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电针和/或二甲双胍治疗多囊卵巢综合征模型大鼠的对比研究 被引量:15
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作者 孟延兵 郑艳华 +1 位作者 王素玲 马红霞 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第6期1376-1379,I0025,共5页
目的:比较电针、二甲双胍、电针配合二甲双胍治疗对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠的作用。方法:40只大鼠随机分成正常对照(D)、模型(M)、电针(A)、二甲(B)组、与二甲针(C)等5组,以丙酸睾丸酮合并高脂饲料造模;分别给予电... 目的:比较电针、二甲双胍、电针配合二甲双胍治疗对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠的作用。方法:40只大鼠随机分成正常对照(D)、模型(M)、电针(A)、二甲(B)组、与二甲针(C)等5组,以丙酸睾丸酮合并高脂饲料造模;分别给予电针(A、C组)和/或二甲双胍(B、C组)治疗,检测各项指标。结果:A、B、C组的睾酮(T)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、空腹胰岛素(FINS)、和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)显著降低;部分大鼠出现规律的动情周期,黄体数目及卵泡内颗粒细胞层数增加,囊性卵泡减少。结论:A、B、C方案对PCOS大鼠均有疗效。电针结合二甲双胍对糖耐量的调节较单纯电针更快显效。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 电针 二甲双胍 胰岛素抵抗
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自体垂直悬吊牵引与靶向调控caspase3对兔退变椎间盘细胞的影响 被引量:9
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作者 佟德民 孙凤杰 +3 位作者 孙利群 冯福盈 梁健宁 谭滴清 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1072-1077,共6页
目的探讨自体垂直悬吊牵引与靶向调控caspase 3对兔退变椎间盘细胞凋亡的影响。方法体外实验:分离培养兔椎间盘髓核细胞,进行caspase3 siRNA和阴性对照siRNA转染,分别置于血清饥饿培养基中培养6h和48h,设正常细胞和血清饥饿细胞对照,应... 目的探讨自体垂直悬吊牵引与靶向调控caspase 3对兔退变椎间盘细胞凋亡的影响。方法体外实验:分离培养兔椎间盘髓核细胞,进行caspase3 siRNA和阴性对照siRNA转染,分别置于血清饥饿培养基中培养6h和48h,设正常细胞和血清饥饿细胞对照,应用RT-q PCR法和流式细胞术Annexin V法分析caspase3 mRNA表达和细胞凋亡情况。体内实验:将35只新西兰大白兔随机分为模型组(n=10)、阴性siRNA对照组(n=10)、caspase3 siRNA组(n=10)和caspase3siRNA牵引组(n=5),采用16G针刺损伤腰椎椎体右前侧纤维环制备椎间盘退变模型;后3组按照造模入路用26G针头从造模对侧分别注入阴性对照siRNA或caspase3 siRNA转染复合体至兔髓核中心,模型组不予处理。48h后前3组每组随机选取5只实验兔,处死取髓核组织,提取总RNA,采用RT-q PCR和Western blotting分析退变椎间盘内caspase3 mRNA和蛋白表达情况;同时caspase3 siRNA牵引组再行自体垂直悬吊牵引,30min/d,连续2周后处死获取髓核组织,采用ELISA检测髓核内TNF-α和IL-1β表达情况,HE染色观察组织形态学变化。结果 Caspase 3 siRNA转染后兔髓核细胞caspase3 mRNA表达水平明显降低,在饥饿培养条件下细胞凋亡明显减少(P<0.05)。椎间盘退变模型兔在纤维环穿刺注入caspase3 siRNA后,椎间盘髓核内caspase3 mRNA和蛋白表达明显下调;2周后caspase3 siRNA牵引组TNF-α和IL-1β表达与模型组和阴性siRNA对照组比较显著减少(P<0.05),但与caspase3 siRNA组比较差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色显示caspase3 siRNA牵引组椎间盘内活细胞和细胞外基质明显增多,胶原纤维排列整齐。结论自体垂直悬吊牵引和靶向调控caspase3能有效阻止细胞凋亡的发生,延缓早期椎间盘退变。 展开更多
关键词 椎间盘退变 细胞凋亡 牵引
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海参多糖对肾癌ACHN细胞自噬的影响 被引量:4
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作者 李天 周东梅 +4 位作者 刘一帆 江先汉 谢清灵 黄奕桥 殷羽飞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2019年第5期758-762,共5页
