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奶牛冻精跨省调运至无疫区的疫病风险防控——华美牧场跨省引进国产奶牛冻精至从化无疫区的经验与思考
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作者 朱恒乾 刘辉放 +5 位作者 谢海波 陈忠 钟江国 李猛威 李青云 罗国静 《中国乳业》 2017年第10期54-56,共3页
2009年广州亚运无规定马属动物疫病区通过评估正式建立。按照无疫区的管理规定,国产奶牛冻精跨省调入无疫区域需进行相应的行政审批和检疫,不但要检测国家检疫规定的疫病,而且还需要对马属动物易感疫病——水泡性口炎和伊氏锥虫病进行... 2009年广州亚运无规定马属动物疫病区通过评估正式建立。按照无疫区的管理规定,国产奶牛冻精跨省调入无疫区域需进行相应的行政审批和检疫,不但要检测国家检疫规定的疫病,而且还需要对马属动物易感疫病——水泡性口炎和伊氏锥虫病进行检测。华美牧场地处无疫病辖区内,在申报办理奶牛冻精跨省调运手续过程中认识到提高牧场自身疫病风险防控能力的重要性,并总结出一定的经验。 展开更多
关键词 跨省调运 无规定马属动物疫病区 奶牛 冻精 疫病风险防控
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MLKL基因敲除对猪伪狂犬病病毒复制的影响 被引量:1
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作者 谢思豪 勾红潮 +4 位作者 卞志标 李斌 蔡汝健 臧莹安 李春玲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第5期1934-1941,共8页
【目的】构建混合谱系激酶结构域样(mixed lineage kinase domain-like,MLKL)基因敲除的PK-15细胞株(PK-15 MLKL-KO),研究敲除MLKL基因对猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)复制的影响。【方法】根据MLKL序列设计特异性编辑位点,利... 【目的】构建混合谱系激酶结构域样(mixed lineage kinase domain-like,MLKL)基因敲除的PK-15细胞株(PK-15 MLKL-KO),研究敲除MLKL基因对猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)复制的影响。【方法】根据MLKL序列设计特异性编辑位点,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建MLKL-sgRNA编辑载体,转染至PK-15细胞,经嘌呤霉素药物筛选获得多克隆细胞系,通过有限稀释法获得PK-15 MLKL-KO单克隆细胞株。通过靶基因组PCR、测序和Western blotting验证MLKL基因在PK-15细胞上的敲除水平;采用Reed-Muench法检测病毒增殖水平;采用PI染色和荧光显微镜观察细胞坏死情况。【结果】试验成功构建MLKL-sgRNA载体,筛选出1株MLKL基因缺失647 bp的PK-15细胞株,Western blotting未检测到MLKL蛋白的表达。与PK-15细胞相比,PK-15 MLKL-KO细胞极显著或显著提高了PRV GD-WH(感染后36 h除外)和PRV Bartha-K61的病毒滴度(P<0.01;P<0.05)。PRV GD-WH和PRV Bartha-K61感染PK-15 MLKL-KO细胞后,坏死细胞明显减少。【结论】本研究构建了MLKL基因敲除的PK-15细胞株,与PK-15细胞相比,PK-15 MLKL-KO细胞显著提高了PRV GD-WH和PRV Bartha-K61的复制和存活能力,为PRV Bartha-K61疫苗生产过程中提高病毒产量提供了一种可行性策略。 展开更多
关键词 MLKL基因 CRISPR/Cas9基因编辑技术 敲除 PK-15细胞 猪伪狂犬病病毒(PRV)
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广东省首个国家级奶牛布鲁氏菌病、结核病净化场的创建 被引量:7
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作者 朱建翠 王武生 +7 位作者 沈丹 何日文 黄恒新 李斌 陈裕华 杨建宇 邹梦佳 彭婷 《中国动物检疫》 CAS 2023年第4期50-54,共5页
为推进奶牛布鲁氏菌病、结核病(简称“两病”)净化工作,保障奶牛养殖业持续健康发展和乳制品质量安全,广州市动物卫生监督所在开展本底调查的基础上,成立净化工作小组,指导广州华美牛奶有限公司(简称公司)积极开展奶牛“两病”检疫净化... 为推进奶牛布鲁氏菌病、结核病(简称“两病”)净化工作,保障奶牛养殖业持续健康发展和乳制品质量安全,广州市动物卫生监督所在开展本底调查的基础上,成立净化工作小组,指导广州华美牛奶有限公司(简称公司)积极开展奶牛“两病”检疫净化,包括加强宣传培训与指导,制定维持无疫的防控策略、技术路线、总体方案和技术规程,督促公司在全面检测、严格引种、牛群建设、防疫管理、监督检查、生产管理、卫生环保等方面严格落实各项管理措施,有效确保了该公司连续6年维持“两病”无疫状态,从而使公司顺利建成广东省国家级首个牛布鲁氏菌病、结核病净化场。本文总结了创建过程和维持无疫的经验做法,以期为奶牛养殖企业开展疫病净化提供参考。 展开更多
关键词 牛布鲁氏菌病 牛结核病 “两病”检疫 疫病净化
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西马特罗单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究 被引量:4
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作者 吴小胜 臧勇军 +4 位作者 李斌 贾芳芳 万宇平 马玉华 何方洋 《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第9期169-173,共5页
通过制备西马特罗半抗原,载体蛋白与之偶联合成免疫原,免疫原用于免疫动物,获得抗西马特罗单克隆抗体,制备能够检测猪尿中西马特罗残留量的酶联免疫试剂盒。结果表明,该试剂盒对猪尿中西马特罗的检测限为0.295μg/L,半抑制浓度(IC50)值... 通过制备西马特罗半抗原,载体蛋白与之偶联合成免疫原,免疫原用于免疫动物,获得抗西马特罗单克隆抗体,制备能够检测猪尿中西马特罗残留量的酶联免疫试剂盒。结果表明,该试剂盒对猪尿中西马特罗的检测限为0.295μg/L,半抑制浓度(IC50)值为0.870μg/L,回收率范围为81.5%~103.5%,标准曲线线性范围为0.1~8.1μg/L,精密度试验结果批内、批间的相对标准偏差(RSD)均<15%,表明该检测方法准确度和精密度高。该试剂盒特异性较好,于4℃条件下能够保存12个月,稳定性较好,可以用于猪尿中西马特罗德快速检测。 展开更多
关键词 西马特罗 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定 试剂盒
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华美牧场冬夏奶比例情况分析及调整措施
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作者 刘辉放 朱恒乾 +2 位作者 李青云 李猛威 李斌 《中国乳业》 2018年第2期45-48,共4页
华美牧场近10年来坚持采用调整育成牛参配数量、月龄的方法来增加奶牛的夏季产犊数量,促进夏季产奶量的增加,同时不断地提升生产管理水平,对防暑降温设施进行升级改造,提高奶牛舒适度,从而保障夏季生产顺利进行,促进冬夏奶比例趋于平衡。
关键词 冬夏奶比例 奶牛 繁殖调控
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