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广州白云机场口岸入境海鱼感染异尖线虫鉴定研究 被引量:5
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作者 黄燕琼 张森 +4 位作者 何淑华 姚静雯 戴金 邓艳 柏建山 《广东农业科学》 CAS 2017年第4期146-151,F0003,共7页
对2012—2015年从白云机场口岸入境的214批海鱼进行剖检鉴定异尖线虫,取内脏和鱼肉进行酶消化,在10批次海鱼中分离出虫体,用苯酚乳酸透明液进行透明处理及形态学鉴定,确定所分离出的虫体有异尖线虫三期幼虫Ⅰ型和Ⅱ型。用线虫rDNA ITS... 对2012—2015年从白云机场口岸入境的214批海鱼进行剖检鉴定异尖线虫,取内脏和鱼肉进行酶消化,在10批次海鱼中分离出虫体,用苯酚乳酸透明液进行透明处理及形态学鉴定,确定所分离出的虫体有异尖线虫三期幼虫Ⅰ型和Ⅱ型。用线虫rDNA ITS区通用引物NC5和NC2对虫体进行PCR扩增,并对虫体的核糖体基因间隔区ITS1和ITS2进行序列和进化分析,确定分离出来的异尖线虫三期幼虫包括简单异尖线虫(Anisakia simple)、抹香鲸异尖线虫(Anisakia physeteris)和典型异尖线虫(Anisakia typica)。调查结果对公共安全的风险评估有重要意义,同时为口岸的进境水产品食品安全风险评估提供参考数据。 展开更多
关键词 异尖线虫 形态学鉴定 PCR扩增 序列分析
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恒温实时荧光法快速检测简单异尖线虫方法的建立 被引量:3
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作者 张森 邓艳 +5 位作者 黄燕琼 何淑华 戴金 赵尚志 石磊 柏建山 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期53-57,共5页
为了快速鉴定简单异尖线虫,本研究建立了一套检测简单异尖线虫DNA的恒温实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,根据LAMP方法原理,针对简单异尖线虫ITS2区域设计引物特异性识别靶标基因。进行了特... 为了快速鉴定简单异尖线虫,本研究建立了一套检测简单异尖线虫DNA的恒温实时荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,根据LAMP方法原理,针对简单异尖线虫ITS2区域设计引物特异性识别靶标基因。进行了特异性、灵敏度、重复性和实际样品的测试,并与传统的PCR方法进行比较。结果表明,该方法能够特异性扩增简单异尖线虫DNA,对含有简单异尖线虫ITS2目的基因片段的质粒DNA检测限为1 fg/μL,灵敏度比传统的PCR方法高100倍,重复性良好,对实际样品进行检测,与传统的PCR测序方法结果相符。本研究建立的恒温实时荧光快速检测方法适用于特异性检测简单异尖线虫。 展开更多
关键词 恒温实时荧光法 简单异尖线虫 快速检测
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黄鳝和泥鳅感染颚口线虫的分类鉴定研究
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作者 黄燕琼 邓艳 +3 位作者 张森 何淑华 戴金 柏建山 《广东农业科学》 CAS 2017年第10期102-108,177,共8页
对从白云机场口岸入境的黄鳝(19批次)和国内部分地区(广东广州、重庆、四川内江、湖北荆州、福建漳州和吉林长春)市售的黄鳝和泥鳅进行剖检。将内脏和肌肉进行蛋白酶消化后,取滤液沉淀,体视显微镜下挑出虫体进行形态学鉴定,确定所分离... 对从白云机场口岸入境的黄鳝(19批次)和国内部分地区(广东广州、重庆、四川内江、湖北荆州、福建漳州和吉林长春)市售的黄鳝和泥鳅进行剖检。将内脏和肌肉进行蛋白酶消化后,取滤液沉淀,体视显微镜下挑出虫体进行形态学鉴定,确定所分离出的虫体为颚口线虫三期幼虫。印尼黄鳝中检出颚口线虫三期幼虫,批次阳性率达到91.7%;菲律宾黄鳝中未检出颚口线虫。国内只在漳州的泥鳅中发现了18条虫体,在黄鳝中发现了1条虫体,其他地区均无发现虫体。提取基因组DNA后,PCR扩增核糖体DNA第二内转录间隔区(internal transcribed spacer region 2,ITS2)基因,对产物测序后结果进行多重序列比对,构建系统进化树。确定印尼黄鳝中分离的颚口线虫为棘颚口线虫(Gnathostoma spinigerumn)和刚刺颚口线虫(G.hispidum);福建漳州地区分离出的19条颚口线虫,其中17条为日本颚口线虫(G.nipponicum)、2条为棘颚口线虫(G.spinigerumn)。 展开更多
关键词 颚口线虫 形态学鉴定 序列分析 系统进化树
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