目的:研究海参多糖对肾癌细胞自噬的影响。方法:将肾癌ACHN细胞分为海参多糖(50、100、200 mg/L)组和对照组,采用MTT法检测细胞活力,结晶紫染色观察细胞形态和细胞数量,Western blot法检测细胞增殖标志物(Ki-67、PCNA)、凋亡标志物(Clea... 目的:研究海参多糖对肾癌细胞自噬的影响。方法:将肾癌ACHN细胞分为海参多糖(50、100、200 mg/L)组和对照组,采用MTT法检测细胞活力,结晶紫染色观察细胞形态和细胞数量,Western blot法检测细胞增殖标志物(Ki-67、PCNA)、凋亡标志物(Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9)、自噬相关蛋白(Beclin1、P62、LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ)、AKT/mTOR通路相关蛋白(PI3K/p-PI3K、AKT/p-AKT、mTOR)的表达,FITC-V和PI染色法检测细胞凋亡率。结果:与对照组比较,海参多糖组细胞活力、球体内细胞数、Ki-67及PCNA表达降低,细胞凋亡率增加,Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、Beclin1表达增加,P62表达减少,PI3K/p-PI3K、AKT/p-AKT、mTOR表达量减少(P<0.05);且随着海参多糖质量浓度的增加,上述作用逐渐增强。结论:海参多糖通过抑制AKT/mTOR信号通路进而抑制肾癌细胞增殖,并诱导肾癌细胞发生自噬。 展开更多
关键词 海参多糖 肾癌 自噬 AKT MTOR ACHN细胞
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体外培养胎鼠心肌细胞方法的优化 被引量:3
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作者 孙凤杰 佟德民 +2 位作者 卢小炎 董文斌 邓长柏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1534-1538,共5页
目的探讨体外培养胎鼠心肌细胞方法的优化。方法取孕19日SD胎鼠分离心肌细胞进行原代培养,采用0.8 g/L胰蛋白酶和0.4 g/L 2型胶原蛋白酶联合消化后,以多次差速分离,不同种类的动物血清(胎牛血清组、马血清组)改良心肌细胞培养条件。倒... 目的探讨体外培养胎鼠心肌细胞方法的优化。方法取孕19日SD胎鼠分离心肌细胞进行原代培养,采用0.8 g/L胰蛋白酶和0.4 g/L 2型胶原蛋白酶联合消化后,以多次差速分离,不同种类的动物血清(胎牛血清组、马血清组)改良心肌细胞培养条件。倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态及搏动频率、免疫荧光细胞化学染色分别检测α-横纹肌辅肌动蛋白(α-SA)与心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)鉴定胎鼠心肌细胞及培养24、48、72、96 h的心肌细胞纯度。结果心肌细胞接种24 h,可见大部分贴壁细胞和少量的悬浮细胞,亦见少许搏动的心肌细胞;48、72、96 h,马血清组心肌细胞α-肌动蛋白及cTnⅠ阳性率明显高于胎牛血清组。结论采用胰蛋白酶和2型胶原蛋白酶联合消化和马血清更易培养出胎鼠心肌细胞。 展开更多
关键词 细胞培养 SD大鼠 胎鼠心肌细胞 方法优化
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脐带间充质干细胞改善自身免疫性肝炎免疫微环境的机制 被引量:1
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作者 余丽娜 阎升光 +5 位作者 谢丹 高升 叶政 陈姿任 王梓桦 欧阳石 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期1466-1472,共7页
目的探讨脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)对自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)免疫微环境的影响及潜在的调控机制。方法将AIH患者外周血单个核细胞(PBMCs)与UCMSCs分别以10∶1(Co⁃culture 1)或... 目的探讨脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)对自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)免疫微环境的影响及潜在的调控机制。方法将AIH患者外周血单个核细胞(PBMCs)与UCMSCs分别以10∶1(Co⁃culture 1)或5∶1(Co⁃culture 2)的比例共培养。流式细胞术检测Th17、Treg及Th17/Treg比值;ELISA检测上清中转化生长因子β1(TGF⁃β1)、白细胞介素⁃17(IL⁃17)和IL⁃6的水平。运用RNA⁃seq筛选PBMCs共培养前后的差异基因,富集前15个表达量最高的mRNA进行后续生物信息分析。Western blot和RT⁃qPCR测定Foxp3、RORγt表达水平。结果UCMSCs显著降低CD3^(+)CD8^(-)IL⁃17A^(+)Th17比例,增加CD25^(+)Foxp3^(+)CD4^(+)Treg比例。与PBMCs组相比,Co⁃culture 2组的TGF⁃β1显著上调(P<0.01),IL⁃17和IL⁃6显著下调(P<0.05)。转录组测序分析发现转录因子主要集中在免疫应答及T细胞激活等领域;其中SMAD3和STAT3占据较核心的地位。蛋白和mRNA检测显示,Co⁃culture 2组Foxp3和SMAD3的表达水平显著上调(P<0.05),RORγt和STAT3的表达水平显著下调(P<0.05)。结论UCMSCs通过TGF⁃β通路促进Th17向Treg细胞分化,抑制炎症反应改善肝脏免疫微环境。 展开更多
关键词 UCMSCs/PBMCs共培养系统 肝脏免疫微环境 RNA⁃seq Th17/Treg平衡 TGF⁃β信号通路
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