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高脂饮食诱发小鼠肥胖及其对肠道菌群结构影响的研究 被引量:15
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作者 杨凤啸 卢敏莹 《现代医院》 2017年第6期863-866,871,共5页
目的探讨高脂饮食对小鼠体重、血脂以及肠道菌群结构的影响。方法将20只C57BL/6J雌性小鼠随机分为正常对照组(10只)和高脂饮食组(10只),分别给予普通饮食和高脂饮食。饲喂12周后,称量小鼠体重,测定小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)... 目的探讨高脂饮食对小鼠体重、血脂以及肠道菌群结构的影响。方法将20只C57BL/6J雌性小鼠随机分为正常对照组(10只)和高脂饮食组(10只),分别给予普通饮食和高脂饮食。饲喂12周后,称量小鼠体重,测定小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量。采集小鼠粪便,提取细菌总DNA,PCR扩增获得16S r DNA基因V4标签片段,用于Hi Seq 2500高通量测序,基于QIIME平台比较小肠内容物菌群结构多样性。结果高脂饮食组小鼠体重及血清TC、TG、HDL-C、LDL-C均显著高于正常对照组。正常对照组小鼠粪便菌群多样性高于高脂饮食的小鼠。高脂饮食组小鼠的粪便中含有的厚壁菌较正常组显著升高,但是拟杆菌门数量显著低于正常对照组。结论高脂饮食能诱导小鼠肥胖,改变小鼠肠道菌群结构。 展开更多
关键词 高脂饮食 肥胖 肠道菌群 宏基因组 高通量测序
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参慈胶囊联合放疗对人肺鳞癌细胞株SK-MES-1裸鼠移植瘤血管生成的实验研究
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作者 潘静洁 徐立群 +4 位作者 徐萌 盛良翮 袁太泽 黄赖机 杨丽 《现代医院》 2019年第7期1022-1024,共3页
目的 观察参慈胶囊联合放疗对人肺鳞癌细胞株SK-MES-1裸鼠移植瘤血管生成的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 在无菌条件下每只裸鼠右侧背部皮下接种单细胞悬液制备荷瘤小鼠模型,将32只BALB/c裸鼠随机分为4组。①模型组:予生理盐水灌... 目的 观察参慈胶囊联合放疗对人肺鳞癌细胞株SK-MES-1裸鼠移植瘤血管生成的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 在无菌条件下每只裸鼠右侧背部皮下接种单细胞悬液制备荷瘤小鼠模型,将32只BALB/c裸鼠随机分为4组。①模型组:予生理盐水灌胃,连续15天后断颈处死。②参慈胶囊组:每日予参慈胶囊提取液110g/kg裸鼠,各组均以0.2mL灌胃,连续15d后断颈处死。③放射组与参慈胶囊+放射组:每日予参慈胶囊提取液110g/kg裸鼠并且在第1、3、5、8、10、12天行采用6-MV的X线照射,总剂量为18Gy/6F。各组连续治疗15d后断颈处死。取肿瘤组织采用免疫组化SP方法检测各组肿瘤组织血管生成情况,采用荧光定量PCR方法检测各组肿瘤组织VEGF与KDRmRNA表达的情况。结果 参慈胶囊配合放射治疗能够抑制人肺鳞癌细胞株SK-MES-1裸鼠移植瘤肿瘤的血管生成。结论 参慈胶囊能够抑制裸鼠移植瘤血管生成,其机制可能是通过降低VEGF和KDR的表达,或同时对二者进行调控而达到增敏效应。 展开更多
关键词 参慈胶囊 放疗 肺鳞癌 微血管密度 血管生成
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鼠源乳腺癌多药耐药细胞株的建立及耐药机制的初步研究 被引量:1
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作者 邓印根 张志杰 +3 位作者 卢敏莹 贾小婷 彭聪 贺智敏 《中国医药导报》 CAS 2016年第11期9-13,17,共6页
目的构建鼠源性乳腺癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药细胞株,为研究乳腺癌耐药与体内免疫微环境的关系提供细胞模型。方法通过体外以浓度递增的方法诱导小鼠乳腺癌4T1细胞对5-Fu产生耐药,MTS法确定其耐药性,平板克隆检测其增殖活性,实时定量和半... 目的构建鼠源性乳腺癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药细胞株,为研究乳腺癌耐药与体内免疫微环境的关系提供细胞模型。方法通过体外以浓度递增的方法诱导小鼠乳腺癌4T1细胞对5-Fu产生耐药,MTS法确定其耐药性,平板克隆检测其增殖活性,实时定量和半定量PCR检测其中5-Fu代谢相关酶TS、MTHFR、TK、OPRT、DPD及药泵蛋白MDR1、MRP1的表达,通过流式细胞术检测其周期及CD44+CD24-干细胞亚群的比例。结果耐药细胞4T1/5-Fu与4T1细胞相比,4T1/5-Fu细胞对5-Fu、吉西他滨和顺铂耐药的耐药指数(RI)明显升高;5-Fu合成代谢相关酶TK、OPRT表达明显降低(P<0.05),代谢抑制性相关酶TS、MTHFR明显升高(P<0.05),药泵蛋白MDR1、MRP1表达明显升高(P<0.05);流式细胞术结果显示,CD44表达明显升高,肿瘤干细胞群增多。结论成功构建小鼠乳腺癌多药耐药细胞株,耐药发生可能与5-Fu代谢酶类、药泵蛋白表达以及干细胞比例改变相关。 展开更多
