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端粒酶永生化的人单克隆神经前体细胞系诱导表达多巴胺D_2受体 被引量:4
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作者 扈启宽 林昌盛 +4 位作者 白云 白洁 何其华 沈丽 李凌松 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期271-273,共3页
目的 :检测人神经前体细胞系HNG12 10 E能否诱导表达多巴胺D2 受体mRNA和受体蛋白 ,表达的受体是否有生理功能。方法 :细胞因子诱导分化 ,RT PCR和免疫荧光染色检测D2 的表达 ;Fluo 3测定多巴胺刺激产生的胞浆Ca2 + 。结果 :RT PCR显示... 目的 :检测人神经前体细胞系HNG12 10 E能否诱导表达多巴胺D2 受体mRNA和受体蛋白 ,表达的受体是否有生理功能。方法 :细胞因子诱导分化 ,RT PCR和免疫荧光染色检测D2 的表达 ;Fluo 3测定多巴胺刺激产生的胞浆Ca2 + 。结果 :RT PCR显示D2 mRNA诱导后阳性 ,免疫荧光结果显示诱导后D2 受体蛋白在细胞膜表面阳性 ,Fluo3法测定胞浆Ca2 + ,结果显示诱导后的细胞对 5mmol·L-1多巴胺递质反应使胞浆Ca2 + 快速上升。结论 :从mRNA、蛋白和生理功能 3个层次均证明HNG12 10 E细胞系诱导后表达D2 。 展开更多
关键词 神经前体细胞 端粒酶永生化 多巴胺D2受体 细胞分化
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由BMP-4基因转入C2C12细胞引起的成肌细胞到成骨细胞的表型转变(英文) 被引量:2
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作者 汪炬 孙奋勇 +3 位作者 戴云 余榕捷 孙晋华 李明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期719-723,共5页
目的 :研究BMP - 4基因对C2C12细胞分化的影响。方法 :BMP - 4基因在pCI-neo质粒中构建后转入C2C12细胞。转入pCI-neo -BMP - 4重组质粒的细胞、转入pCI-neo质粒的细胞及没有转染的细胞在相同的条件下培养。结果 :转入pCI-neo质粒的细... 目的 :研究BMP - 4基因对C2C12细胞分化的影响。方法 :BMP - 4基因在pCI-neo质粒中构建后转入C2C12细胞。转入pCI-neo -BMP - 4重组质粒的细胞、转入pCI-neo质粒的细胞及没有转染的细胞在相同的条件下培养。结果 :转入pCI-neo质粒的细胞及没有转染的细胞在增殖期和分化期均不表达BMP - 4 ,在未分化期表现为典型的星形形态 ,并相互融合成细长而多核的肌小管。而转入pCI -neo -BMP - 4重组质粒的细胞在增殖期和分化期均大量表达BMP - 4 ,形态上不形成肌小管 ,而是形成类似成骨细胞的形态 ,并高水平表达碱性磷酸酶、在培养基中分泌骨钙素。结论 :表明将BMP - 4基因转入C2C12细胞可改变其肌源的分化途径 ,而分化为成骨细胞系 ,且这种分化转向是基因水平上的。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白质类 C2C12细胞 碱性磷酸酶 骨钙素
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碱性成纤维生长因子对大鼠视神经损伤的保护作用 被引量:10
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作者 胡爱莲 孙葆忱 +2 位作者 董冬生 刘守彬 李校坤 《眼科新进展》 CAS 2000年第4期252-254,共3页
目的 探讨碱性成纤维生长因子 (b FGF)对视神经损伤的保护作用。方法 用精确校准方法在成年鼠造成部分视神经损伤模型 ,球后注射生理盐水、VB1 2 、b FGF。伤后 1h和 4wk测量闪光视神经诱发电位 (F- VEP)。结果 伤后 1h,F- VEP潜伏... 目的 探讨碱性成纤维生长因子 (b FGF)对视神经损伤的保护作用。方法 用精确校准方法在成年鼠造成部分视神经损伤模型 ,球后注射生理盐水、VB1 2 、b FGF。伤后 1h和 4wk测量闪光视神经诱发电位 (F- VEP)。结果 伤后 1h,F- VEP潜伏期延长且电位幅值降低 ,与正常比较有明显差异。伤后 4wk时生理盐水和 VB1 2 组对刺激没有应答 ,b FGF组 F- VEP接近正常。结论  b FGF对视神经损伤后视神经节细胞和轴索退变有明显的保护作用。 展开更多
关键词 碱性成纤维生长因子 视神经损伤 视觉诱发电位
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提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺 被引量:1
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作者 王莉馨 刘雅娟 +2 位作者 林剑 范洪学 金宁一 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第2期142-142,共1页
目的 :通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离 ,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法 :以Klenow和MungBeanNuclease通过增加 2个及减少 2个碱基调整SD序列和ATG之间距离 ,SDS PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量 ,以高压液... 目的 :通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离 ,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法 :以Klenow和MungBeanNuclease通过增加 2个及减少 2个碱基调整SD序列和ATG之间距离 ,SDS PAGE和Westernblot检测目的蛋白表达量 ,以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果 :获得了重组质粒pLX2 ,pLX3 ,诱导后与表达质粒pLX1( 7.78% )相比 ,表达量分别为 8.0 3 % ,9.9% ,经纯化后获得的bFGF纯度达 98% ,ED50 为 2 .2 9ng/ml。结论 :调整SD序列和ATG之间距离可以增加目的基因的剂量 。 展开更多
关键词 BFGF ATG SD序列 基因表达 纯化 碱性成纤维细胞因子
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