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上尿路结石术后感染的病原菌及相关因素分析
被引量：
12
1
作者
王文俊
郝宗耀
+6 位作者
曾国华
张艳斌
席俊华
樊松
赵磊
王建忠
梁朝朝
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2019年第10期1663-1666,共4页
分析上尿路结石(UUC)术后感染的病原菌及相关因素。回顾2 500例行内镜碎石治疗的UUC术后感染发生率,分析所有对象临床特征与术后感染症状发生的关联性,并探讨存在感染症状的患者病原菌分布占比情况,结果显示UUC患者内镜碎石术治疗后感...
分析上尿路结石(UUC)术后感染的病原菌及相关因素。回顾2 500例行内镜碎石治疗的UUC术后感染发生率,分析所有对象临床特征与术后感染症状发生的关联性,并探讨存在感染症状的患者病原菌分布占比情况,结果显示UUC患者内镜碎石术治疗后感染症状发生率较高,年龄≥60岁、女性、合并糖尿病、结石>5 cm、急性梗阻、手术类型、手术时间延长等项目均对感染的发生有显著影响,UUC合并感染患者主要致病菌为革兰阴性菌,大肠埃希菌是导致感染发生的主要革兰阴性致病菌,粪肠球菌是主要革兰阳性菌致病菌,临床治疗需根据药敏试验结果结合患者自身情况综合制定用药方案,在保证安全性的同时提高治疗效果,改善预后。
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关键词
上尿路结石
感染
临床特征
病原菌
药敏试验
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职称材料
Prohibitin启动子中胆固醇活性作用位点研究
2
作者
董培
蒋丽娟
+6 位作者
郭胜杰
刘卓炜
李永红
尧凯
秦自科
韩辉
周芳坚
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期1821-1825,共5页
目的:验证抑制素(prohibitin,PHB)基因启动子胆固醇敏感活性作用位点,为PHB在前列腺癌靶向基因治疗中的应用提供实验依据。方法:采用PCR分段扩增PHB启动子,克隆入pGL3-Basic萤光素酶报告基因载体。将构建的重组质粒用脂质体转染至人前...
目的:验证抑制素(prohibitin,PHB)基因启动子胆固醇敏感活性作用位点,为PHB在前列腺癌靶向基因治疗中的应用提供实验依据。方法:采用PCR分段扩增PHB启动子,克隆入pGL3-Basic萤光素酶报告基因载体。将构建的重组质粒用脂质体转染至人前列腺癌PC-3细胞,再分别培养于低胆固醇培养基和普通胆固醇培养基中,检测PHB启动子各分段重组质粒萤光素酶活性的变化。限定PHB启动子约200 bp的胆固醇敏感启动区域,找出其中的固醇调节元件(sterol regulatory element,SRE)同源位点并进行点突变,证实PHB基因的胆固醇敏感调控位点。结果:PHB启动子和各分段产物构建质粒完整。与转染完整PHB启动子(pPHB-1192)的PC-3细胞比较,转染pPHB-179(-35/+138)的PC-3细胞萤光素酶活性显著降低(P<0.05)。点突变位于PHB启动子上的-117到-108 bp的SRE可能位点后,与转染pPHB-1192的PC-3细胞比较,转染SRE点突变的PC-3细胞萤光素酶活性显著降低(P<0.05)。结论:PHB启动子在人前列腺癌PC-3细胞中的活性受胆固醇调节。PHB启动子中对胆固醇敏感的作用位点位于-117到-108 bp的SRE同源位点。PHB可能成为前列腺癌靶向基因治疗的有效工具。
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关键词
前列腺肿瘤
胆固醇
抑制素
固醇调节元件
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职称材料
建立CRISPR/Cas9慢病毒系统高效敲除人源AIP1基因
被引量：
4
3
作者
苏甲林
阙彪
+3 位作者
张继勤
李锦辉
王敏
纪卫东
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期219-224,共6页
旨在构建AIP1基因CRISPR/Cas9敲除体系,获得高效、稳定、永久性AIP1敲除的人胚肾细胞株(293T)。针对AIP1的外显子设计3个20 bp的sg RNA(sp1、sp2和sp3)。与PX458载体连接,构建PX458-sg RNA敲除表达载体。T7E1实验评估敲除效率。将敲除...
