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LncRNA CCAT1通过调控MYC蛋白的表达激活MAPK信号通路影响胃癌细胞的生物学行为 被引量:18
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作者 余南荣 曾祥 +1 位作者 徐厚巍 蓝俊松 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1298-1303,共6页
目的:探讨lncRNA CCAT1通过调控瘤细胞病毒癌基因(MYC)蛋白的表达激活MAPK信号通路影响胃癌细胞的生物学行为及机制。方法:q PCR检测lncRNA CCAT1在胃癌组织和不同胃癌细胞株中的表达情况;q PCR检测MYC在胃癌组织中的表达和lncRNA CCAT... 目的:探讨lncRNA CCAT1通过调控瘤细胞病毒癌基因(MYC)蛋白的表达激活MAPK信号通路影响胃癌细胞的生物学行为及机制。方法:q PCR检测lncRNA CCAT1在胃癌组织和不同胃癌细胞株中的表达情况;q PCR检测MYC在胃癌组织中的表达和lncRNA CCAT1的关系,双荧光素酶报告基因检测lncRNA CCAT1和MYC之间的相互作用;流式细胞术实验检测lncRNA CCAT1对胃癌细胞的凋亡行为和细胞周期的影响;划痕愈合试验和Transwell侵袭实验检测lncRNA CCAT1对胃癌细胞的迁移和侵袭行为的变化情况;Western blot实验检测lncRNA CCAT1对MAPK通路相关蛋白表达情况的影响。结果:与正常胃组织相比,胃癌组织中lncRNA CCAT1的表达水平相对上调,与其他细胞株相比,HCG-27细胞中lncRNA CCAT1表达最高;MYC表达与相对lncRNA CCAT1的表达呈负相关关系;双荧光素酶实验证实lncRNA CCAT1能与MYC的3'UTR特异性结合,可以调控MYC的表达与活性;抑制lncRNA CCAT1的表达可以诱导G0/G1期的细胞周期停滞并促进细胞凋亡;抑制lncRNA CCAT1的表达后可以抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力;抑制lncRNA CCAT1后下游MAPK通路蛋白表达水平相应下调。结论:LncRNA CCAT1通过调控MYC蛋白表达激活MAPK信号通路影响胃癌细胞的生物学行为。 展开更多
关键词 LncRNA CCAT1 胃癌 瘤细胞病毒基因 MAPK
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MiR-107靶向Notch2促进胃癌细胞迁移和侵袭 被引量:5
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作者 余南荣 曾祥 +1 位作者 徐厚巍 蓝俊松 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1142-1148,共7页
目的检测微小RNA-107(miR-107)在胃癌细胞中的表达,探讨其调控胃癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法采用Real-time PCR检测miR-107和Notch2在人胃癌细胞MKN45和人胃黏膜上皮细胞GES-1中的表达。转染miR-107 inhibitors至MKN45细胞,采用Tr... 目的检测微小RNA-107(miR-107)在胃癌细胞中的表达,探讨其调控胃癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法采用Real-time PCR检测miR-107和Notch2在人胃癌细胞MKN45和人胃黏膜上皮细胞GES-1中的表达。转染miR-107 inhibitors至MKN45细胞,采用Transwell法检测MKN45细胞迁移和侵袭。转染Notch2过表达载体至MKN45细胞,采用Transwell、Real-time PCR、Weatern blot分别检测细胞迁移、侵袭和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达。Targetscan在线预测和双荧光素酶报告基因实验验证miR-107和Notch2的靶向关系。Transwell实验检测抑制miR-107并沉默Notch2后MKN45细胞迁移和侵袭。结果与GES-1细胞比较,MKN45细胞中miR-107表达上调(P<0.01),而Notch2表达下调(P<0.01)。抑制miR-107或过表达Notch2,则MKN45细胞迁移和侵袭数减少(P<0.01),过表达Notch2能促进MMP-9 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。Targetscan在线预测和双荧光素酶报告基因实验结果表明:Notch2是miR-107的潜在靶基因,抑制miR-107可促进Notch2表达(P<0.01)。在MKN45细胞中沉默Notch2,可逆转miR-107抑制剂对细胞迁移和侵袭的抑制作用。结论 miR-107在胃癌细胞中表达上调,可通过靶向Notch2促进MMP-9表达,促进胃癌细胞迁移和侵袭。 展开更多
