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浅析基层畜牧兽医动物防疫工作的现状及改进措施 被引量:10
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作者 冯卫玲 《山西农经》 2019年第8期121-121,共1页
动物疫病直接影响人们的健康。随着社会的发展,政府对基层畜牧兽医动物防疫工作越来越重视。从基层畜牧兽医动物防疫工作的具体情况入手,对目前存在的问题进行探讨,提出一些优化的措施。
关键词 基层畜牧兽医 动物防疫 建议
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MLKL基因敲除对猪伪狂犬病病毒复制的影响 被引量:1
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作者 谢思豪 勾红潮 +4 位作者 卞志标 李斌 蔡汝健 臧莹安 李春玲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第5期1934-1941,共8页
【目的】构建混合谱系激酶结构域样(mixed lineage kinase domain-like,MLKL)基因敲除的PK-15细胞株(PK-15 MLKL-KO),研究敲除MLKL基因对猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)复制的影响。【方法】根据MLKL序列设计特异性编辑位点,利... 【目的】构建混合谱系激酶结构域样(mixed lineage kinase domain-like,MLKL)基因敲除的PK-15细胞株(PK-15 MLKL-KO),研究敲除MLKL基因对猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)复制的影响。【方法】根据MLKL序列设计特异性编辑位点,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建MLKL-sgRNA编辑载体,转染至PK-15细胞,经嘌呤霉素药物筛选获得多克隆细胞系,通过有限稀释法获得PK-15 MLKL-KO单克隆细胞株。通过靶基因组PCR、测序和Western blotting验证MLKL基因在PK-15细胞上的敲除水平;采用Reed-Muench法检测病毒增殖水平;采用PI染色和荧光显微镜观察细胞坏死情况。【结果】试验成功构建MLKL-sgRNA载体,筛选出1株MLKL基因缺失647 bp的PK-15细胞株,Western blotting未检测到MLKL蛋白的表达。与PK-15细胞相比,PK-15 MLKL-KO细胞极显著或显著提高了PRV GD-WH(感染后36 h除外)和PRV Bartha-K61的病毒滴度(P<0.01;P<0.05)。PRV GD-WH和PRV Bartha-K61感染PK-15 MLKL-KO细胞后,坏死细胞明显减少。【结论】本研究构建了MLKL基因敲除的PK-15细胞株,与PK-15细胞相比,PK-15 MLKL-KO细胞显著提高了PRV GD-WH和PRV Bartha-K61的复制和存活能力,为PRV Bartha-K61疫苗生产过程中提高病毒产量提供了一种可行性策略。 展开更多
关键词 MLKL基因 CRISPR/Cas9基因编辑技术 敲除 PK-15细胞 猪伪狂犬病病毒(PRV)
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西马特罗单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究 被引量:4
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作者 吴小胜 臧勇军 +4 位作者 李斌 贾芳芳 万宇平 马玉华 何方洋 《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第9期169-173,共5页
通过制备西马特罗半抗原,载体蛋白与之偶联合成免疫原,免疫原用于免疫动物,获得抗西马特罗单克隆抗体,制备能够检测猪尿中西马特罗残留量的酶联免疫试剂盒。结果表明,该试剂盒对猪尿中西马特罗的检测限为0.295μg/L,半抑制浓度(IC50)值... 通过制备西马特罗半抗原,载体蛋白与之偶联合成免疫原,免疫原用于免疫动物,获得抗西马特罗单克隆抗体,制备能够检测猪尿中西马特罗残留量的酶联免疫试剂盒。结果表明,该试剂盒对猪尿中西马特罗的检测限为0.295μg/L,半抑制浓度(IC50)值为0.870μg/L,回收率范围为81.5%~103.5%,标准曲线线性范围为0.1~8.1μg/L,精密度试验结果批内、批间的相对标准偏差(RSD)均<15%,表明该检测方法准确度和精密度高。该试剂盒特异性较好,于4℃条件下能够保存12个月,稳定性较好,可以用于猪尿中西马特罗德快速检测。 展开更多
关键词 西马特罗 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定 试剂盒
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广东省首个国家级奶牛布鲁氏菌病、结核病净化场的创建 被引量:4
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作者 朱建翠 王武生 +7 位作者 沈丹 何日文 黄恒新 李斌 陈裕华 杨建宇 邹梦佳 彭婷 《中国动物检疫》 CAS 2023年第4期50-54,共5页
为推进奶牛布鲁氏菌病、结核病(简称“两病”)净化工作,保障奶牛养殖业持续健康发展和乳制品质量安全,广州市动物卫生监督所在开展本底调查的基础上,成立净化工作小组,指导广州华美牛奶有限公司(简称公司)积极开展奶牛“两病”检疫净化... 为推进奶牛布鲁氏菌病、结核病(简称“两病”)净化工作,保障奶牛养殖业持续健康发展和乳制品质量安全,广州市动物卫生监督所在开展本底调查的基础上,成立净化工作小组,指导广州华美牛奶有限公司(简称公司)积极开展奶牛“两病”检疫净化,包括加强宣传培训与指导,制定维持无疫的防控策略、技术路线、总体方案和技术规程,督促公司在全面检测、严格引种、牛群建设、防疫管理、监督检查、生产管理、卫生环保等方面严格落实各项管理措施,有效确保了该公司连续6年维持“两病”无疫状态,从而使公司顺利建成广东省国家级首个牛布鲁氏菌病、结核病净化场。本文总结了创建过程和维持无疫的经验做法,以期为奶牛养殖企业开展疫病净化提供参考。 展开更多
关键词 牛布鲁氏菌病 牛结核病 “两病”检疫 疫病净化
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