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端粒酶永生化的人单克隆神经前体细胞系诱导表达多巴胺D_2受体
被引量:
4
1
作者
扈启宽
林昌盛
+4 位作者
白云
白洁
何其华
沈丽
李凌松
《北京大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期271-273,共3页
目的 :检测人神经前体细胞系HNG12 10 E能否诱导表达多巴胺D2 受体mRNA和受体蛋白 ,表达的受体是否有生理功能。方法 :细胞因子诱导分化 ,RT PCR和免疫荧光染色检测D2 的表达 ;Fluo 3测定多巴胺刺激产生的胞浆Ca2 + 。结果 :RT PCR显示...
目的 :检测人神经前体细胞系HNG12 10 E能否诱导表达多巴胺D2 受体mRNA和受体蛋白 ,表达的受体是否有生理功能。方法 :细胞因子诱导分化 ,RT PCR和免疫荧光染色检测D2 的表达 ;Fluo 3测定多巴胺刺激产生的胞浆Ca2 + 。结果 :RT PCR显示D2 mRNA诱导后阳性 ,免疫荧光结果显示诱导后D2 受体蛋白在细胞膜表面阳性 ,Fluo3法测定胞浆Ca2 + ,结果显示诱导后的细胞对 5mmol·L-1多巴胺递质反应使胞浆Ca2 + 快速上升。结论 :从mRNA、蛋白和生理功能 3个层次均证明HNG12 10 E细胞系诱导后表达D2 。
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关键词
神经前体细胞
端粒酶永生化
多巴胺D2受体
细胞分化
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职称材料
由BMP-4基因转入C2C12细胞引起的成肌细胞到成骨细胞的表型转变(英文)
被引量:
2
2
作者
汪炬
孙奋勇
+3 位作者
戴云
余榕捷
孙晋华
李明
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期719-723,共5页
目的 :研究BMP - 4基因对C2C12细胞分化的影响。方法 :BMP - 4基因在pCI-neo质粒中构建后转入C2C12细胞。转入pCI-neo -BMP - 4重组质粒的细胞、转入pCI-neo质粒的细胞及没有转染的细胞在相同的条件下培养。结果 :转入pCI-neo质粒的细...
目的 :研究BMP - 4基因对C2C12细胞分化的影响。方法 :BMP - 4基因在pCI-neo质粒中构建后转入C2C12细胞。转入pCI-neo -BMP - 4重组质粒的细胞、转入pCI-neo质粒的细胞及没有转染的细胞在相同的条件下培养。结果 :转入pCI-neo质粒的细胞及没有转染的细胞在增殖期和分化期均不表达BMP - 4 ,在未分化期表现为典型的星形形态 ,并相互融合成细长而多核的肌小管。而转入pCI -neo -BMP - 4重组质粒的细胞在增殖期和分化期均大量表达BMP - 4 ,形态上不形成肌小管 ,而是形成类似成骨细胞的形态 ,并高水平表达碱性磷酸酶、在培养基中分泌骨钙素。结论 :表明将BMP - 4基因转入C2C12细胞可改变其肌源的分化途径 ,而分化为成骨细胞系 ,且这种分化转向是基因水平上的。
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关键词
骨形态发生蛋白质类
C2C12细胞
碱性磷酸酶
骨钙素
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职称材料
碱性成纤维生长因子对大鼠视神经损伤的保护作用
被引量:
10
3
作者
胡爱莲
孙葆忱
+2 位作者
董冬生
刘守彬
李校坤
《眼科新进展》
CAS
2000年第4期252-254,共3页
目的 探讨碱性成纤维生长因子 (b FGF)对视神经损伤的保护作用。方法 用精确校准方法在成年鼠造成部分视神经损伤模型 ,球后注射生理盐水、VB1 2 、b FGF。伤后 1h和 4wk测量闪光视神经诱发电位 (F- VEP)。结果 伤后 1h,F- VEP潜伏...