关键词 肿瘤耐药 4T1细胞 5-氟尿嘧啶 肿瘤干细胞
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组蛋白甲基转移酶WHSC1对三阴性乳腺癌增殖的作用研究 被引量:4
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作者 杨明强 曾珊珊 +2 位作者 林鑫 刘浩 陈丹扬 《广州医科大学学报》 2022年第3期1-7,共7页
目的:探究组蛋白甲基转移酶WHSC1对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖的影响及可能的作用机制。方法:在癌症基因组图谱(TCGA)中分析WHSC1在人乳腺癌组织中的表达情况。采用人TNBC细胞MDA-MB-231及BT549构建稳定过表达WHSC1的细胞株,利用MTS法... 目的:探究组蛋白甲基转移酶WHSC1对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖的影响及可能的作用机制。方法:在癌症基因组图谱(TCGA)中分析WHSC1在人乳腺癌组织中的表达情况。采用人TNBC细胞MDA-MB-231及BT549构建稳定过表达WHSC1的细胞株,利用MTS法、克隆形成实验检测WHSC1对TNBC细胞增殖的影响。将过表达WHSC1的MDA-MB-231细胞接种至裸鼠皮下后观察移植瘤的生长情况;接种细胞后第20天,剥离移植瘤组织并称重,绘制肿瘤生长曲线;应用免疫组化方法检测移植瘤组织中增殖标志物Ki-67的表达情况。进一步,Western blotting方法检测过表达WHSC1的TNBC细胞中增殖相关分子的表达情况。结果:通过TCGA数据库分析可见,WHSC1在TNBC组织中显著高表达(P<0.001);MTS及克隆形成实验结果显示,过表达WHSC1可增强TNBC细胞的增殖能力(P<0.01);裸鼠皮下成瘤模型实验发现过表达WHSC1可增强TNBC细胞在体内的增殖能力,且免疫组化验证增殖标志物Ki-67表达增多;Werstern blotting结果显示,过表达WHSC1的MDA-MB-231细胞中c-Myc和CDK4蛋白表达水平升高(P<0.01),p21蛋白表达减少(P<0.001)。结论:WHSC1在三阴性乳腺癌中高表达,WHSC1能够促进三阴性乳腺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 WHSC1 三阴性乳腺癌 细胞增殖
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顺铂对siRNA抑制ERCC1基因表达的A549细胞增殖、凋亡影响 被引量:1
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作者 宋莹 仇秦威 +1 位作者 贺智敏 谷依学 《山东医药》 CAS 2014年第19期4-7,共4页
目的观察顺铂(cDDP)对小分子干扰RNA(siRNA)抑制切除修复交叉互补基因1(ERCC1)基因表达的A549细胞增殖、凋亡影响,并探讨cDDP对siRNA抑制ERCC1基因表达的A549细胞化疗敏感性。方法根据ERCC1基因序列,设计合成3对特异性的siRNA(分别命名... 目的观察顺铂(cDDP)对小分子干扰RNA(siRNA)抑制切除修复交叉互补基因1(ERCC1)基因表达的A549细胞增殖、凋亡影响,并探讨cDDP对siRNA抑制ERCC1基因表达的A549细胞化疗敏感性。方法根据ERCC1基因序列,设计合成3对特异性的siRNA(分别命名为S1、S2、S3),同时合成阴性对照siRNA(命名NC)。取对数生长期的A549细胞,采用Lipofectamine2000脂质体转染法进行S1、S2、S3、S1+S2+S3及NC转染,real-time RT-PCR和Western blotting技术检测ERCC1 mRNA和蛋白表达。结果与NC相比,S1、S2、S3及S1+S2+S3均能下调ERCC1表达,但S1+S2+S3下降最显著。用NC及S1+S2+S3转染A549细胞,24 h后加入0、0.5、1、2、4、8μg/mL的cDDP,采用MTS法计算细胞生存率及cDDP对细胞的半数抑制浓度(IC50)。