旨在构建AIP1基因CRISPR/Cas9敲除体系,获得高效、稳定、永久性AIP1敲除的人胚肾细胞株(293T)。针对AIP1的外显子设计3个20 bp的sg RNA(sp1、sp2和sp3)。与PX458载体连接,构建PX458-sg RNA敲除表达载体。T7E1实验评估敲除效率。将敲除效率最高的sg RNA与lenti CRISPRv2慢病毒载体连接,构建lenti CRISPRv2-sg RNA敲除表达载体,将阳性重组质粒导入病毒包装细胞293T中,收集病毒上清液转染293T细胞。对敲除成功的293T细胞通过有限稀释法构建敲除AIP1基因的稳定细胞株。Western blot测定转染后293T细胞中AIP1蛋白的表达量。结果显示,测序证实AIP1的3个靶序列分别正确插入PX458表达载体中,T7E1实验证实AIP1sg RNAsp2靶向敲除效率最高;成功构建lenti CRISPRv2-sg RNAsp2 AIP1敲除表达载体,并包装病毒,感染293T细胞;Western blot证实获得稳定的AIP1基因表达缺失的293T细胞株。建立了能稳定敲除AIP1基因的CRISPR/Cas9慢病毒系统,成功获得AIP1敲除的293T稳定细胞株。
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关键词
CRISPR/Cas9
慢病毒
AIP1
稳定细胞株
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职称材料
题名
上尿路结石术后感染的病原菌及相关因素分析
被引量：
12
1
作者
王文俊
郝宗耀
曾国华
张艳斌
席俊华
樊松
赵磊
王建忠
梁朝朝
机构
安徽
医科大
学
第一
附属
医院
安徽
医科大
学
第一
附属
医院
泌
尿
外科
、安徽
医科大
学
泌
尿
外科
研究所、
泌
尿
生殖系统疾病安徽省
重点
实验室
广州医科大学附属第一医院
、
广东省
泌
尿
外科
重点
实验室
合肥市第二人民
医院
泌
尿
外科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2019年第10期1663-1666,共4页
基金
国家自然科学基金(编号:81630019)
2012年国家临床重点专科建设项目
+1 种基金
广州医科大学中央财政专项开放课题(编号:20160007)
2017年合肥市自主创新政策“借转补”项目(编号:YW201710120005)
文摘
分析上尿路结石(UUC)术后感染的病原菌及相关因素。回顾2 500例行内镜碎石治疗的UUC术后感染发生率,分析所有对象临床特征与术后感染症状发生的关联性,并探讨存在感染症状的患者病原菌分布占比情况,结果显示UUC患者内镜碎石术治疗后感染症状发生率较高,年龄≥60岁、女性、合并糖尿病、结石>5 cm、急性梗阻、手术类型、手术时间延长等项目均对感染的发生有显著影响,UUC合并感染患者主要致病菌为革兰阴性菌,大肠埃希菌是导致感染发生的主要革兰阴性致病菌,粪肠球菌是主要革兰阳性菌致病菌,临床治疗需根据药敏试验结果结合患者自身情况综合制定用药方案,在保证安全性的同时提高治疗效果,改善预后。
关键词
上尿路结石
感染
临床特征
病原菌
药敏试验
Keywords
upper urinary tract stones
infection
clinical characteristics
pathogens
drug sensitivity test
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
Prohibitin启动子中胆固醇活性作用位点研究
2
作者
董培
蒋丽娟
郭胜杰
刘卓炜
李永红
尧凯
秦自科
韩辉
周芳坚
机构
华南肿瘤学国家
重点
实验室
、中山
大学
肿瘤防治中心
泌
尿
外科
广州医科大学附属第一医院广东省泌尿外科重点实验室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期1821-1825,共5页
基金
国家自然科学基金青年基金资助项目(No.81202035)
广东省医学科技基金资助项目(No.B2011109)
文摘