目的 探讨碱性成纤维生长因子 (b FGF)对视神经损伤的保护作用。方法 用精确校准方法在成年鼠造成部分视神经损伤模型 ,球后注射生理盐水、VB1 2 、b FGF。伤后 1h和 4wk测量闪光视神经诱发电位 (F- VEP)。结果 伤后 1h,F- VEP潜伏期延长且电位幅值降低 ,与正常比较有明显差异。伤后 4wk时生理盐水和 VB1 2 组对刺激没有应答 ,b FGF组 F- VEP接近正常。结论 b FGF对视神经损伤后视神经节细胞和轴索退变有明显的保护作用。
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关键词
碱性成纤维生长因子
视神经损伤
视觉诱发电位
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职称材料
提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺
被引量:
1
4
作者
王莉馨
刘雅娟
+2 位作者
林剑
范洪学
金宁一
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2001年第2期142-142,共1页
目的 :通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离 ,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法 :以Klenow和MungBeanNuclease通过增加 2个及减少 2个碱基调整SD序列和ATG之间距离 ,SDS PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量 ,以高压液...
目的 :通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离 ,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法 :以Klenow和MungBeanNuclease通过增加 2个及减少 2个碱基调整SD序列和ATG之间距离 ,SDS PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量 ,以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果 :获得了重组质粒pLX2 ,pLX3 ,诱导后与表达质粒pLX1( 7.78% )相比 ,表达量分别为 8.0 3 % ,9.9% ,经纯化后获得的bFGF纯度达 98% ,ED50 为 2 .2 9ng/ml。结论 :调整SD序列和ATG之间距离可以增加目的基因的剂量 。
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关键词
BFGF
ATG
SD序列
基因表达
纯化
碱性成纤维细胞因子
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职称材料
题名
端粒酶永生化的人单克隆神经前体细胞系诱导表达多巴胺D_2受体
被引量:
4
1
作者
扈启宽
林昌盛
白云
白洁
何其华
沈丽
李凌松
机构
北京
大学
医学部干细胞中心
广州暨南大学生物工程研究所
出处
《北京大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期271-273,共3页
基金
国家重点基础研究发展规划项目 ( 973 ) ( 2 0 0 1CB5 10 10 0 )
国家高技术研究发展计划 ( 863 ) ( 2 0 0 2AA2 0 5 0 81)
+1 种基金
北京市科技计划项目 (H0 2 0 2 2 0 0 10 2 90 )
宁夏自然科学基金 (A3 0 11)资助~~
文摘
目的 :检测人神经前体细胞系HNG12 10 E能否诱导表达多巴胺D2 受体mRNA和受体蛋白 ,表达的受体是否有生理功能。方法 :细胞因子诱导分化 ,RT PCR和免疫荧光染色检测D2 的表达 ;Fluo 3测定多巴胺刺激产生的胞浆Ca2 + 。结果 :RT PCR显示D2 mRNA诱导后阳性 ,免疫荧光结果显示诱导后D2 受体蛋白在细胞膜表面阳性 ,Fluo3法测定胞浆Ca2 + ,结果显示诱导后的细胞对 5mmol·L-1多巴胺递质反应使胞浆Ca2 + 快速上升。结论 :从mRNA、蛋白和生理功能 3个层次均证明HNG12 10 E细胞系诱导后表达D2 。
关键词
神经前体细胞
端粒酶永生化
多巴胺D2受体
细胞分化
Keywords
Neural progenitor cell
Receptor, dopamine D 2
Cell differentiation
分类号
R338 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
由BMP-4基因转入C2C12细胞引起的成肌细胞到成骨细胞的表型转变(英文)
被引量:
2
2
作者
汪炬
孙奋勇
戴云
余榕捷
孙晋华
李明
机构
广州暨南大学生物工程研究所
香港新界沙田中文
大学
药物与治疗系
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期719-723,共5页
文摘
