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人小胶质细胞的分离、纯化、特异分子表达与吞噬功能研究
被引量：
8
1
作者
黄秀艳
曾耀英
+1 位作者
张彩
朱斌
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期939-944,共6页
目的:探讨人小胶质细胞(microglia)分离、纯化、培养及鉴定的方法,为深入研究小胶质细胞功能建立一种简便的、稳定的细胞模型。方法:取5个月人工药物引产的胎儿脑组织,将脑组织剪碎、研磨、过滤、离心获取混合胶质细胞悬液,用DMEM/F12...
目的:探讨人小胶质细胞(microglia)分离、纯化、培养及鉴定的方法,为深入研究小胶质细胞功能建立一种简便的、稳定的细胞模型。方法:取5个月人工药物引产的胎儿脑组织,将脑组织剪碎、研磨、过滤、离心获取混合胶质细胞悬液,用DMEM/F12完全培养基调整细胞密度为2×1010cells/L,接种于75cm2培养瓶中(记作first0d);7-10d后,进行第1次纯化。此次纯化采用轻柔摇动法将贴壁不牢的小胶质细胞和少突胶质细胞与底层的星形胶质细胞分离并转入另一培养瓶继续培养扩增(记作second0d);4-5d后,混合的小胶质细胞和少突胶质细胞汇合成片,采用胰酶-EDTA消化法结合差速贴壁法进行第2次纯化。此次纯化将消化得到的细胞悬液离心和重悬,接种于培养瓶(记作0h);2h后,小胶质细胞贴壁生长,少突胶质细胞依然漂浮在培养上清中,此时通过移走上清以去除少突胶质细胞,即得到高纯度的小胶质细胞;运用激光共聚焦显微镜技术、流式细胞术结合细胞表面或胞内免疫荧光抗体染色技术检测所分离的小胶质细胞CD45,CD11b和CD68的阳性率,以计算其纯度;通过吞噬荧光微球评价其吞噬功能;利用胞膜边缘波动(membrane ruffling)现象结合荧光标记的鬼笔环肽染色技术鉴定其活化水平。结果:我们所分离的小胶质细胞中,>98%的细胞表达CD45,CD11b和CD68,并且能够吞噬荧光微球。结论:我们成功地分离和纯化了人小胶质细胞,所得到的小胶质细胞高表达CD45,CD11b和CD68分子,并且具有很强的吞噬功能,为进一步进行其功能和蛋白质组研究奠定基础。
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关键词
小神经胶质细胞
CD68
吞噬作用
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职称材料
HIV感染合并妊娠6例分析
被引量：
1
2
作者
谭华霖
刘奇志
熊振玲
《实用医学杂志》
CAS
2006年第13期1549-1550,共2页
目的:探讨HIV感染孕妇在孕检过程中的管理、分娩方式,新生儿的处理以及医护人员职业暴露的预防问题,为今后同类病例积累经验。方法:自2002年始向所有在我院产检的孕妇推荐HIV抗体检测,对HIV感染孕妇在高危门诊由专人提供咨询和产检并提...
