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重组腺相关病毒介导癌胚抗原基因转染树突细胞的抗肿瘤作用研究
被引量：
2
1
作者
石敏
罗荣城
+2 位作者
郑大勇
Liu Yong
P. L Hermonat
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期1274-1277,共4页
目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导癌胚抗原(CEA)基因转染DC对结直肠癌的治疗作用。方法构建rAAV/CEA质粒,制备病毒。采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)来源的DC前体细胞,经rAAV/CEA转染DC后,采用PCR、Southern blot、流式...
目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导癌胚抗原(CEA)基因转染DC对结直肠癌的治疗作用。方法构建rAAV/CEA质粒,制备病毒。采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)来源的DC前体细胞,经rAAV/CEA转染DC后,采用PCR、Southern blot、流式细胞仪测定DC中CEA的表达,并检测rAAV/CEA的染色体整合情况及转染效率。加入GM-CSF、IL-4和TNF-α诱导DC前体细胞至成熟DC。将成熟DC和T淋巴细胞混合,加入IL-2和IL-7培养,获得细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。采用体外51铬(51Cr)释放实验测定CTL对恶性肿瘤细胞的杀伤作用,3H掺入法检测rAAV/CEA转染DC对被激活T淋巴细胞增殖能力的影响。结果rAAV成功介导了CEA基因转染DC,且在DC内高表达,超过90%的DC前体细胞表达CEA蛋白,且rAAV/CEA病毒基因成功地整合入DC基因组内。rAAV/CEA转染的DC可以诱导特异性CTL,有效地识别并杀伤CEA阳性的结直肠癌细胞株LoVo,并且具有MHCⅠ类限制性,而对CEA阴性的肿瘤细胞无杀伤作用。结论以rAAV/CEA转染DC疫苗能够诱导抗肿瘤活性,为以人CEA作为靶抗原的结直肠癌的基因治疗奠定了基础。
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关键词
树突细胞
癌胚抗原
腺相关病毒
结直肠肿瘤
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职称材料
重组人血管内皮抑素诱导大鼠心肌细胞凋亡的体内实验研究
被引量：
3
2
作者
覃晶
钱新宇
+2 位作者
陆慧琦
韩焕兴
罗荣城
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期5-10,共6页
目的探讨重组人血管内皮抑素(rh-ES)对大鼠心肌的毒性作用及其可能机制。方法 24只成年雌性Wistar大鼠随机分为rh-ES低、中、高剂量组[分别予3、6、12mg/(kg·d)rh-ES腹腔注射]及对照组(腹腔注射等体积生理盐水),每组6只。各组在第...
目的探讨重组人血管内皮抑素(rh-ES)对大鼠心肌的毒性作用及其可能机制。方法 24只成年雌性Wistar大鼠随机分为rh-ES低、中、高剂量组[分别予3、6、12mg/(kg·d)rh-ES腹腔注射]及对照组(腹腔注射等体积生理盐水),每组6只。各组在第4周和第8周末次给药后采用脊椎脱臼法分别处死3只大鼠,在光镜及电镜下观察病理形态学及超微结构改变,TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡情况,CD34标记内皮细胞免疫组化法检测大鼠心肌组织的微血管密度(MVD)改变。结果光镜及电镜下对照组和低、中剂量组无明显心肌损伤的病理形态及超微结构改变。高剂量组光镜下可见心肌损伤的病理形态及超微结构改变。TUNEL法检测显示,给药8周后中剂量组和高剂量组凋亡指数明显高于对照组,差异有统计学意义(P=0.033、P=0.000),其中高剂量组凋亡指数最高。心肌组织微血管计数提示,给药4周及8周后高剂量组(MVD)增加,显著高于对照组(P<0.05)。结论 rh-ES对大鼠心肌细胞具有毒性作用,细胞凋亡机制参与了心肌损伤的病理过程。
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关键词
血管内皮抑素
心脏毒性
细胞凋亡
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职称材料
题名
重组腺相关病毒介导癌胚抗原基因转染树突细胞的抗肿瘤作用研究
