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HIF-1α三突变体对高糖、低氧环境下H9c2心肌细胞凋亡的影响
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作者 麦莉 潘永婷 +2 位作者 何文凯 吴晓倩 李明琰 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第17期2617-2623,共7页
目的 探讨以腺病毒为载体的HIF-1α三突变体(Ad-HIF-1α-Trip)对高糖、低氧环境下H9c2心肌细胞凋亡的影响。方法 将体外培养的H9c2心肌细胞置于低氧浓度培养箱中培养,并随机分组,依据正常或高葡萄糖浓度的培养环境以及病毒转染情况分为4... 目的 探讨以腺病毒为载体的HIF-1α三突变体(Ad-HIF-1α-Trip)对高糖、低氧环境下H9c2心肌细胞凋亡的影响。方法 将体外培养的H9c2心肌细胞置于低氧浓度培养箱中培养,并随机分组,依据正常或高葡萄糖浓度的培养环境以及病毒转染情况分为4组,分别为低氧+正常葡萄糖浓度组(LO+NG组),低氧+高葡萄糖浓度组(LO+HG组),低氧+高糖+腺病毒空载体组(LO+HG+Ad-Null组),低氧+高糖+腺病毒HIF-1α三突变组(LO+HG+Ad-HIF-1α-Trip组)。低氧下培养12 h后,采用qRT-PCR、Western blot检测各组H9c2心肌细胞HIF-1α、PI3K和Akt在mRNA和蛋白水平的表达情况;采用流式细胞仪检测各组H9c2心肌细胞的凋亡情况。结果 qRT-PCR、Western blot检测显示高糖、低氧环境下HIF-1α、PI3K、Akt在心肌细胞中的表达下降,转染Ad-HIF-1α-Trip可增强其表达。流式细胞术分析显示,在高糖、低氧环境下,心肌细胞凋亡率增加,而LO+HG+Ad-HIF-1α-Trip组H9c2心肌细胞的凋亡率降低。结论 Ad-HIF-1α-Trip可增强高糖、低氧环境下H9c2心肌细胞HIF-1α、PI3K、Akt的表达,可能通过激活PI3K-Akt信号通路减少心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 HIF-1α三突变体 腺病毒 PI3K-AKT信号通路 心肌细胞凋亡 糖尿病 糖尿病心肌病
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高糖、低氧对大鼠心肌微血管内皮细胞新生功能影响的体外研究 被引量:2
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作者 蔡梅峰 崔永生 +3 位作者 何文凯 李明琰 应虹柳 曾国鹏 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期109-116,共8页
目的:探讨高糖、低氧对大鼠心肌微血管内皮细胞(CMEC)新生功能的影响.方法:体外培养成年大鼠CMEC,随机分为4组:正常对照组(NG组)、高糖组(HG组)、低氧组(HNG组)和高糖+低氧联合组(HHG组).Real-time PCR法检测各组CMEC的HIF-1α、VEGF的m... 目的:探讨高糖、低氧对大鼠心肌微血管内皮细胞(CMEC)新生功能的影响.方法:体外培养成年大鼠CMEC,随机分为4组:正常对照组(NG组)、高糖组(HG组)、低氧组(HNG组)和高糖+低氧联合组(HHG组).Real-time PCR法检测各组CMEC的HIF-1α、VEGF的mRNA表达水平; CCK-8法检测各组CMEC的体外增殖能力;transwell小室实验评价各组CMEC的迁移能力;体外小管形成实验评价各组CMEC的成管能力.结果:(1) HIF-1α的mRNA表达水平:NG组与HG组之间、HNG组与HHG组之间无统计学差异(P> 0. 05); HNG组明显高于NG组(P <0. 05),HHG组明显高于HG组(P <0. 05),表明低氧可促进CMEC的HIF-1αmRNA表达. VEGF的mRNA表达水平:NG组与HG组间无统计学差异(P> 0. 05),HNG组明显高于HHG组(P <0. 05); HNG组明显高于NG组(P <0. 05),HHG组明显高于HG组(P <0. 05),表明高糖可抑制CMEC的VEGF mRNA表达,而低氧可促进其表达.(2)细胞的增殖能力:NG组明显高于HG组(P <0. 05),HNG组明显高于HHG组(P <0. 05); NG组明显高于HNG组(P <0. 05),HG组明显高于HHG组(P <0. 05),表明高糖、低氧均可抑制CMEC增殖.(3)细胞的迁移能力:NG组明显高于HG组(P <0. 