目的:验证抑制素(prohibitin,PHB)基因启动子胆固醇敏感活性作用位点,为PHB在前列腺癌靶向基因治疗中的应用提供实验依据。方法:采用PCR分段扩增PHB启动子,克隆入pGL3-Basic萤光素酶报告基因载体。将构建的重组质粒用脂质体转染至人前列腺癌PC-3细胞,再分别培养于低胆固醇培养基和普通胆固醇培养基中,检测PHB启动子各分段重组质粒萤光素酶活性的变化。限定PHB启动子约200 bp的胆固醇敏感启动区域,找出其中的固醇调节元件(sterol regulatory element,SRE)同源位点并进行点突变,证实PHB基因的胆固醇敏感调控位点。结果:PHB启动子和各分段产物构建质粒完整。与转染完整PHB启动子(pPHB-1192)的PC-3细胞比较,转染pPHB-179(-35/+138)的PC-3细胞萤光素酶活性显著降低(P<0.05)。点突变位于PHB启动子上的-117到-108 bp的SRE可能位点后,与转染pPHB-1192的PC-3细胞比较,转染SRE点突变的PC-3细胞萤光素酶活性显著降低(P<0.05)。结论:PHB启动子在人前列腺癌PC-3细胞中的活性受胆固醇调节。PHB启动子中对胆固醇敏感的作用位点位于-117到-108 bp的SRE同源位点。PHB可能成为前列腺癌靶向基因治疗的有效工具。
关键词
前列腺肿瘤
胆固醇
抑制素
固醇调节元件
Keywords
Prostate neoplasms
Cholesterol
Prohibitin
Sterol regulatory element
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
建立CRISPR/Cas9慢病毒系统高效敲除人源AIP1基因
被引量：
4
3
作者
苏甲林
阙彪
张继勤
李锦辉
王敏
纪卫东
机构
广州医科大学附属第一医院广东省泌尿外科重点实验室
中山
大学
附属
第一
医院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期219-224,共6页
基金
国家自然科学基金项目(81272350
81472999)
文摘
旨在构建AIP1基因CRISPR/Cas9敲除体系,获得高效、稳定、永久性AIP1敲除的人胚肾细胞株(293T)。针对AIP1的外显子设计3个20 bp的sg RNA(sp1、sp2和sp3)。与PX458载体连接,构建PX458-sg RNA敲除表达载体。T7E1实验评估敲除效率。将敲除效率最高的sg RNA与lenti CRISPRv2慢病毒载体连接,构建lenti CRISPRv2-sg RNA敲除表达载体,将阳性重组质粒导入病毒包装细胞293T中,收集病毒上清液转染293T细胞。对敲除成功的293T细胞通过有限稀释法构建敲除AIP1基因的稳定细胞株。Western blot测定转染后293T细胞中AIP1蛋白的表达量。结果显示,测序证实AIP1的3个靶序列分别正确插入PX458表达载体中,T7E1实验证实AIP1sg RNAsp2靶向敲除效率最高;成功构建lenti CRISPRv2-sg RNAsp2 AIP1敲除表达载体,并包装病毒,感染293T细胞;Western blot证实获得稳定的AIP1基因表达缺失的293T细胞株。建立了能稳定敲除AIP1基因的CRISPR/Cas9慢病毒系统,成功获得AIP1敲除的293T稳定细胞株。
关键词
CRISPR/Cas9
慢病毒
AIP1
稳定细胞株
Keywords
CRISPR/Cas9
lentiviral
AIP1
stable cell lines
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
上尿路结石术后感染的病原菌及相关因素分析
王文俊
郝宗耀
曾国华
张艳斌
席俊华
樊松
赵磊
王建忠
梁朝朝
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2019
12
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职称材料
2
Prohibitin启动子中胆固醇活性作用位点研究
董培
蒋丽娟
郭胜杰
刘卓炜
李永红
尧凯
秦自科
韩辉
周芳坚
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
建立CRISPR/Cas9慢病毒系统高效敲除人源AIP1基因
苏甲林
阙彪
张继勤
李锦辉
王敏
纪卫东
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
4
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职称材料
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