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改造稀有密码子对rhFGF8a原核表达的影响
被引量：
2
1
作者
黄明
蒋寅
+2 位作者
周飞燕
付灿
雷文瑾
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期637-638,641,共3页
目的:构建重组人成纤维细胞生长因子8a(rhFGF8a)高效表达载体,提高该蛋白的表达量。方法:采用PCR技术设计引物替换rhFGF8a基因N端的稀有密码子以及稀有终止子,构建原核表达载体pET22b-mrhFGF8a,转化大肠杆菌,用异丙基β硫代半乳糖(IPTG...
目的:构建重组人成纤维细胞生长因子8a(rhFGF8a)高效表达载体,提高该蛋白的表达量。方法:采用PCR技术设计引物替换rhFGF8a基因N端的稀有密码子以及稀有终止子,构建原核表达载体pET22b-mrhFGF8a,转化大肠杆菌,用异丙基β硫代半乳糖(IPTG)诱导表达,Sephacryl S-200纯化表达蛋白,MTT法检测其生物学活性。结果:表达产物经SDS-PAGE、Western blot鉴定,目的蛋白量占全菌蛋白的31%,Sephacryl S-200纯化后蛋白纯度可达97.28%,且具促进NIH3T3细胞增殖活性。结论:通过改造稀有密码子的方法有效地提高了真核基因在原核表达体系中的表达量。
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关键词
FGF8a
稀有密码子
基因表达
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职称材料
rhFGF-8a制备及其对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响
2
作者
周飞燕
卢柳燕
+2 位作者
韦剑
丘力功
黄明
《广西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2010年第1期68-71,共4页
为研究rhFGF-8a对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管生成的影响,通过基因工程方法获得了rhFGF-8a包涵体蛋白的大量表达,经复性、纯化后获得纯度高达99%以上的rhFGF-8a蛋白。通过细胞增殖法测定rhFGF-8a的生物学活性,运用鸡胚绒毛尿囊膜实验观察其...
为研究rhFGF-8a对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管生成的影响,通过基因工程方法获得了rhFGF-8a包涵体蛋白的大量表达,经复性、纯化后获得纯度高达99%以上的rhFGF-8a蛋白。通过细胞增殖法测定rhFGF-8a的生物学活性,运用鸡胚绒毛尿囊膜实验观察其对新生血管生成的影响,结果表明:纯化后的rhFGF-8a能够刺激小鼠成纤维细胞NIH 3T3的生长;rhFGF-8a诱发鸡胚绒毛尿囊膜新生血管生成能力很弱。
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关键词
rhFGF-8a
鸡胚绒毛尿囊膜
血管生成
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职称材料
题名
改造稀有密码子对rhFGF8a原核表达的影响
被引量：
2
1
作者
黄明
蒋寅
周飞燕
付灿
雷文瑾
机构
广州拜迪生物医药研究开发中心
山东菏泽学院生命科学系
广州
市轻工业中等专业学校
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期637-638,641,共3页
基金
广东省自然科学基金资助项目(04006313)
文摘
目的:构建重组人成纤维细胞生长因子8a(rhFGF8a)高效表达载体,提高该蛋白的表达量。方法:采用PCR技术设计引物替换rhFGF8a基因N端的稀有密码子以及稀有终止子,构建原核表达载体pET22b-mrhFGF8a,转化大肠杆菌,用异丙基β硫代半乳糖(IPTG)诱导表达,Sephacryl S-200纯化表达蛋白,MTT法检测其生物学活性。结果:表达产物经SDS-PAGE、Western blot鉴定,目的蛋白量占全菌蛋白的31%,Sephacryl S-200纯化后蛋白纯度可达97.28%,且具促进NIH3T3细胞增殖活性。结论:通过改造稀有密码子的方法有效地提高了真核基因在原核表达体系中的表达量。
关键词
FGF8a
稀有密码子
基因表达
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
rhFGF-8a制备及其对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响
2
作者
周飞燕
卢柳燕
韦剑
丘力功
黄明
机构
广西师范大学生命科学学院。广西桂林
广州拜迪生物医药研究开发中心
深圳生科源技术有限公司
出处
《广西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2010年第1期68-71,共4页
基金
广东省自然科学基金资助项目(04006313)
文摘
为研究rhFGF-8a对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管生成的影响,通过基因工程方法获得了rhFGF-8a包涵体蛋白的大量表达,经复性、纯化后获得纯度高达99%以上的rhFGF-8a蛋白。通过细胞增殖法测定rhFGF-8a的生物学活性,运用鸡胚绒毛尿囊膜实验观察其对新生血管生成的影响,结果表明:纯化后的rhFGF-8a能够刺激小鼠成纤维细胞NIH 3T3的生长;rhFGF-8a诱发鸡胚绒毛尿囊膜新生血管生成能力很弱。
关键词
rhFGF-8a
鸡胚绒毛尿囊膜
血管生成
Keywords
rhFGF-8a
chick embryo chorioallantoic membrane
angiogenesis
分类号
R979.1 [医药卫生—药品]
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作者
出处
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被引量
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1
改造稀有密码子对rhFGF8a原核表达的影响
黄明
蒋寅
周飞燕
付灿
雷文瑾
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
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职称材料
2
rhFGF-8a制备及其对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响
周飞燕
卢柳燕
韦剑
丘力功
黄明
《广西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2010
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