等温扩增微流控芯片技术检测4种鱼类病毒方法的建立	任向阳丁宁苗子毅黄献培潘一峰柏建山黎浩权袁建文陈进会张险朋	《广东海洋大学学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	南美白对虾急性肝胰腺坏死病荧光RAA检测方法的建立和应用	邓艳何淑华黄燕琼卢嘉贤戴金韦浩延柏建山	《中国动物传染病学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	蛙病毒3型类和桑蒂库帕蛙病毒类双重荧光定量PCR检测方法的建立与应用	邓艳柏建山徐浩季新成黄燕琼何淑华曾伟伟蒋茗	《中国预防兽医学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	十二齿小蠹形态特征及DNA条形码技术快速鉴定研究	胡淑青李献锋魏霜丁钿	《安徽农业科学》 CAS	2022	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	进境粮谷中截获检疫性豆象疫情来源分析	徐强吴晓薇陈芳颜素娟李新浩马骏	《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	番茄褐色皱果病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用	李献锋于璇冯黎霞于翠丁钿徐强赵菊鹏马骏武目涛魏霜	《植物保护》 CAS CSCD 北大核心	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料