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高钙离子诱导人肾小管上皮细胞表达MCP-1和HMGB1
被引量：
4
1
作者
王扬
黎承杨
+5 位作者
孙春
邓耀良
曾国华
王翔
陶芝伟
关晓峰
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期726-732,共7页
目的:观察体外培养的人肾小管上皮细胞在高钙离子环境下细胞损伤及炎性因子MCP-1和HMGB1的表达。方法:体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),使用Ca Cl_2配制成不同钙离子浓度的溶液作为刺激剂,实验分为正常对照组(正常培养液)、Ca Ⅰ组(...
目的:观察体外培养的人肾小管上皮细胞在高钙离子环境下细胞损伤及炎性因子MCP-1和HMGB1的表达。方法:体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),使用Ca Cl_2配制成不同钙离子浓度的溶液作为刺激剂,实验分为正常对照组(正常培养液)、Ca Ⅰ组(5 mmol/L Ca^(2+)液)、Ca Ⅱ组(10 mmol/L Ca^(2+)液)和Ca Ⅲ组(15 mmol/L Ca^(2+)液)。各组细胞分别培养至3 h、6 h、9 h时,采用MTT法检测细胞活力。培养6 h时,采用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)进行细胞凋亡染色,观察各组细胞凋亡情况;同时收集细胞培养上清液,采用ELISA法分别检测各组细胞上清液过氧化氢(H_2O_2)和8-异前列烷(8-IP)浓度,微量酶标仪法检测各组细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性。此外,培养6 h时收集各组细胞,采用real-time PCR法检测细胞MCP-1和HMGB1的mRNA表达情况;并收集各组细胞上清液,采用ELISA法检测其MCP-1和HMGB1的含量。结果:随着细胞培养液中钙离子浓度的增加,细胞活力抑制率和细胞凋亡明显增加。LDH活性、细胞上清液H_2O_2的浓度和8-IP的含量在Ca Ⅰ组、Ca Ⅱ组和Ca Ⅲ组均较正常对照组高(P<0.05)。real-time PCR的结果显示,与对照组比较,3个钙离子诱导组细胞MCP-1和HMGB1的mRNA表达水平升高,差异有统计学显著性(P<0.05)。此外,3个钙离子诱导组细胞上清液MCP-1和HMGB1含量均较正常组高(P<0.05)。结论:本研究结果提示,高钙离子可诱导人肾小管上皮细胞出现氧化应激损伤,同时细胞高表达MCP-1和HMGB1。由MCP-1和HMGB1引发的炎症反应可能是高钙尿参与结石形成的重要机制。
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关键词
高钙尿
人肾小管上皮细胞
MCP-1
HMGB1
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职称材料
体外诱导人肾间质成纤维细胞成骨分化
被引量：
1
2
作者
严一杰
黎承杨
+5 位作者
邓耀良
曾国华
陶芝伟
刘云龙
孙春
王扬
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期2259-2264,共6页
目的：观察在体外培养条件下,使用成骨诱导培养液或不同浓度钙离子诱导人肾间质成纤维细胞发生成骨分化的效果,初步探讨肾脏Randall斑形成可能的细胞机制。方法：体外培养人肾间质成纤维细胞,实验分为5组：成骨诱导组（加成骨诱导液）...
目的：观察在体外培养条件下,使用成骨诱导培养液或不同浓度钙离子诱导人肾间质成纤维细胞发生成骨分化的效果,初步探讨肾脏Randall斑形成可能的细胞机制。方法：体外培养人肾间质成纤维细胞,实验分为5组：成骨诱导组（加成骨诱导液）、CaⅠ组（加0.5 mmol/L Ca2＋液）、CaⅡ组（加1.5 mmol/L Ca2＋液）、CaⅢ组（加2.5 mmol/L Ca2＋液）和对照组（加PBS）。各组细胞分别培养至第1、3、6、9天时,采用MTT法检测细胞活力;诱导至第9天时,用细胞钙茜素红染色液和钙钴法磷酸酶染色液对各组细胞进行染色,观察钙结节形成和碱性磷酸酶的表达情况。另外,分别采用real-time PCR和Western blot检测各组细胞不同时间点Runt相关转录因子2（Runx2）的mRNA和蛋白表达水平。结果：在1.5 mmol/L和2.5 mmol/L Ca2＋浓度条件下细胞的活力明显受抑制。细胞染色结果证实成骨诱导液组和钙离子组均可以见到典型的红色钙结节和黑色块状的硫化钴沉淀物。成骨诱导组细胞Runx2的mRNA和蛋白相对表达量（0~9 d）逐渐升高（P〈0.05）;诱导至第9天时,3个钙离子组细胞Runx2的mRNA和蛋白表达呈浓度依赖性升高（P〈0.05）。结论：在体外培养环境下,人肾成纤维细胞可以在成骨诱导培养液的刺激作用下发生成骨分化;另外,在高钙离子环境,人肾成纤维细胞也发生了类似的成骨分化。肾乳头组织中的成纤维细胞在高钙离子等因素的作用下发生成骨分化,这可能是肾脏Randall斑形成的细胞学基础。
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关键词
人肾成纤维细胞
成骨分化
肾乳头钙化斑
高钙尿症
肾结石
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职称材料
题名
高钙离子诱导人肾小管上皮细胞表达MCP-1和HMGB1
被引量：
4
1
作者
王扬
黎承杨
孙春
邓耀良
曾国华
王翔
陶芝伟
关晓峰
机构
广西
医科大
学
第一
附属
医院
泌
尿
外科
广州医科大学第一附属医院泌尿外科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第4期726-732,共7页
基金