A549细胞转染后48 h加4μg/mL的cDDP,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果加入0、0.5、1、2、4、8μg/mL的cDDP,NC转染的A549细胞存活率分别为100.00%±3.21%、94.86%±7.14%、89.79%±3.29%、66.67%±5.40%、33.31%±1.79%、19.12%±0.41%,S1+S2+S3转染的A549细胞存活率分别为100.00%±6.53%、71.63%±8.23%、59.33%±0.94%、37.42%±1.57%、19.41%±1.41%、12.75%±0.27%,相同cDDP浓度下A549细胞存活率比较,P均<0.05;S1+S2+S3、NC转染细胞的IC50分别为(1.25±0.11)、(3.09±0.36)μg/mL,二者比较,P<0.01。未加cDDP时,NC与S1+S2+S3转染A549细胞凋亡率分别为8.06%±1.79%、14.96%±0.47%,加入cDDP后,细胞凋亡率分别为24.61%±1.98%、43.90%±3.01%,二者比较,P均<0.05。结论 cDDP能降低siRNA抑制ERCC1基因表达的A549细胞增殖能力,并诱导细胞凋亡;cDDP对siRNA抑制ERCC1基因表达的A549细胞化疗敏感性升高。 展开更多
关键词 切除修复交叉互补基因1 RNA干扰 顺铂 肺肿瘤 肺癌
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E3泛素连接酶HECTD3真核表达质粒的构建
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作者 卢敏莹 杨波 《中国实用医药》 2013年第33期253-254,共2页
目的克隆E3泛素连接酶(homologous to the E6-associated protein carboxyl terminus domain containing 3,HECTD3)基因及构建真核表达质粒。方法提取人卵巢癌细胞SKOV-3细胞RNA,并逆转录为cDNA,以此作为模板PCR法扩增HECTD3基因,将其... 目的克隆E3泛素连接酶(homologous to the E6-associated protein carboxyl terminus domain containing 3,HECTD3)基因及构建真核表达质粒。方法提取人卵巢癌细胞SKOV-3细胞RNA,并逆转录为cDNA,以此作为模板PCR法扩增HECTD3基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证构建质粒中包含HECTD3基因。结论 HECTD3基因克隆及真核表达质粒构建成功,可以用于后续卵巢癌发生发展的分子生物学研究。 展开更多
关键词 E3泛素连接酶 卵巢癌 真核表达质粒
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TPM4在胃癌细胞中的表达及其对胃癌细胞侵袭与迁移能力的影响 被引量:4
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作者 郑文英 陆细红 +1 位作者 陈嘉乐 邓敏 《山西医科大学学报》 CAS 2020年第4期296-300,共5页
目的观察原肌球蛋白4(tropomyosin 4,TPM4)在胃癌细胞中表达及其对胃癌细胞的侵袭与迁移能力的影响.方法用Transwell小室分离法培养高迁移性胃癌细胞与非迁移性胃癌细胞亚系,分别命名为SGC7901-invasion细胞、SGC7901-noninvasion细胞,... 目的观察原肌球蛋白4(tropomyosin 4,TPM4)在胃癌细胞中表达及其对胃癌细胞的侵袭与迁移能力的影响.方法用Transwell小室分离法培养高迁移性胃癌细胞与非迁移性胃癌细胞亚系,分别命名为SGC7901-invasion细胞、SGC7901-noninvasion细胞,提取两株细胞的RNA并测序.qRT-PCR及Western blot分别检测两株细胞中TPM4的表达水平.另外转染TPM4-siRNA于SGC7901-invasion细胞,干扰TPM4表达,用Transwell实验及细胞划痕实验检测TPM4对SGC7901-invasion细胞侵袭与迁移能力的影响.结果RNA测序结果显示,TPM4在SGC7901-invasion细胞中表达量是SGC7901-noninvasion细胞的3.08倍(P<0.05).qRT-PCR和Western blot结果显示,与SGC7901-noninvasion细胞相比,在SGC7901-invasion细胞中TPM4的表达显著增高(P<0.05).转染TPM4-siRNA可明显抑制SGC7901-invasion细胞中TPM4的表达.Transwell实验结果显示,干扰TPM4表达可抑制SGC7901-invasion细胞的侵袭(P<0.05).细胞划痕实验结果显示,干扰TPM4的表达可抑制SGC7901-invasion细胞的迁移(P<0.05).结论TPM4在SGC7901-invasion细胞中高表达.TPM4可促进GC7901-invasion细胞侵袭与迁移. 展开更多
关键词 原肌球蛋白4 胃癌 侵袭 迁移
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MUC16促进肺腺癌细胞侵袭转移 被引量:1
8
作者 陈永胜 贾小婷 《中国社区医师》 2019年第22期8-9,共2页
