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间充质干细胞移植于缺血心脏后合成蛋白的特异性提取与分析
1
作者 卢婉儿 代蓥 +7 位作者 汤穆浛 魏康 陈术佳 黄怀 林静 彭浩荣 周礼轩 韩敦正 《解放军医学杂志》 北大核心 2025年第8期991-998,共8页
目的应用突变型的甲硫酰基-tRNA合成酶(MetRS^(L247G))标记新生蛋白技术特异性提取和分析骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植于缺血心脏后的新生蛋白质组,以探究移植后BMSCs可能的作用机制。方法通过慢病毒感染的方法使BMSCs的MetRS基因第274... 目的应用突变型的甲硫酰基-tRNA合成酶(MetRS^(L247G))标记新生蛋白技术特异性提取和分析骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植于缺血心脏后的新生蛋白质组,以探究移植后BMSCs可能的作用机制。方法通过慢病毒感染的方法使BMSCs的MetRS基因第274位进行点突变,实现BMSCs新生蛋白的叠氮左亮氨酸(ANL)标记,并采用荧光非标准氨基酸标记(FUNCAT)验证此技术对BMSCs新生蛋白的标记效果。将健康雌性8~10周龄30只C57BL/6J小鼠分为实验组(n=15)与对照组(n=15)。实验组以结扎冠状动脉前降支的方法构建急性心肌梗死小鼠模型,对照组小鼠仅行开胸手术,不进行左前降支冠状动脉结扎。造模后两组小鼠均注射MetRS^(L247G)基因突变的BMSCs(MetRS^(L247G)-BMSCs),并在梗死区旁缺血区域的3个不同部位进行心肌注射。两组小鼠分别在术后第0、2、6天(每个时间点n=5)腹腔注射ANL,1次/6 h,共4次,24 h后实施安乐死,并分离心脏组织。采用针对ANL标记蛋白的富集技术及液相色谱-串联质谱(LC-MS)分析,收集移植于两组小鼠心肌后BMSCs所合成且被标记的新生蛋白。采用基因本体论(GO)分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析、蛋白质互作网络(PPI)分析及热图分析3个时间点的差异蛋白,并筛选出关键通路及基因。结果荧光显微镜下可见MetRS^(L247G)慢病毒感染的BMSCs标记有mCherry信号,证实MetRS^(L247G)-BMSCs细胞系构建成功,且只有同时加入MetRS^(L247G)-BMSCs和ANL的培养基中的新生蛋白标记有绿色荧光信号,验证了此标记方法的敏感性及特异性。GO分析显示,差异蛋白主要集中在细胞外泌体、细胞外基质、黏着斑等基本的细胞生物过程;KEGG分析及PPI分析显示,差异蛋白主要参与补体和凝血级联通路、肌动蛋白细胞骨架调节通路、细胞凋亡通路等过程;热图分析显示,与对照组比较,实验组小鼠移植后第1天,其心肌组织抗凋亡相关因子及细胞黏附相关因子表达均明显上调(P<0.05);实验组移植后第3天,抗凋亡相关因子、促凋亡相关因子及细胞黏附相关因子表达均明显上调(P<0.05);实验组移植后第7天,抗凋亡相关因子、细胞分化相关因子及细胞黏附相关因子表达均明显上调(P<0.05);而实验组第1、7天凋亡诱导因子1的表达明显下调(P<0.05)。此外,在第3天时大部分差异蛋白的表达均明显上调(P<0.05),如抗凋亡相关因子S100钙结合蛋白A11、簇集素、凝溶胶蛋白,促凋亡相关因子组织蛋白酶B,细胞分化相关因子转胶蛋白-2,细胞黏附相关因子丝切蛋白-1、骨膜蛋白、纤连蛋白等。结论MetRS^(L247G)突变可使BMSCs吸收ANL,使新合成的蛋白被标记,证实了该新生蛋白标记技术的可行性。BMSCs在缺血心肌组织中新生蛋白的作用主要在外泌体分泌及细胞外基质组织方面。BMSCs可能通过影响补体和凝血级联反应、激活炎症因子、调整肌动蛋白细胞骨架结构及调控细胞凋亡等途径,以适应及应对缺血缺氧的环境,从而维持BMSCs的存活。 展开更多
关键词 间充质干细胞 间充质干细胞移植 心肌梗死 心力衰竭 蛋白质组学
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芪苈强心胶囊对冠心病合并心力衰竭患者血清脂联素水平及心功能的影响 被引量：73
2
作者 李强 郭壮波 +1 位作者 黎庆梅 郭顺华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1119-1122,共4页
