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一种高效的酿酒酵母和毕赤酵母电击转化法(英文)
被引量：
11
1
作者
徐志武
张颖
+4 位作者
王智学
曹燕
崔亮
李盛
刘秋云
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期98-101,共4页
电击转化由于其高效率而被广泛地应用于酿酒酵母的转化过程中。但是由于菌种退化或是暴露于污染的环境,很多菌种的转化效率会显著地下降2～4个数量级。探索了一种改进的电击转化方法,它借助于单链载体DNA和转化后在YPD培养基中的复苏过...
电击转化由于其高效率而被广泛地应用于酿酒酵母的转化过程中。但是由于菌种退化或是暴露于污染的环境,很多菌种的转化效率会显著地下降2～4个数量级。探索了一种改进的电击转化方法,它借助于单链载体DNA和转化后在YPD培养基中的复苏过程,可以使转化效率比之前曾报道过的已经最优化的用醋酸锂和二硫苏糖醇进行预处理的转化方法效率提高13倍。在毕赤酵母中使用这一改进的方法,可以使转化效率提高高达114倍,在一些已经退化的酿酒酵母菌株中,此方法也可以提高转化效率将近100倍。这一方法将为几乎所有酿酒酵母和毕赤酵母的分子操作提供极大的便利。
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关键词
电击转化
酿酒酵母
单链载体DNA
转化后复苏
毕赤酵母
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职称材料
1型登革病毒初次感染患者血清中和抗体的动态反应分析
被引量：
2
2
作者
胡冬梅
李洁
+5 位作者
王大虎
狄飚
丘立文
王压娣
丁细霞
车小燕
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第12期1773-1776,1791,共5页
目的研究感染登革病毒(DENV)后,机体DENV中和抗体产生的特点及其动态变化规律。方法采集2006年DENV-1初次感染患者在发病2周之内的,以及同一组患者在2010年随诊期间的血清标本,用本实验室建立的以群特异性DENV NS1抗原捕获ELISA为基础的...
目的研究感染登革病毒(DENV)后,机体DENV中和抗体产生的特点及其动态变化规律。方法采集2006年DENV-1初次感染患者在发病2周之内的,以及同一组患者在2010年随诊期间的血清标本,用本实验室建立的以群特异性DENV NS1抗原捕获ELISA为基础的,可同时测定4型DENV中和抗体的微中和试验(ELISA-MNT),对这两组血清中的DENV中和抗体滴度进行检测。这两组血清标本均检测了全部抗4型DENV的中和抗体。此外,2010年的血清标本还检测了抗3种不同毒株的DENV-1(其中包括1株标准株和2株临床分离株)的中和抗体。结果 2006年和2010年这两组不同时间段的血清标本对全部4型DENV均可显示出一定程度的交叉中和抗体反应,其中,2006年的血清标本交叉中和抗体反应更为明显,表现为其最高的中和抗体针对的甚至是DENV-2,而不是预计中的DENV-1;2010年的血清标本中最高的中和抗体滴度针对的是同型的DENV-1。Mann-whitney U检验显示:对于同型的抗DENV-1中和抗体滴度,2010年的血清要明显高于2006年的血清(U=86.500,P=0.000),但异型中和抗体滴度在两组血清标本中无明显改变。Friedman检验显示,尽管同属DENV-1,但2010年的血清标本对3种不同毒株的DENV-1的中和抗体滴度之间还是存在显著差异(χ2=12.123,P=0.002)。结论 4型交叉中和抗体反应是DENV感染后,尤其是在感染早期中和抗体的产生特点,但只有同型DENV中和抗体滴度可随时间的推移而发生明显的上升;然而即使是同属于一种血清型,不同毒株之间的中和抗体也可能存在差异。
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关键词
登革病毒
非结构蛋白1
中和抗体
微中和试验
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职称材料
题名
一种高效的酿酒酵母和毕赤酵母电击转化法(英文)
被引量：
11
1
作者
徐志武
张颖
王智学
曹燕
崔亮
李盛
刘秋云
机构
中山大学基因工程教育部重点实验室和生物工程研究
中心
//有害生物
控制
与资源利用国家重点实验室
广州市疾病预防和控制中心
出处
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期98-101,共4页
