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1-磷酸鞘氨醇在高糖诱导血管内皮细胞功能损伤中的作用 被引量:5
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作者 刘慰华 林双峰 +4 位作者 石吉相 潘婷 陈秋梅 王烁婷 尚慧 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期245-250,共6页
目的:探讨1-磷酸鞘氨醇(S1P)在高糖诱导血管内皮细胞功能损伤中的作用及其机制。方法:在高糖培养的人主动脉内皮细胞模型中,分别或同时给予S1P、鞘氨醇激酶1抑制剂和Akt抑制剂处理后,观察一氧化氮(NO)、粒细胞-内皮细胞黏附率、细胞间... 目的:探讨1-磷酸鞘氨醇(S1P)在高糖诱导血管内皮细胞功能损伤中的作用及其机制。方法:在高糖培养的人主动脉内皮细胞模型中,分别或同时给予S1P、鞘氨醇激酶1抑制剂和Akt抑制剂处理后,观察一氧化氮(NO)、粒细胞-内皮细胞黏附率、细胞间黏附分子1(ICAM-1)蛋白表达、内皮细胞迁移以及Akt/内皮型一氧化氮合酶(e NOS)信号途径的改变。结果:S1P明显降低高糖诱导的内皮细胞培养上清液中NO含量,促进粒细胞与内皮细胞黏附,显著增加内皮细胞ICAM-1蛋白表达,抑制内皮细胞迁移和Akt/eNOS信号通路激活。鞘氨醇激酶1抑制剂减少S1P生成后上述内皮细胞功能指标得以明显改善,Akt/e NOS信号通路恢复激活。结论:S1P促进高糖培养的内皮细胞功能障碍的形成,可能与其抑制Akt/e NOS信号通路激活有关。抑制S1P生成有望成为减轻内皮细胞功能损伤的治疗策略之一。 展开更多
关键词 1-磷酸鞘氨醇 内皮细胞 内皮型一氧化氮合酶 细胞间黏附分子1
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miR-486-5p在氧化应激引起人骨髓间充质干细胞凋亡中的作用 被引量:5
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作者 胡明 黎佼 +4 位作者 刘宁宁 黄桢钧 伍崇海 钟赟 刘世明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期524-529,共6页
目的:观察microRNA-486-5p(miR-486-5p)在氧化应激引起人骨髓间充质干细胞(h MSCs)凋亡中的作用并探讨其作用机制。方法:h MSCs经培养鉴定后分为5组:空白对照组、H2O2组、miR-486-5p模拟物+H2O2组、抑制物(αnti-miR)+H2O2组及相应的阴... 目的:观察microRNA-486-5p(miR-486-5p)在氧化应激引起人骨髓间充质干细胞(h MSCs)凋亡中的作用并探讨其作用机制。方法:h MSCs经培养鉴定后分为5组:空白对照组、H2O2组、miR-486-5p模拟物+H2O2组、抑制物(αnti-miR)+H2O2组及相应的阴性对照(scrambled control)+H2O2组。荧光定量PCR(real-time PCR)检测氧化应激诱导h MSCs凋亡过程中miR-486-5p的表达变化。用脂质体分别转染miR-486-5p的模拟物、抑制物及阴性对照到h MSCs。应用MTT、Hoechst标记和流式细胞术的方法检测miR-486-5p对氧化应激介导细胞活性下降及凋亡效应的影响,Western blotting检测凋亡相关蛋白、Akt与其磷酸化水平,采用试剂盒测定caspase-3活性。结果:H2O2诱导h MSCs凋亡过程中miR-486-5p的表达较对照组显著下降(P<0.05)。与阴性对照组相比,在h MSCs中过表达miR-486-5p,能使细胞在氧化应激情况下活性显著下降,凋亡发生率增高,蛋白Bcl-2/Bax比值、caspase-3酶原含量及Akt磷酸化水平降低,caspase-3活性增强;而使用抑制物阻遏miR-486-5p的作用后,细胞在氧化应激条件下活性增加,凋亡发生率降低,蛋白Bcl-2/Bax比值及Akt磷酸化水平升高,caspase-3活性下降。结论:过表达miR-486-5p促进氧化应激引起的h MSCs凋亡,阻遏miR-486-5p的作用抑制氧化应激条件下的h MSCs凋亡,其中作用机制可能与调控Akt通路有关。 展开更多
关键词 MicroRNA-486-5p 间充质干细胞 氧化应激 细胞凋亡
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p38/ATF-2通路参与C反应蛋白诱导的内皮细胞活化 被引量:5
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作者 刘少军 李沅美 +2 位作者 刘慰华 熊龙根 刘世明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期808-811,共4页
目的:考察p38 MAPK/ATF-2通路在C反应蛋白( CRP)诱导的内皮细胞活化中的作用。方法:采用培养的人冠状动脉内皮细胞( HCAEC)第3~7代用于实验。 CRP刺激诱导内皮细胞活化,给予p38抑制剂SB203580和SB202190干预。免疫印迹法检测p-... 目的:考察p38 MAPK/ATF-2通路在C反应蛋白( CRP)诱导的内皮细胞活化中的作用。方法:采用培养的人冠状动脉内皮细胞( HCAEC)第3~7代用于实验。 CRP刺激诱导内皮细胞活化,给予p38抑制剂SB203580和SB202190干预。免疫印迹法检测p-eNOS、p-p38和p-ATF2的水平;ELISA法测定HCAEC分泌的黏附分子ICAM-1、VCAM-1和MCP-1的变化。结果: CRP呈浓度依赖性地抑制p-eNOS水平, CRP诱导HCAEC分泌ICAM-1、VCAM-1和MCP-1;CRP激活p38/ATF-2通路;SB203580和SB202190部分恢复p-eNOS水平和抑制CRP诱导的ICAM-1、VCAM-1和MCP-1分泌。结论:p38 MAPK/ATF-2通路参与CRP诱导的HCAEC活化。 展开更多
关键词 P38 MAPK/ATF-2通路 C反应蛋白 内皮细胞活化 动脉粥样硬化
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MicroRNA-378*通过抑制CTGF促进人骨髓间充质干细胞凋亡 被引量:3
