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DHPLC-mtDNA控制区多态性分析系统的建立
1
作者
孙宏钰
蔡贵庆
+4 位作者
陆惠玲
刘超
陈丽娴
李向阳
伍新尧
《法医学杂志》
CAS
CSCD
2005年第4期265-270,共6页
目的基于变性高效液相色谱技术,建立一种不需测序和杂交的新的mtDNA控制区多态性分析系统。方法mtDNA控制区序列(包括HVⅠ,HVⅡ和HVⅢ)被分为4个扩增片段,采用配对分析突变检测模式进行DHPLC分析。对DHPLC检测条件(包括柱温和洗脱梯度等...
目的基于变性高效液相色谱技术,建立一种不需测序和杂交的新的mtDNA控制区多态性分析系统。方法mtDNA控制区序列(包括HVⅠ,HVⅡ和HVⅢ)被分为4个扩增片段,采用配对分析突变检测模式进行DHPLC分析。对DHPLC检测条件(包括柱温和洗脱梯度等)进行优化。对100个不同类型差异序列的组合配对以检验该方法的检测效力。结果10组序列相同的样本配对DHPLC图谱均只显示1个样品峰。对序列相差1个碱基～7个碱基、插入(/缺失)1个碱基、插入(/缺失)2个碱基等类型的90个扩增片段组合,用DHPLC进行分析,均得到≥2个样本峰的DHPLC图谱,序列差异检出率达100%。该技术可检测的异质性DNA成分的最小百分含量为10%。结论DHPLC-mtDNA控制区多态性分析系统快速、经济和实用,在检测mtDNA异质性方面较直接测序更灵敏。
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关键词
线粒体DNA(mtDNA)
变性高效液相色谱(DHPLC)
多态性
异质性
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职称材料
题名
DHPLC-mtDNA控制区多态性分析系统的建立
1
作者
孙宏钰
蔡贵庆
陆惠玲
刘超
陈丽娴
李向阳
伍新尧
机构
中山大学基础医学院法医学系
广州市
刑事科学技术研究所
广州市公安局东山区分局
出处
《法医学杂志》
CAS
CSCD
2005年第4期265-270,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(30400519)
文摘
目的基于变性高效液相色谱技术,建立一种不需测序和杂交的新的mtDNA控制区多态性分析系统。方法mtDNA控制区序列(包括HVⅠ,HVⅡ和HVⅢ)被分为4个扩增片段,采用配对分析突变检测模式进行DHPLC分析。对DHPLC检测条件(包括柱温和洗脱梯度等)进行优化。对100个不同类型差异序列的组合配对以检验该方法的检测效力。结果10组序列相同的样本配对DHPLC图谱均只显示1个样品峰。对序列相差1个碱基～7个碱基、插入(/缺失)1个碱基、插入(/缺失)2个碱基等类型的90个扩增片段组合,用DHPLC进行分析,均得到≥2个样本峰的DHPLC图谱,序列差异检出率达100%。该技术可检测的异质性DNA成分的最小百分含量为10%。结论DHPLC-mtDNA控制区多态性分析系统快速、经济和实用,在检测mtDNA异质性方面较直接测序更灵敏。
关键词
线粒体DNA(mtDNA)
变性高效液相色谱(DHPLC)
多态性
异质性
Keywords
mitochondrial DNA （mtDNA）
denaturing high performance liquid chromatography （DHPLC）
polymorphism
heteroplasmy
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
R197.323 [医药卫生—卫生事业管理]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
DHPLC-mtDNA控制区多态性分析系统的建立
孙宏钰
蔡贵庆
陆惠玲
刘超
陈丽娴
李向阳
伍新尧
《法医学杂志》
CAS
CSCD
2005
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