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牛磺胆酸钠依赖于胞外钙离子而非活性氧途径激活小鼠胰腺腺泡细胞氯通道
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作者 阳小雅 林嘉伟 +3 位作者 叶东 赵婵 王立伟 陈丽新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1806-1814,共9页
目的:探讨牛磺胆酸钠对小鼠胰腺腺泡细胞氯通道的激活作用及途径。方法:胶原蛋白酶消化分离FVB/N小鼠胰腺腺泡细胞,采用膜片钳技术记录牛磺胆酸钠激活的全细胞电流;去除电极内液配方中的三磷酸腺苷(ATP),观察其胞内ATP依赖性;阴离子置... 目的:探讨牛磺胆酸钠对小鼠胰腺腺泡细胞氯通道的激活作用及途径。方法:胶原蛋白酶消化分离FVB/N小鼠胰腺腺泡细胞,采用膜片钳技术记录牛磺胆酸钠激活的全细胞电流;去除电极内液配方中的三磷酸腺苷(ATP),观察其胞内ATP依赖性;阴离子置换实验分析其阴离子选择性;利用氯通道阻断剂检测其药理学特性;采用47%高渗灌流液观察其容积敏感性;清除胞外等渗灌流液中的Ca^(2+)分析通道激活对胞外Ca^(2+)的依赖性;使用透膜荧光探针2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐检测胞内活性氧(ROS)水平。结果:5 mmol/L牛磺胆酸钠可激活小鼠胰腺腺泡细胞产生电流,该电流呈外向整流优势,对细胞内液的ATP具有依赖性,其阴离子通透性顺序为:I->Br^(−)≥Cl^(−)>gluconate-(P<0.01);该电流能被氯通道阻断剂4,4'-二异硫氰酸十八烯-2,2'-二磺酸二钠盐水合物(DIDS)和tamoxifen抑制,且可被细胞外47%高渗刺激阻抑(P<0.01)。N-乙酰-L-半胱氨酸清除细胞内ROS不能阻断牛磺胆酸钠诱导胰腺腺泡细胞产生氯电流;氯通道阻断剂DIDS不影响牛磺胆酸钠诱导的ROS生成。清除细胞外Ca^(2+)后,牛磺胆酸钠未能诱导胰腺腺泡细胞产生氯电流。结论:牛磺胆酸钠可激活小鼠胰腺腺泡细胞氯通道,该通道的激活对胞外Ca^(2+)具有依赖性,但不依赖于ROS途径。 展开更多
关键词 牛磺胆酸钠 胰腺腺泡细胞 氯离子通道 钙离子 活性氧
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小鼠甲状腺原代细胞的快速培养和鉴定
2
作者 谭秋婵 林嘉伟 +5 位作者 阳小雅 潘丽 姚丹丹 王立伟 陈丽新 巫株华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期572-576,共5页
目的:探索一种快速且简便易行的小鼠原代甲状腺细胞的培养方法。方法:通过酶消化法分离小鼠甲状腺细胞,并用改良的培养液对其进行培养,观察14 d内细胞的形态、特征以及分泌功能。结果:甲状腺组织经25 min消化即可获得活性较好的原代细胞... 目的:探索一种快速且简便易行的小鼠原代甲状腺细胞的培养方法。方法:通过酶消化法分离小鼠甲状腺细胞,并用改良的培养液对其进行培养,观察14 d内细胞的形态、特征以及分泌功能。结果:甲状腺组织经25 min消化即可获得活性较好的原代细胞;细胞第2天贴壁生长;第5~7天可出现次级滤泡结构;95%以上细胞胞质内可检测到甲状腺球蛋白;7 d内,总三碘甲状腺原氨酸和总甲状腺素分泌量均能保持60%以上;特异性基因的表达在10 d内仍能达到50%以上。结论:应用该方法可快速培养小鼠甲状腺原代细胞,细胞在7 d内可用于甲状腺内分泌相关的研究,在10 d内可用于基因的研究。 展开更多
关键词 甲状腺 内分泌 原代培养 小鼠
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MSMEG_6171在耻垢分枝杆菌中的表达及多组学关联分析
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作者 谭秋婵 魏文静 +3 位作者 陈珣珣 张晨晨 赵雨川 巫株华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期982-987,共6页
目的筛选MSMEG_6171在耻垢分枝杆菌中的可能调控通路或基因,并进行验证。方法构建MSMEG_6171基因过表达的耻垢分枝杆菌株和空载质粒对照菌株;对其转录组和蛋白质组进行验证并深入挖掘MSMEG_6171过表达调控的下游信号网络;qRT-PCR验证差... 目的筛选MSMEG_6171在耻垢分枝杆菌中的可能调控通路或基因,并进行验证。方法构建MSMEG_6171基因过表达的耻垢分枝杆菌株和空载质粒对照菌株;对其转录组和蛋白质组进行验证并深入挖掘MSMEG_6171过表达调控的下游信号网络;qRT-PCR验证差异表达基因。结果成功构建了MSMGE_6171过表达的耻垢分枝杆菌菌株(Msm::6171);转录组和蛋白质组数据的对比分析发现有38个基因在转录水平和蛋白表达水平显著上调,有31个基因表达水平显著下调;差异表达基因主要参与甘油酯代谢,核糖体和代谢通路;15个候选基因实时荧光定量PCR验证结果与转录组和蛋白质组测序分析趋势一致。结论MSMGE_6171调控了多个靶向基因,参与代谢和核糖体通路,为深入研究MSMGE_6171的调控网络提供了新的认识和重要参考。 展开更多
关键词 耻垢分枝杆菌 MSMEG_6171 多组学 调控网络
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