被引量：
2
1
作者
石敏
罗荣城
郑大勇
Liu Yong
P. L Hermonat
机构
广州南方医科大学南方医院肿瘤科
美国阿肯色
大学
医学院基因治疗中心
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期1274-1277,共4页
文摘
目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导癌胚抗原(CEA)基因转染DC对结直肠癌的治疗作用。方法构建rAAV/CEA质粒,制备病毒。采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)来源的DC前体细胞,经rAAV/CEA转染DC后,采用PCR、Southern blot、流式细胞仪测定DC中CEA的表达,并检测rAAV/CEA的染色体整合情况及转染效率。加入GM-CSF、IL-4和TNF-α诱导DC前体细胞至成熟DC。将成熟DC和T淋巴细胞混合,加入IL-2和IL-7培养,获得细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。采用体外51铬(51Cr)释放实验测定CTL对恶性肿瘤细胞的杀伤作用,3H掺入法检测rAAV/CEA转染DC对被激活T淋巴细胞增殖能力的影响。结果rAAV成功介导了CEA基因转染DC,且在DC内高表达,超过90%的DC前体细胞表达CEA蛋白,且rAAV/CEA病毒基因成功地整合入DC基因组内。rAAV/CEA转染的DC可以诱导特异性CTL,有效地识别并杀伤CEA阳性的结直肠癌细胞株LoVo,并且具有MHCⅠ类限制性,而对CEA阴性的肿瘤细胞无杀伤作用。结论以rAAV/CEA转染DC疫苗能够诱导抗肿瘤活性,为以人CEA作为靶抗原的结直肠癌的基因治疗奠定了基础。
关键词
树突细胞
癌胚抗原
腺相关病毒
结直肠肿瘤
Keywords
dendritic cells,carcinoembryonic antigen,adeno-associated virus,colorectal neoplasms
分类号
R730.51 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
重组人血管内皮抑素诱导大鼠心肌细胞凋亡的体内实验研究
被引量：
3
2
作者
覃晶
钱新宇
陆慧琦
韩焕兴
罗荣城
机构
浙江省
肿瘤
医院
化疗科
杭州市第一人民
医院
肿瘤
内科
第二军医
大学
长征
医院
实验诊断科
广州南方医科大学南方医院肿瘤科
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期5-10,共6页
基金
国家自然科学基金(81202806)~~
文摘
目的探讨重组人血管内皮抑素(rh-ES)对大鼠心肌的毒性作用及其可能机制。方法 24只成年雌性Wistar大鼠随机分为rh-ES低、中、高剂量组[分别予3、6、12mg/(kg·d)rh-ES腹腔注射]及对照组(腹腔注射等体积生理盐水),每组6只。各组在第4周和第8周末次给药后采用脊椎脱臼法分别处死3只大鼠,在光镜及电镜下观察病理形态学及超微结构改变,TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡情况,CD34标记内皮细胞免疫组化法检测大鼠心肌组织的微血管密度(MVD)改变。结果光镜及电镜下对照组和低、中剂量组无明显心肌损伤的病理形态及超微结构改变。高剂量组光镜下可见心肌损伤的病理形态及超微结构改变。TUNEL法检测显示,给药8周后中剂量组和高剂量组凋亡指数明显高于对照组,差异有统计学意义(P=0.033、P=0.000),其中高剂量组凋亡指数最高。心肌组织微血管计数提示,给药4周及8周后高剂量组(MVD)增加,显著高于对照组(P<0.05)。结论 rh-ES对大鼠心肌细胞具有毒性作用,细胞凋亡机制参与了心肌损伤的病理过程。
关键词
血管内皮抑素
心脏毒性
细胞凋亡
Keywords
endostatin
cardiotoxicity
apoptosis
分类号
R73-36 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组腺相关病毒介导癌胚抗原基因转染树突细胞的抗肿瘤作用研究
石敏
罗荣城
郑大勇
Liu Yong
P. L Hermonat
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
重组人血管内皮抑素诱导大鼠心肌细胞凋亡的体内实验研究
覃晶
钱新宇
陆慧琦
韩焕兴
罗荣城
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
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