基金
广东省科技计划资助项目(2008B020100001)
广东省自然科学基金资助项目(05003328)
+1 种基金
国家自然科学基金资助项目(30370799)
温氏集团和中山大学开放实验室基金资助项目
文摘
电击转化由于其高效率而被广泛地应用于酿酒酵母的转化过程中。但是由于菌种退化或是暴露于污染的环境,很多菌种的转化效率会显著地下降2～4个数量级。探索了一种改进的电击转化方法,它借助于单链载体DNA和转化后在YPD培养基中的复苏过程,可以使转化效率比之前曾报道过的已经最优化的用醋酸锂和二硫苏糖醇进行预处理的转化方法效率提高13倍。在毕赤酵母中使用这一改进的方法,可以使转化效率提高高达114倍,在一些已经退化的酿酒酵母菌株中,此方法也可以提高转化效率将近100倍。这一方法将为几乎所有酿酒酵母和毕赤酵母的分子操作提供极大的便利。
关键词
电击转化
酿酒酵母
单链载体DNA
转化后复苏
毕赤酵母
Keywords
electroporation
Saccharomyces cerevisiae
single stranded carrier DNA
post-electroporation growth
Pichia pastoris
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
1型登革病毒初次感染患者血清中和抗体的动态反应分析
被引量：
2
2
作者
胡冬梅
李洁
王大虎
狄飚
丘立文
王压娣
丁细霞
车小燕
机构
南方医科大学珠江医院检验医学部
广州市疾病预防和控制中心
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第12期1773-1776,1791,共5页
基金
NSFC-广东联合基金(U1132002)
国家自然科学基金(30671874)~~
文摘
目的研究感染登革病毒(DENV)后,机体DENV中和抗体产生的特点及其动态变化规律。方法采集2006年DENV-1初次感染患者在发病2周之内的,以及同一组患者在2010年随诊期间的血清标本,用本实验室建立的以群特异性DENV NS1抗原捕获ELISA为基础的,可同时测定4型DENV中和抗体的微中和试验(ELISA-MNT),对这两组血清中的DENV中和抗体滴度进行检测。这两组血清标本均检测了全部抗4型DENV的中和抗体。此外,2010年的血清标本还检测了抗3种不同毒株的DENV-1(其中包括1株标准株和2株临床分离株)的中和抗体。结果 2006年和2010年这两组不同时间段的血清标本对全部4型DENV均可显示出一定程度的交叉中和抗体反应,其中,2006年的血清标本交叉中和抗体反应更为明显,表现为其最高的中和抗体针对的甚至是DENV-2,而不是预计中的DENV-1;2010年的血清标本中最高的中和抗体滴度针对的是同型的DENV-1。Mann-whitney U检验显示:对于同型的抗DENV-1中和抗体滴度,2010年的血清要明显高于2006年的血清(U=86.500,P=0.000),但异型中和抗体滴度在两组血清标本中无明显改变。Friedman检验显示,尽管同属DENV-1,但2010年的血清标本对3种不同毒株的DENV-1的中和抗体滴度之间还是存在显著差异(χ2=12.123,P=0.002)。结论 4型交叉中和抗体反应是DENV感染后,尤其是在感染早期中和抗体的产生特点,但只有同型DENV中和抗体滴度可随时间的推移而发生明显的上升;然而即使是同属于一种血清型,不同毒株之间的中和抗体也可能存在差异。
关键词
登革病毒
非结构蛋白1
中和抗体
微中和试验
Keywords
dengue virus
non-structural 1
neutralizing antibody
micro-neutralizing test
分类号
R446.6 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种高效的酿酒酵母和毕赤酵母电击转化法(英文)
徐志武
张颖
王智学
曹燕
崔亮
李盛
刘秋云
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010
11
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
1型登革病毒初次感染患者血清中和抗体的动态反应分析
胡冬梅
李洁
王大虎
狄飚
丘立文
王压娣
丁细霞
车小燕
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
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