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作者 董珺 曾波航 +4 位作者 刘宁宁 莫沛 熊龙根 刘世明 黎佼 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2238-2242,共5页
目的:研究年龄相关microRNA-378*(miR-378*)对人骨髓间充质干细胞(h MSCs)存活和凋亡的调控作用。方法:通过microRNA芯片和qRT-PCR检测供体年龄对h MSCs中miR-378*表达的影响;通过H2O2诱导h MSCs凋亡;通过转染miR-378*模拟物或抑制物,... 目的:研究年龄相关microRNA-378*(miR-378*)对人骨髓间充质干细胞(h MSCs)存活和凋亡的调控作用。方法:通过microRNA芯片和qRT-PCR检测供体年龄对h MSCs中miR-378*表达的影响;通过H2O2诱导h MSCs凋亡;通过转染miR-378*模拟物或抑制物,过表达或抑制miR-378*的表达;用MTT、LDH、caspase-3/7、TUNEL检测等方法研究其对h MSCs存活和凋亡的影响;通过siRNA研究结缔组织生长因子(CTGF)对h MSCs存活和凋亡的影响。结果:随供体年龄增加,h MSCs中miR-378*的表达增加。H2O2刺激可促进miR-378*表达,抑制CTGF表达。过表达miR-378*可减少h MSCs的存活,促进细胞凋亡。相反,抑制miR-378*的表达促进h MSCs的存活,减少细胞凋亡。同时抑制miR-378*和CTGF的表达,使miR-378*失去对h MSCs存活和凋亡的调控作用。直接抑制CTGF的表达可减少h MSCs的存活,促进细胞凋亡。结论:miR-378*通过抑制CTGF的表达减少h MSCs存活,促进h MSCs凋亡。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 MicroRNA-378* 细胞凋亡
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miR-708-5p通过抑制TMEM88表达促进人骨髓间充质干细胞迁移 被引量:2
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作者 黎佼 刘宁宁 +3 位作者 胡明 曾波航 董珺 刘世明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期239-244,共6页
目的:研究年龄相关microRNA-708-5p(miR-708-5p)对人骨髓间充质干细胞(h MSCs)迁移能力的调控作用。方法:通过microRNA芯片和real-time PCR检测供体年龄对h MSCs中miR-708-5p表达的影响;通过转染miR-708-5p模拟物或抑制物,过表达或抑制m... 目的:研究年龄相关microRNA-708-5p(miR-708-5p)对人骨髓间充质干细胞(h MSCs)迁移能力的调控作用。方法:通过microRNA芯片和real-time PCR检测供体年龄对h MSCs中miR-708-5p表达的影响;通过转染miR-708-5p模拟物或抑制物,过表达或抑制miR-708-5p表达;通过细胞划痕及Transwell实验检测h MSCs迁移能力。通过siRNA研究miR-708-5p靶基因跨膜蛋白88(TMEM88)对h MSCs中β链球蛋白(β-catenin)及h MSCs迁移功能的影响。结果:随供体年龄增加,h MSCs中miR-708-5p的表达下降。过表达miR-708-5p可促进h MSCs迁移。相反,抑制miR-708-5p的表达可减少h MSCs迁移。随供体年龄增加,TMEM88表达增加,而β-catenin表达下降,直接抑制TMEM88的表达可促进β-catenin表达,促进h MSCs迁移。同时抑制miR-708-5p和TMEM88,使miR-708-5p失去对h MSCs的调控作用。结论:miR-708-5p可通过抑制TMEM88表达,上调β-catenin,从而活化Wnt/β-catenin信号通路,促进h MSCs迁移。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 MicroRNA-708-5p 年龄 细胞迁移
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低氧预处理脐带间充质干细胞来源的外泌体对内皮细胞功能的影响 被引量:9
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作者 叶锦豪 陈静 +4 位作者 季杨 顾杰蕾 刘建卫 刘世明 钟赟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1351-1358,共8页
目的:探讨低氧预处理人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)后,其释放的外泌体对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移和小管形成的影响。方法:分离、培养并鉴定hUCMSCs和HUVECs。采用超速离心法提取hUCMSCs释放的外泌体,透射电镜观察外泌体的形态... 目的:探讨低氧预处理人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)后,其释放的外泌体对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移和小管形成的影响。方法:分离、培养并鉴定hUCMSCs和HUVECs。采用超速离心法提取hUCMSCs释放的外泌体,透射电镜观察外泌体的形态,纳米颗粒跟踪分析技术检测外泌体的粒径和浓度,Western blot检测外泌体表面特异性标志蛋白。将hUCMSCs分为常氧组和低氧预处理组,用CCK-8法检测细胞活力。将HUVECs分为对照组、常氧外泌体组和低氧外泌体组,用EdU法检测细胞增殖能力,细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移能力,小管形成实验检测细胞小管形成能力。结果:与常氧组相比,低氧预处理增强hUCMSCs活力,促进其外泌体释放。与常氧外泌体组相比,低氧预处理hUCMSCs释放的外泌体增强HUVECs的增殖、迁移和小管形成能力。结论:低氧预处理hUCMSCs分泌的外泌体增强HUVECs增殖、迁移和小管形成能力。 展开更多
关键词 低氧 外泌体 脐带间充质干细胞 内皮细胞
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