目的:探讨芪苈强心胶囊对冠心病合并心力衰竭患者血清脂联素(APN)、氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平及心功能的影响。方法:将120例冠心病合并心力衰竭患者随机分为对照组和治疗组,在西医常规治疗基础上分别加用对照胶囊和芪苈强心胶... 目的:探讨芪苈强心胶囊对冠心病合并心力衰竭患者血清脂联素(APN)、氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平及心功能的影响。方法:将120例冠心病合并心力衰竭患者随机分为对照组和治疗组,在西医常规治疗基础上分别加用对照胶囊和芪苈强心胶囊,疗程6个月。观察治疗前后患者的心功能分级,超声心动图下测定左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)和左心室射血分数(LVEF),测量患者6 min步行距离(6-MWT),酶联免疫法测定血清APN和NT-proBNP水平变化。结果:心衰患者的血清APN和NT-proBNP水平随着美国纽约心脏协会(NYHA)分级增加而明显升高;治疗6个月后,治疗组和对照组治疗总有效率分别为91.7%和75.0%,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗后2组患者LVEDD和LVESD均缩小,LVEF明显提高,6-MWT明显增长,血清APN和NT-proBNP水平均降低,与对照组比较,治疗组以上指标改善更为显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:芪苈强心胶囊可以显著降低冠心病合并心力衰竭患者的血清APN和NT-proBNP水平,明显改善心功能。 展开更多
关键词 芪苈强心胶囊 冠心病 心力衰竭 脂联素 心功能
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阿托伐他汀对急性心肌梗死大鼠内皮微颗粒及心肌细胞凋亡的影响 被引量：18
3
作者 李强 郭壮波 +2 位作者 伍光颖 李超霞 钟志勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期359-363,373,共6页
目的:探讨阿托伐他汀(atorvastatin,AT)对大鼠急性心肌梗死早期内皮微颗粒(endothial microparticles,EMP)及心肌细胞凋亡的影响。方法:将24只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、心肌梗死组(MI组)和阿托伐他汀心肌梗死组(MI+AT组),每... 目的:探讨阿托伐他汀(atorvastatin,AT)对大鼠急性心肌梗死早期内皮微颗粒(endothial microparticles,EMP)及心肌细胞凋亡的影响。方法:将24只雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、心肌梗死组(MI组)和阿托伐他汀心肌梗死组(MI+AT组),每组8只。采用冠状动脉结扎制作急性心肌梗死大鼠模型。分别在造模后2 h和24 h采外周血检测肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,c Tn T)和EMP,其中循环EMP用流式细胞术检测。通过TUNEL检测心肌细胞凋亡情况。结果:造模后2 h,MI组大鼠的CK-MB表达水平较sham组大鼠显著升高(P<0.05);MI组及MI+AT组大鼠EMP表达水平及心肌细胞凋亡率上升,显著高于sham组(P<0.05)。造模后24 h,MI组大鼠EMP表达水平显著高于sham组(P<0.05);MI+AT组大鼠CK-MB、c Tn T、EMP表达水平及心肌细胞凋亡率较MI组显著降低(P<0.05)。此外,MI组大鼠的CKMB表达水平在造模后24 h较造模后2 h显著升高(P<0.05);MI+AT大鼠CK-MB、c Tn T和EMP表达水平在造模后24 h较2 h显著下降(P<0.05)。结论:AT可降低大鼠急性心肌梗死时的EMP水平和心肌细胞凋亡率,提示AT对内皮功能有保护作用。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 阿托伐他汀 内皮微颗粒 心肌细胞凋亡
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77例脑心综合征分析 被引量：11
4
作者 李强 李彩英 《实用医学杂志》 CAS 1998年第5期319-320,共2页
对既往心电图检查正常且无冠心病史并经CT证实的急性脑卒中106例患者的心电图资料进行分析。结果发现，心电图异常77例（72．6％）。其主要表现为：ST-T段改变、Q-T间期延长、各种，心律失常。心电图异常改变与脑卒中的病变性质无关，... 对既往心电图检查正常且无冠心病史并经CT证实的急性脑卒中106例患者的心电图资料进行分析。结果发现，心电图异常77例（72．6％）。其主要表现为：ST-T段改变、Q-T间期延长、各种，心律失常。心电图异常改变与脑卒中的病变性质无关，与病变部位、意识障碍程度及预后有关。提示，急性脑卒中患者在出现急性脑血管循环障碍的同时可引发脑心综合征。 展开更多
关键词 脑心综合征 中风 心电图
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东菱克栓酶治疗急性大面积脑梗死30例
5