05),HNG组明显高于HHG组(P <0. 05); NG组明显高于HNG组(P <0. 05),HG组明显高于HHG组(P <0. 05),表明高糖、低氧均可抑制CMEC迁移.(4)细胞的成管能力:NG组明显高于HG组(P <0. 05),HNG组明显高于HHG组(P <0. 05); NG组明显高于HNG组(P <0. 05),HG组明显高于HHG组(P <0. 05),表明高糖、低氧均可抑制CMEC小管形成能力.结论:高糖对CMEC的HIF-1αmRNA表达的影响不明显,但可明显抑制CMEC的VEGF mRNA表达;低氧可促进CMEC的HIF-1α和VEGF mRNA表达;高糖和低氧均可降低CMEC的增殖能力、迁移能力和成管能力,两者联合时作用更为明显. 展开更多
关键词 低氧诱导因子1Α 心肌微血管内皮细胞 高葡萄糖 低氧
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MicroRNA-196a通过HOXB7调控人骨髓间充质干细胞的增殖功能 被引量:7
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作者 黎佼 董珺 +4 位作者 张振辉 田朝伟 成传访 吴功雄 刘世明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期278-285,共8页
目的:研究年龄相关microRNA-196a(miR-196a)对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)增殖功能的调控作用。方法:通过MTT研究年龄对hMSCs增殖能力的影响。通过microRNA芯片和qRT-PCR检测年龄对miR-196a表达的影响。通过转染miR-196a模拟物或抑制物,... 目的:研究年龄相关microRNA-196a(miR-196a)对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)增殖功能的调控作用。方法:通过MTT研究年龄对hMSCs增殖能力的影响。通过microRNA芯片和qRT-PCR检测年龄对miR-196a表达的影响。通过转染miR-196a模拟物或抑制物,研究其对hMSCs增殖能力的影响。通过萤光素酶报告基因系统证实HOXB7为miR-196a的靶基因。通过siRNA研究HOXB7对碱性成纤维细胞生f长因子(bFGF)表达及hMSCs增殖功能的影响和研究bFGF对hMSCs增殖功能的影响。结果:随年龄增加,hMSCs的增殖能力下降,miR-196a的表达增加。miR-196a可抑制hMSCs的增殖。抑制miR-196a的表达可促进hMSCs的增殖。同时抑制miR-196a和HOXB7的表达,使miR-196a失去对hMSCs增殖能力的调控作用。抑制HOXB7的表达可使bFGF的表达下调。直接抑制HOXB7或bFGF的表达可抑制hMSCs的增殖。结论:miR-196a通过抑制HOXB7及bFGF的表达导致hMSCs增殖能力下降。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 MicroRNA-196a 年龄 HOXB7蛋白
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微小RNA-199a-5p调控大鼠心肌细胞肥大的研究 被引量:5
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作者 张振辉 黎佼 +2 位作者 熊旭明 陈伟燕 刘世明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期408-413,共6页
目的:探讨微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)在心肌肥大模型中的表达及对大鼠心肌细胞肥大的调控作用。方法:用腹主动脉缩窄术(TAAC)构建心肌肥大大鼠模型,体外培养新生Sprague-Dawley大鼠心肌细胞,用血管紧张素II(Ang II)诱导心肌细胞肥大... 目的:探讨微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)在心肌肥大模型中的表达及对大鼠心肌细胞肥大的调控作用。方法:用腹主动脉缩窄术(TAAC)构建心肌肥大大鼠模型,体外培养新生Sprague-Dawley大鼠心肌细胞,用血管紧张素II(Ang II)诱导心肌细胞肥大,荧光定量PCR(qRT-PCR)检测动物血浆和心肌细胞miR-199a-5p含量;合成大鼠miR-199a-5p的拟似物(mimic)和抑制剂(inhibitor),用脂质体转染mimic和inhibitor进入心肌细胞,用qRT-PCR检测肥大基因心房钠尿因子和β-肌球蛋白重链mRNA的表达变化;用氚标亮氨酸掺入量检测细胞蛋白合成速率变化;用细胞荧光染色法检测细胞表面积变化。