目的:探讨HIV感染孕妇在孕检过程中的管理、分娩方式,新生儿的处理以及医护人员职业暴露的预防问题,为今后同类病例积累经验。方法:自2002年始向所有在我院产检的孕妇推荐HIV抗体检测,对HIV感染孕妇在高危门诊由专人提供咨询和产检并提供转介服务。结果:共发现HIV感染合并妊娠患者6例,其中宫内妊娠4例,宫外孕2例。2例宫内妊娠在孕期接受正规的抗病毒治疗,另外2例在孕36周后来我院产检,剖宫产前予奈韦拉平200mg口服。4例宫内妊娠均行剖宫产术终止妊娠,新生儿均为人工喂养并予奈韦拉平抗病毒治疗。发生职业暴露1例,3个月后查HIV抗体阴性。结论:及早地向孕妇推荐HIV抗体检测很重要,有利于孕期接受正规的抗病毒治疗及职业暴露的预防。选择性剖宫产术及新生儿人工喂养有利于母婴阻断。
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关键词
HIV感染
妊娠
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职称材料
题名
人小胶质细胞的分离、纯化、特异分子表达与吞噬功能研究
被引量：
8
1
作者
黄秀艳
曾耀英
张彩
朱斌
机构
暨南大学组织移植与免疫研究中心
中山大学附属第一
医院
妇
产科
(黄埔院区)
广州市番禺区何贤纪念医院产科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期939-944,共6页
基金
“973”国家重点基础研究资助项目(No.2004CB720100
No.2006CB504201)
广州市科技计划资助项目(No.2006Z1-E0091)
文摘
目的:探讨人小胶质细胞(microglia)分离、纯化、培养及鉴定的方法,为深入研究小胶质细胞功能建立一种简便的、稳定的细胞模型。方法:取5个月人工药物引产的胎儿脑组织,将脑组织剪碎、研磨、过滤、离心获取混合胶质细胞悬液,用DMEM/F12完全培养基调整细胞密度为2×1010cells/L,接种于75cm2培养瓶中(记作first0d);7-10d后,进行第1次纯化。此次纯化采用轻柔摇动法将贴壁不牢的小胶质细胞和少突胶质细胞与底层的星形胶质细胞分离并转入另一培养瓶继续培养扩增(记作second0d);4-5d后,混合的小胶质细胞和少突胶质细胞汇合成片,采用胰酶-EDTA消化法结合差速贴壁法进行第2次纯化。此次纯化将消化得到的细胞悬液离心和重悬,接种于培养瓶(记作0h);2h后,小胶质细胞贴壁生长,少突胶质细胞依然漂浮在培养上清中,此时通过移走上清以去除少突胶质细胞,即得到高纯度的小胶质细胞;运用激光共聚焦显微镜技术、流式细胞术结合细胞表面或胞内免疫荧光抗体染色技术检测所分离的小胶质细胞CD45,CD11b和CD68的阳性率,以计算其纯度;通过吞噬荧光微球评价其吞噬功能;利用胞膜边缘波动(membrane ruffling)现象结合荧光标记的鬼笔环肽染色技术鉴定其活化水平。结果:我们所分离的小胶质细胞中,>98%的细胞表达CD45,CD11b和CD68,并且能够吞噬荧光微球。结论:我们成功地分离和纯化了人小胶质细胞,所得到的小胶质细胞高表达CD45,CD11b和CD68分子,并且具有很强的吞噬功能,为进一步进行其功能和蛋白质组研究奠定基础。
关键词
小神经胶质细胞
CD68
吞噬作用
Keywords
Microglia
CD68
Phagocytosis
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
HIV感染合并妊娠6例分析
被引量：
1
2
作者
谭华霖
刘奇志
熊振玲
机构
广州市
番禺区
何贤
纪念
医院
妇
产科
出处
《实用医学杂志》
CAS
2006年第13期1549-1550,共2页
文摘
目的:探讨HIV感染孕妇在孕检过程中的管理、分娩方式,新生儿的处理以及医护人员职业暴露的预防问题,为今后同类病例积累经验。方法:自2002年始向所有在我院产检的孕妇推荐HIV抗体检测,对HIV感染孕妇在高危门诊由专人提供咨询和产检并提供转介服务。结果:共发现HIV感染合并妊娠患者6例,其中宫内妊娠4例,宫外孕2例。2例宫内妊娠在孕期接受正规的抗病毒治疗,另外2例在孕36周后来我院产检,剖宫产前予奈韦拉平200mg口服。4例宫内妊娠均行剖宫产术终止妊娠,新生儿均为人工喂养并予奈韦拉平抗病毒治疗。发生职业暴露1例,3个月后查HIV抗体阴性。结论:及早地向孕妇推荐HIV抗体检测很重要,有利于孕期接受正规的抗病毒治疗及职业暴露的预防。选择性剖宫产术及新生儿人工喂养有利于母婴阻断。
关键词
HIV感染
妊娠
分类号
R714.2 [医药卫生—妇产科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人小胶质细胞的分离、纯化、特异分子表达与吞噬功能研究
黄秀艳
曾耀英
张彩
朱斌
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
HIV感染合并妊娠6例分析
谭华霖
刘奇志
熊振玲
《实用医学杂志》
CAS
2006
1
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