关键词 miR-107 NOTCH2 胃癌 细胞迁移 肿瘤侵袭
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血浆Spetin9甲基化对结直肠癌的诊断和治疗监测作用 被引量:7
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作者 余南荣 黄志良 +4 位作者 吴成杰 鲁伟群 杨国华 徐厚巍 刘海鹰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第17期2916-2920,共5页
目的研究血浆Septin9甲基化对结直肠癌诊断和治疗监测的作用。方法收集入组结直肠癌病例和健康对照人群的血液样本进行血浆Septin9甲基化和血清癌胚抗原(CEA)检测,分析血浆Septin9甲基化与血清CEA对结直肠癌的诊断阳性率、治疗前后的动... 目的研究血浆Septin9甲基化对结直肠癌诊断和治疗监测的作用。方法收集入组结直肠癌病例和健康对照人群的血液样本进行血浆Septin9甲基化和血清癌胚抗原(CEA)检测,分析血浆Septin9甲基化与血清CEA对结直肠癌的诊断阳性率、治疗前后的动态变化以及两者与病例的临床病理因素之间的相关性。结果共收集35例结直肠癌病例和30例健康人群血液样本进行检测和分析。结直肠癌患者中血浆Septin9甲基化阳性率为74.3%,显著高于正常健康人群(P <0.001);经过手术切除或化疗后,血浆Septin9甲基化转阴率分别为75.0%、16.7%,两者比较差异有统计学意义(P=0.010);血浆Septin9甲基化与患者性别、年龄、肿瘤部位及TNM分期等临床因素无相关性(均P> 0.05)。血浆Septin9甲基化与CEA联合检测的阳性率为82.9%,明显高于单独检测血清CEA水平(P=0.034)。结论血浆Septin9甲基化可作为结直肠癌的诊断和监测的潜在指标,联合检测Septin9甲基化和血清CEA水平可显著提高结直肠癌的诊断阳性率。 展开更多
关键词 结直肠癌 血浆Septin9甲基化 癌胚抗原 诊断 复发
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ANXA2-siRNA转染对胃癌耐药细胞药物敏感性的影响及机制 被引量:3
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作者 余南荣 曾祥 +1 位作者 徐厚巍 蓝俊松 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第11期1711-1715,共5页
目的研究ANXA2-siRNA转染对胃癌耐药细胞药物敏感性及信号通路激活的影响。方法采用ANXA2-siRNA转染SGC-7901/DDP胃癌耐药细胞,通过RT-PCR和Western blot检测胃癌耐药细胞中耐药相关基因GST以及Bax的表达变化,应用MTT药敏实验检测胃癌... 目的研究ANXA2-siRNA转染对胃癌耐药细胞药物敏感性及信号通路激活的影响。方法采用ANXA2-siRNA转染SGC-7901/DDP胃癌耐药细胞,通过RT-PCR和Western blot检测胃癌耐药细胞中耐药相关基因GST以及Bax的表达变化,应用MTT药敏实验检测胃癌耐药细胞对化疗药物敏感性的变化。采用Western blot检测ANXA2-siRNA转染SGC-7901/DDP胃癌耐药细胞后,MAPK及PI3K/Akt信号通路激活中P38、P38磷酸化水平、AKT以及AKT磷酸化水平的变化情况。结果 ANXA2-siRNA转染SGC7901/DDP细胞后,无论在RNA水平还是蛋白水平上,耐药相关基因GST的表达水平显著降低,而Bax的表达水平明显上调。与空白对照组和空白-siRNA组细胞相比,ANXA2-siRNA转染SGC7901/DDP细胞对化疗药物DDP和5-FU的IC50值显著降低,差异有统计学意义(P <0. 05)。与空白对照组和空白-siRNA组细胞相比,ANXA2-siRNA转染SGC7901/DDP细胞后,MAPK信号通路中,P38表达无明显变化,但P38磷酸化水平下降明显。在PI3K/Akt信号通路中,AKT表达无明显变化,但AKT磷酸化水平下降明显。结论 ANXA2-siRNA转染胃癌耐药细胞能够下调耐药相关基因的表达,降低胃癌细胞的耐药性,可能是通过影响MAPK及PI3K/Akt信号通路中P38和AKT磷酸化过程实现的。 展开更多
关键词 ANXA2 转染 胃癌 耐药细胞 药物敏感性 信号通路
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