作者 李晶 李汉诚 《医药导报》 CAS 1999年第2期97-97,共1页
关键词 东菱克栓酶 治疗 急性 脑梗塞
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不同胰岛素注射方式治疗非昏迷高血糖危象患者的疗效研究 被引量：6
6
作者 赖伟华 罗思婵 +2 位作者 陈广树 韩敦正 汤穆浛 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2022年第6期719-723,共5页
背景高血糖危象是糖尿病的急危重症,治疗上体现个体化,降糖使用的胰岛素为小剂量静脉滴注,但相关研究指出全程使用胰岛素皮下注射泵同样能起到小剂量胰岛素静脉注射泵的效果,且使用更加简易方便。目的探讨治疗非昏迷高血糖危象患者时使... 背景高血糖危象是糖尿病的急危重症,治疗上体现个体化,降糖使用的胰岛素为小剂量静脉滴注,但相关研究指出全程使用胰岛素皮下注射泵同样能起到小剂量胰岛素静脉注射泵的效果,且使用更加简易方便。目的探讨治疗非昏迷高血糖危象患者时使用小剂量胰岛素静脉注射泵及胰岛素皮下注射泵的血糖缓解情况。方法选取2017年3月至2020年3月于广州市红十字会医院住院治疗的高血糖危象患者115例,其中糖尿病酮症酸中毒(DKA)72例,高渗高血糖综合征(HHS)43例。采用随机数字表法将患者分为小剂量胰岛素静脉注射泵组(n=58)及胰岛素皮下注射泵组(n=57)。小剂量胰岛素静脉注射泵组使用重组人胰岛素,胰岛素皮下注射泵组使用门冬胰岛素,患者血糖达标前,两组胰岛素用量均为0.10~0.15 U·kg^(-1)·h^(-1)。观察两组患者血糖下降速度、血糖达标时间、平均血糖及低血糖发生次数。结果小剂量胰岛素静脉注射泵组和胰岛素皮下注射泵组血糖下降速度、血糖达标时间、平均血糖、低血糖发生次数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。小剂量胰岛素静脉注射泵组和胰岛素皮下注射泵组中的DKA患者血糖下降速度、血糖达标时间、平均血糖、低血糖发生次数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。小剂量胰岛素静脉注射泵组和胰岛素皮下注射泵组中的HHS患者血糖下降速度、血糖达标时间、平均血糖、低血糖发生次数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论对于非昏迷高血糖危象患者,使用小剂量胰岛素静脉注射泵及胰岛素皮下注射泵均可有效缓解血糖,胰岛素皮下注射泵可作为高血糖危象患者降糖的注射方式之一。 展开更多
关键词 高血糖危象 非昏迷 胰岛素注射方式 血糖 静脉注射 注射 皮下
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HDAC1基因沉默和HIF-1α过表达改善MSCs定向分化及VEGF分泌的功能 被引量：2
7
作者 汤穆浛 卢俊江 韩敦正 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1668-1672,共5页
目的:探讨低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)过表达对组蛋白脱乙酰酶1(histone deacetylase 1,HDAC1)基因沉默大鼠间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)血管内皮生长因子(vascular endothelial growth facto... 目的:探讨低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)过表达对组蛋白脱乙酰酶1(histone deacetylase 1,HDAC1)基因沉默大鼠间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)分泌功能的影响。方法:用全骨髓贴壁法,从大鼠骨髓中提取MSCs,HDAC1-shRNA慢病毒感染MSCs,用嘌呤霉素筛选出稳定细胞株,再予以重组腺病毒HIF-1α三突变体(recombinant adenovirus containing triple-point mutant HIF-1αgene,Ad-HIF-1α-trip)感染HDAC1-shRNA-MSCs使其过表达HIF-1α,分别用RT-qPCR及Western blot检测MSCs中HIF-1α及VEGF的表达量。结果:HIF-1α过表达后,HDAC1基因沉默的MSCs中HIF-1α及VEGF的表达量均显著升高(P<0.05)。结论:HIF-1α过表达可改善HDAC1基因沉默大鼠MSCs中HIF-1α的表达及VEGF的分泌功能。 展开更多
关键词 低氧诱导因子1Α 组蛋白脱乙酰酶1 间充质干细胞 血管内皮生长因子
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