结果:TAAC术后28 d,大鼠血浆miR-199a-5p的含量较对照组显著增加(P<0.05),在Ang II诱导肥大的心肌细胞中,miR-199a-5p的表达量也较对照组显著增加。在心肌细胞中过表达miR-199a-5p,能使细胞肥大基因表达增加,蛋白合成速率加快,细胞表面积增大,而使用inhibitor阻遏miR-199a-5p的作用后,能抑制Ang II诱导的肥大基因表达、细胞蛋白合成速率和细胞表面积的变化。结论:心肌肥大动物和细胞模型中miR-199a-5p的表达发生上调。过表达miR-199a-5p能促进体外培养的心肌细胞肥大,而阻遏miR-199a-5p的作用能抑制Ang II诱导的心肌细胞肥大。 展开更多
关键词 微小RNA 心肌肥大 血管紧张素Ⅱ
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老年慢性心力衰竭患者血清趋化素和过氧化物酶体增殖物激活受体α表达水平及其与预后的关系 被引量:4
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作者 麦莉 刘瑞瑛 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2021年第6期112-116,共5页
目的探究血清趋化素、过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPAR-α)在老年慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)患者血清中的表达水平及二者与预后的关系。方法选取广州医科大学附属... 目的探究血清趋化素、过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPAR-α)在老年慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)患者血清中的表达水平及二者与预后的关系。方法选取广州医科大学附属第二医院2017年7月至2018年7月诊治的95例CHF患者纳入患病组,选取同期于该院体检的60例健康者纳入健康组。采用酶联免疫吸附测定检测两组研究对象血清趋化素、PPAR-α表达水平,并检测左心房内径(left atrial diameter,LAD)、左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室舒张末期内径(left ventricular end diastolic dimension,LVEDD)、左心室质量指数(left ventricular mass index,LVMI)等心功能指标;采用Pearson相关性分析探讨血清趋化素、PPAR-α表达水平与心功能指标的相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线分析血清趋化素、PPAR-α表达水平与患者预后的关系。结果与健康组相比,患病组患者血清趋化素表达水平显著上调(P<0.05),PPAR-α表达水平显著下调(P<0.05);随着纽约心脏病协会(New York Heart Association,NYHA)心功能分级的增加,血清趋化素表达水平显著增加(均P<0.05),PPAR-α表达水平显著下降(均P<0.05);患病组患者LAD、LVEDD、LVMI均显著高于健康组(均P<0.05),LVEF显著低于健康组(P<0.05);Pearson相关性分析显示,CHF患者血清趋化素表达水平与PPAR-α表达水平呈负相关(r=-0.455,P<0.05);CHF患者血清趋化素表达水平与LAD、LVEDD、LVMI均呈正相关(均P<0.05),与LVEF呈负相关(P<0.05);血清PPAR-α表达水平与LAD、LVEDD、LVMI均呈负相关(均P<0.05),与LVEF呈正相关(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线分析显示,趋化素高表达组患者终点事件发生率显著高于趋化素低表达组(P<0.05),PPAR-α高表达组患者终点事件发生率显著低于PPAR-α低表达组(P<0.05)。结论老年CHF患者血清趋化素、PPAR-α表达水平与老年CHF患者预后有关,可能是CHF临床预后的潜在生物指标。 展开更多
关键词 老年 慢性心力衰竭 趋化素 过氧化物酶体增殖物活化受体α 预后
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