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全长单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D毕赤酵母表达载体的构建
被引量:
2
1
作者
刘仲荣
曹春来
+2 位作者
杨慧兰
郭勇
王捷
《实用医学杂志》
CAS
2005年第11期1117-1119,共3页
目的:构建单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)糖蛋白D(gD)的毕赤酵母表达载体,为进一步研制重组抗原诊断试剂、研究亚单位疫苗奠定基础。方法:PCR从HSV-2基因组中扩增gD2基因,再用PCR的方法在基因两端加入两个限制性内切酶切位点XhoⅠ和XbaⅠ;PCR...
目的:构建单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)糖蛋白D(gD)的毕赤酵母表达载体,为进一步研制重组抗原诊断试剂、研究亚单位疫苗奠定基础。方法:PCR从HSV-2基因组中扩增gD2基因,再用PCR的方法在基因两端加入两个限制性内切酶切位点XhoⅠ和XbaⅠ;PCR产物经过双酶切后按照正确的读码框顺序克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA中;转化到大肠杆菌感受态细胞TOP10F'中,抗生素得到筛选转化子。结果:核酸序列测定PCR扩增的gD2片段与GeneBank中HSV-2G株gDDNA碱基同源性达98.4%,氨基酸同源性达95.7%。在实验过程中构建了四个表达载体,经过双酶切后琼脂糖电泳鉴定正确。结论:构建了gD2毕赤酵母表达载体四个,其中两个含有HSV-2gB的CTL表位序列。
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关键词
全长单纯疱疹病毒Ⅱ型
糖蛋白D
毕赤酵母
表达载体
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职称材料
题名
全长单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D毕赤酵母表达载体的构建
被引量:
2
1
作者
刘仲荣
曹春来
杨慧兰
郭勇
王捷
机构
广州
军区
广州
总医院皮肤科
广州市华南理工大学生物科学与工程学院
广州
军区
广州
总医院医学实验科
出处
《实用医学杂志》
CAS
2005年第11期1117-1119,共3页
基金
2003年国家自然科学基金资助项目(编号:30371290)
文摘
目的:构建单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)糖蛋白D(gD)的毕赤酵母表达载体,为进一步研制重组抗原诊断试剂、研究亚单位疫苗奠定基础。方法:PCR从HSV-2基因组中扩增gD2基因,再用PCR的方法在基因两端加入两个限制性内切酶切位点XhoⅠ和XbaⅠ;PCR产物经过双酶切后按照正确的读码框顺序克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA中;转化到大肠杆菌感受态细胞TOP10F'中,抗生素得到筛选转化子。结果:核酸序列测定PCR扩增的gD2片段与GeneBank中HSV-2G株gDDNA碱基同源性达98.4%,氨基酸同源性达95.7%。在实验过程中构建了四个表达载体,经过双酶切后琼脂糖电泳鉴定正确。结论:构建了gD2毕赤酵母表达载体四个,其中两个含有HSV-2gB的CTL表位序列。
关键词
全长单纯疱疹病毒Ⅱ型
糖蛋白D
毕赤酵母
表达载体
Keywords
Herpesvirus 2, human Glycoproteins Pichia
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
全长单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白D毕赤酵母表达载体的构建
刘仲荣
曹春来
杨慧兰
郭勇
王捷
《实用医学杂志》
CAS
2005
2
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