目的 :研究BMP - 4基因对C2C12细胞分化的影响。方法 :BMP - 4基因在pCI-neo质粒中构建后转入C2C12细胞。转入pCI-neo -BMP - 4重组质粒的细胞、转入pCI-neo质粒的细胞及没有转染的细胞在相同的条件下培养。结果 :转入pCI-neo质粒的细胞及没有转染的细胞在增殖期和分化期均不表达BMP - 4 ,在未分化期表现为典型的星形形态 ,并相互融合成细长而多核的肌小管。而转入pCI -neo -BMP - 4重组质粒的细胞在增殖期和分化期均大量表达BMP - 4 ,形态上不形成肌小管 ,而是形成类似成骨细胞的形态 ,并高水平表达碱性磷酸酶、在培养基中分泌骨钙素。结论 :表明将BMP - 4基因转入C2C12细胞可改变其肌源的分化途径 ,而分化为成骨细胞系 ,且这种分化转向是基因水平上的。
关键词
骨形态发生蛋白质类
C2C12细胞
碱性磷酸酶
骨钙素
Keywords
Bone morphogenetic proteins
C2C12 cells
Alkaline phosphatase
Osteocalcin
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
碱性成纤维生长因子对大鼠视神经损伤的保护作用
被引量:
10
3
作者
胡爱莲
孙葆忱
董冬生
刘守彬
李校坤
机构
世界卫生组织防盲合作中心
北京同仁医院眼科
广州暨南大学生物工程研究所
出处
《眼科新进展》
CAS
2000年第4期252-254,共3页
基金
北京市卫生局重点学科资助
文摘
目的 探讨碱性成纤维生长因子 (b FGF)对视神经损伤的保护作用。方法 用精确校准方法在成年鼠造成部分视神经损伤模型 ,球后注射生理盐水、VB1 2 、b FGF。伤后 1h和 4wk测量闪光视神经诱发电位 (F- VEP)。结果 伤后 1h,F- VEP潜伏期延长且电位幅值降低 ,与正常比较有明显差异。伤后 4wk时生理盐水和 VB1 2 组对刺激没有应答 ,b FGF组 F- VEP接近正常。结论 b FGF对视神经损伤后视神经节细胞和轴索退变有明显的保护作用。
关键词
碱性成纤维生长因子
视神经损伤
视觉诱发电位
Keywords
basic fibroblast growth factor (bFGF)
optic nerve crush
neuroprotection
visual evoked potential
分类号
R774.6 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺
被引量:
1
4
作者
王莉馨
刘雅娟
林剑
范洪学
金宁一
机构
解放军军需
大学
病毒
研究所
吉林
大学
预防医学院
广州暨南大学生物工程研究所
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2001年第2期142-142,共1页
基金
国家九五科技攻关项目 ( 96 C0 2 0 1 0 3)资助
文摘
目的 :通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离 ,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法 :以Klenow和MungBeanNuclease通过增加 2个及减少 2个碱基调整SD序列和ATG之间距离 ,SDS PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量 ,以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果 :获得了重组质粒pLX2 ,pLX3 ,诱导后与表达质粒pLX1( 7.78% )相比 ,表达量分别为 8.0 3 % ,9.9% ,经纯化后获得的bFGF纯度达 98% ,ED50 为 2 .2 9ng/ml。结论 :调整SD序列和ATG之间距离可以增加目的基因的剂量 。
关键词
BFGF
ATG
SD序列
基因表达
纯化
碱性成纤维细胞因子
Keywords
bFGF
ATG
SD sequence
expression
purification
分类号
R392.2 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
端粒酶永生化的人单克隆神经前体细胞系诱导表达多巴胺D_2受体
扈启宽
林昌盛
白云
白洁
何其华
沈丽
李凌松
《北京大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
由BMP-4基因转入C2C12细胞引起的成肌细胞到成骨细胞的表型转变(英文)
汪炬
孙奋勇
戴云
余榕捷
孙晋华
李明
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2004
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
碱性成纤维生长因子对大鼠视神经损伤的保护作用
胡爱莲
孙葆忱
董冬生
刘守彬
李校坤
《眼科新进展》
CAS
2000
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺
王莉馨
刘雅娟
林剑
范洪学
金宁一
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2001
1
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职称材料
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