广西自然科学基金资助项目(No.2011GXNSFA018177)
广东省泌尿外科重点实验室资助项目(No.2010A060801016)
文摘
目的:观察体外培养的人肾小管上皮细胞在高钙离子环境下细胞损伤及炎性因子MCP-1和HMGB1的表达。方法:体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),使用Ca Cl_2配制成不同钙离子浓度的溶液作为刺激剂,实验分为正常对照组(正常培养液)、Ca Ⅰ组(5 mmol/L Ca^(2+)液)、Ca Ⅱ组(10 mmol/L Ca^(2+)液)和Ca Ⅲ组(15 mmol/L Ca^(2+)液)。各组细胞分别培养至3 h、6 h、9 h时,采用MTT法检测细胞活力。培养6 h时,采用4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)进行细胞凋亡染色,观察各组细胞凋亡情况;同时收集细胞培养上清液,采用ELISA法分别检测各组细胞上清液过氧化氢(H_2O_2)和8-异前列烷(8-IP)浓度,微量酶标仪法检测各组细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性。此外,培养6 h时收集各组细胞,采用real-time PCR法检测细胞MCP-1和HMGB1的mRNA表达情况;并收集各组细胞上清液,采用ELISA法检测其MCP-1和HMGB1的含量。结果:随着细胞培养液中钙离子浓度的增加,细胞活力抑制率和细胞凋亡明显增加。LDH活性、细胞上清液H_2O_2的浓度和8-IP的含量在Ca Ⅰ组、Ca Ⅱ组和Ca Ⅲ组均较正常对照组高(P<0.05)。real-time PCR的结果显示,与对照组比较,3个钙离子诱导组细胞MCP-1和HMGB1的mRNA表达水平升高,差异有统计学显著性(P<0.05)。此外,3个钙离子诱导组细胞上清液MCP-1和HMGB1含量均较正常组高(P<0.05)。结论:本研究结果提示,高钙离子可诱导人肾小管上皮细胞出现氧化应激损伤,同时细胞高表达MCP-1和HMGB1。由MCP-1和HMGB1引发的炎症反应可能是高钙尿参与结石形成的重要机制。
关键词
高钙尿
人肾小管上皮细胞
MCP-1
HMGB1
Keywords
Hypercalciuria
Human renal epithelial cells
MCP-1
HMGB1
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
在线阅读
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职称材料
题名
体外诱导人肾间质成纤维细胞成骨分化
被引量：
1
2
作者
严一杰
黎承杨
邓耀良
曾国华
陶芝伟
刘云龙
孙春
王扬
机构
广西
医科大
学
第一
附属
医院
泌
尿
外科
广州医科大学第一附属医院泌尿外科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期2259-2264,共6页
基金
广西自然科学基金资助项目(No.2011GXNSFA018177)
广东省泌尿外科重点实验室(No.2010A060801016)资助
文摘
目的：观察在体外培养条件下,使用成骨诱导培养液或不同浓度钙离子诱导人肾间质成纤维细胞发生成骨分化的效果,初步探讨肾脏Randall斑形成可能的细胞机制。方法：体外培养人肾间质成纤维细胞,实验分为5组：成骨诱导组（加成骨诱导液）、CaⅠ组（加0.5 mmol/L Ca2＋液）、CaⅡ组（加1.5 mmol/L Ca2＋液）、CaⅢ组（加2.5 mmol/L Ca2＋液）和对照组（加PBS）。各组细胞分别培养至第1、3、6、9天时,采用MTT法检测细胞活力;诱导至第9天时,用细胞钙茜素红染色液和钙钴法磷酸酶染色液对各组细胞进行染色,观察钙结节形成和碱性磷酸酶的表达情况。另外,分别采用real-time PCR和Western blot检测各组细胞不同时间点Runt相关转录因子2（Runx2）的mRNA和蛋白表达水平。结果：在1.5 mmol/L和2.5 mmol/L Ca2＋浓度条件下细胞的活力明显受抑制。细胞染色结果证实成骨诱导液组和钙离子组均可以见到典型的红色钙结节和黑色块状的硫化钴沉淀物。成骨诱导组细胞Runx2的mRNA和蛋白相对表达量（0~9 d）逐渐升高（P〈0.05）;诱导至第9天时,3个钙离子组细胞Runx2的mRNA和蛋白表达呈浓度依赖性升高（P〈0.05）。结论：在体外培养环境下,人肾成纤维细胞可以在成骨诱导培养液的刺激作用下发生成骨分化;另外,在高钙离子环境,人肾成纤维细胞也发生了类似的成骨分化。肾乳头组织中的成纤维细胞在高钙离子等因素的作用下发生成骨分化,这可能是肾脏Randall斑形成的细胞学基础。
关键词
人肾成纤维细胞
成骨分化
肾乳头钙化斑
高钙尿症
肾结石
Keywords
Human renal interstitial fibroblasts
Osteogenic differentiation
Randall＇s plaque
Hypercalciuria
Renal calculi
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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作者
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高钙离子诱导人肾小管上皮细胞表达MCP-1和HMGB1
王扬
黎承杨
孙春
邓耀良
曾国华
王翔
陶芝伟
关晓峰
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
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体外诱导人肾间质成纤维细胞成骨分化
严一杰
黎承杨
邓耀良
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