目的:探讨MUC16在肺腺癌细胞中的作用。方法:生物信息学预测MUC16在肺腺癌组织中的表达量及对肺腺癌患者预后的相关性。Transwell实验检测干预MUC16表达对肺腺癌细胞H1975侵袭能力的影响。结果:生物信息学提示MUC16在483例肺腺癌中的表... 目的:探讨MUC16在肺腺癌细胞中的作用。方法:生物信息学预测MUC16在肺腺癌组织中的表达量及对肺腺癌患者预后的相关性。Transwell实验检测干预MUC16表达对肺腺癌细胞H1975侵袭能力的影响。结果:生物信息学提示MUC16在483例肺腺癌中的表达量远高于在347例正常组织中的表达量,且表达量与肺腺癌患者较差的预后呈正相关关系。在肺腺癌细胞H1975中高表达MUC16,该细胞的侵袭能力明显增加。而敲低MUC16则显著降低H1975细胞的侵袭能力。结论:MUC16在肺腺癌中高表达,与患者较差的预后呈正相关,且MUC16促进肺腺癌细胞侵袭转移。 展开更多
关键词 MUC16 侵袭转移 肺腺癌
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ALYREF在肝癌中的表达及生物学意义
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作者 陈嘉乐 张可 +1 位作者 杜楠 邓敏 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第5期533-538,共6页
目的探讨RNA结合蛋白Aly/REF输出因子(ALYREF)在肝癌中的表达及生物学意义。方法利用UALCAN和GEPIA在线网站中公开的肝癌患者手术组织与正常肝组织中ALYREF表达水平的数据,分析ALYREF表达水平与肝癌患者临床预后之间的关系。从病理科收... 目的探讨RNA结合蛋白Aly/REF输出因子(ALYREF)在肝癌中的表达及生物学意义。方法利用UALCAN和GEPIA在线网站中公开的肝癌患者手术组织与正常肝组织中ALYREF表达水平的数据,分析ALYREF表达水平与肝癌患者临床预后之间的关系。从病理科收集肝癌组织标本与癌旁组织标本,利用免疫组化方法检测ALYREF在肝癌组织中的表达。另外采用shRNA技术敲低肝癌细胞MHCC97H中ALYREF的表达,分别转染目的质粒shALYREF和对照质粒shControl于MHCC97H肝癌细胞中。用Transwell实验检测ALYREF对肝癌细胞MHCC97H迁移能力的影响,用CCK-8实验检测ALYREF对肝癌细胞MHCC97H增殖能力的影响。结果UALCAN与GEPIA公开数据分析显示,与正常肝组织相比,ALYREF在肝癌组织中高表达(P<0.05)。ALYREF的表达水平与肝癌患者肿瘤分期相关(P<0.005)。Kaplan-Meier分析结果显示,ALYREF低表达肝癌患者生存时间显著长于高表达患者(P=0.0015)。免疫组化结果显示,与正常肝组织相比,ALYREF在肝癌组织中高表达(P<0.005)。细胞功能实验结果显示敲低ALYREF基因表达能抑制肝癌细胞的迁移(P=0.0003)、增殖能力(P=0.04)。结论ALYREF在肝癌组织中高表达,其表达水平与肝癌患者的预后不良相关;而且ALYREF可促进MHCC97H细胞的迁移和增殖。 展开更多
关键词 肝癌 ALYREF 基因表达 临床预后 细胞迁移 细胞增殖
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CLDN4促进胃癌细胞增殖和侵袭能力
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作者 郑文英 杨文娟 邓敏 《中国社区医师》 2019年第22期6-6,9,共2页
目的:探讨CLDN4在胃癌发生发展中的作用。方法:采用CLDN4siRNA转染SGC7901胃癌细胞,通过qRT-PCR验证干扰效果。通过MTS检测CLDN4siRNA转染后胃癌细胞的增殖情况。通过transwell细胞侵袭实验检测细胞的侵袭能力变化。结果:在SGC7901细胞... 目的:探讨CLDN4在胃癌发生发展中的作用。方法:采用CLDN4siRNA转染SGC7901胃癌细胞,通过qRT-PCR验证干扰效果。通过MTS检测CLDN4siRNA转染后胃癌细胞的增殖情况。通过transwell细胞侵袭实验检测细胞的侵袭能力变化。结果:在SGC7901细胞中转染CLDN4siRNA后,可显著降低CLDN4表达水平,说明干扰效率高。检测转染CLDN4siRNA及对照细胞的细胞增殖情况发现,转染CLDN4siRNA细胞较对照细胞增殖速度明显减慢,差异有统计学意义(P<0.05)。随后通过transwell细胞侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力,发现转染CLDN4siRNA细胞的侵袭能力显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CLDN4能促进胃癌细胞增殖、侵袭能力。 展开更多
关键词 胃癌 CLDN4 侵袭
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