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多元醇法合成SPIO标记大鼠ADSCs的成神经诱导潜能及体外MR成像 被引量:2
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作者 马伟琼 谢琦 +3 位作者 张鼎旋 汤间仪 雷正贤 杨逸铭 《中国介入影像与治疗学》 CSCD 北大核心 2015年第11期686-690,共5页
目的 探讨采用多元醇法合成的SPIO标记SD大鼠脂肪来源干细胞(ADSCs),进行成神经诱导和体外MRI成像的可行性。方法 分离、纯化、鉴定SD大鼠来源的ADSCs;确定安全有效的标记浓度和时间后,将SPIO与ADSCs共孵育。体外MRI条件下,采用T2-map... 目的 探讨采用多元醇法合成的SPIO标记SD大鼠脂肪来源干细胞(ADSCs),进行成神经诱导和体外MRI成像的可行性。方法 分离、纯化、鉴定SD大鼠来源的ADSCs;确定安全有效的标记浓度和时间后,将SPIO与ADSCs共孵育。体外MRI条件下,采用T2-mapping序列观察标记组的标记细胞数、标记持久性,以及标记后标记组与未标记组间信号强度和T2值的差异。ICP-AES检测MRI中标记细胞的单铁含量。结果 12μg/ml、25μg/ml PEG/PEI修饰的SPIO和25μg/ml PEG/PVP修饰的SPIO孵育12h后,可安全有效地对ADSCs进行标记;成神经诱导后,神经标记物Nestin、NSE有明显表达。体外MRI显示标记组的T2WI信号强度和T2值与未标记组差异均有统计学意义(P均〈0.001);103个细胞量即可引起T2WI信号和T2值的改变;PEG/PEI修饰的SPIO标记持久性维持到20天,PEG/PVP修饰的标记持久性维持到15天。当铁含量为1.56~1.8pg/cell时,标记细胞的T2值与未标记细胞差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 多元醇法合成的SPIO可直接对ADSCs进行标记,标记后不仅可向神经方向诱导分化,还可进行体外MRI示踪成像。 展开更多
关键词 超顺磁性氧化铁 成神经诱导 脂肪干细胞 磁共振成像 体外
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新型超顺磁性氧化铁标记SD大鼠脂肪干细胞的有效性及安全性研究 被引量:4
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作者 马伟琼 谢琦 +3 位作者 张鼎旋 汤间仪 雷正贤 杨逸铭 《放射学实践》 北大核心 2016年第5期386-392,共7页
目的:采用新型超顺磁性氧化铁对SD大鼠来源的脂肪干细胞(ADSCs)进行标记,并与既往商用SPIO标记效果进行对比,探讨这种新型超顺磁性氧化铁标记的有效性及安全性。方法:分离、纯化、鉴定SD大鼠来源的ADSCs,然后分不同浓度组(0、6、12、25... 目的:采用新型超顺磁性氧化铁对SD大鼠来源的脂肪干细胞(ADSCs)进行标记,并与既往商用SPIO标记效果进行对比,探讨这种新型超顺磁性氧化铁标记的有效性及安全性。方法:分离、纯化、鉴定SD大鼠来源的ADSCs,然后分不同浓度组(0、6、12、25、50和100μg/mL)和时间组(6、12、24和48h)进行标记,通过普鲁士蓝染色测定铁标记率;在不影响细胞形态的前提下,对达到95%以上铁染色率的孵育浓度、时间进行标记安全性检测,包括活力、增殖力、细胞表面抗原表达;采用透射电子显微镜观察标记细胞的超微结构,采用ICP-AES对标记细胞内的铁含量进行测定,并与商用SPIO标记效果进行对比。结果:在无细胞毒性的前提下,新型SPIO达到95%以上铁染色率的孵育浓度是12和25μg/mL,孵育时间是12h;ICP-AES检测显示具有表面正电荷的聚乙二醇(PEG)/聚乙烯亚胺(PEI)修饰的SPIO标记后细胞内的铁含量达到35.4pg/cell(25μg/mL中孵育12h后)和20.16pg/cell(12μg/mL中孵育12h后),并随着孵育浓度的增加,细胞内的铁含量增加;而具有表面零电荷的PEG/聚乙烯吡咯烷酮(PVP)修饰的SPIO标记后的铁含量仅为6.96pg/cell(25μg/mL中孵育12h后);透射电子显微镜显示标记后细胞器结构完整,内吸收的SPIO主要位于细胞质内的囊泡和溶酶体中。结论:新型SPIO在适当孵育浓度和时间下可以安全、快速标记ADSCs;PEG/PEI修饰的SPIO标记效果要远远比既往商用的SPIO快速有效,可作为一种优势的新型磁性标记物用于干细胞标记;而PEG/PVP修饰的SPIO比起既往商用的SPIO并无明显优势,说明表面电荷在细胞标记中占有极其重要的角色。 展开更多
关键词 新型超顺磁性氧化铁 脂肪干细胞 染色与标记 铁含量 表面电荷
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