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TRPC6在肺部的生理与病理生理功能 被引量:3
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作者 周丽芬 陈庆梓 李建华 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期77-80,F0003,共5页
经典瞬时受体电位(transient receptor potential canonical,TRPC)通道是一类非选择性钙离子通道,TRPC6是TRPC家族的成员之一,其基因编码的蛋白在人体脑、肾、肝和肺等多个器官均有表达。TRPC6不仅是肺中表达最丰富的TRPC通道,也是目前... 经典瞬时受体电位(transient receptor potential canonical,TRPC)通道是一类非选择性钙离子通道,TRPC6是TRPC家族的成员之一,其基因编码的蛋白在人体脑、肾、肝和肺等多个器官均有表达。TRPC6不仅是肺中表达最丰富的TRPC通道,也是目前肺部疾病中研究最多的TRPC通道。TRPC6参与动物体内许多重要的生理和病理调节过程,TRPC6的基因突变或过表达可引起胞内钙离子信号通路异常,从而导致多种病理生理改变。肺部疾病的病理生理过程有多种细胞共同参与。TRPC6在不同的细胞中表达不同,表现的生理与病理生理功能则有差异。 展开更多
关键词 TRPC6 肺脏 细胞 功能
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肺癌转移相关microRNA miR-29b的生物信息学分析 被引量:4
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作者 王红艳 郑少秋 +1 位作者 涂永生 张雅洁 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第16期1021-1025,共5页
目的:应用生物信息学分析A549细胞中在CD133阳性低表达的miR-29b的靶基因及其功能,为以miR-29b为靶点的肿瘤研究提供线索。方法:利用miRNA PCR芯片筛选A549细胞中CD133阳性和CD133阴性差异表达的miRNA,选用miRecords预测miR-29b的靶基因... 目的:应用生物信息学分析A549细胞中在CD133阳性低表达的miR-29b的靶基因及其功能,为以miR-29b为靶点的肿瘤研究提供线索。方法:利用miRNA PCR芯片筛选A549细胞中CD133阳性和CD133阴性差异表达的miRNA,选用miRecords预测miR-29b的靶基因,合并已证实的靶基因,利用GOEAST和DAVID数据库对所得靶基因进行功能富集分析和信号转导通路富集分析。结果:A549细胞中与CD133阴性比较,miR-29b在CD133阳性中表达下调。miR-29b靶基因有106个,其靶基因功能富集于结合和细胞外基质形成等作用(P<0.01);信号转导通路显著富集于JAK-STAT和TGF-β等信号转导通路(P<0.05)。结论:miR-29b可能与肺癌转移相关,miR-29b的靶基因显著富集在与肿瘤相关的信号通路中。 展开更多
关键词 miR-29b 肺癌 靶基因 生物信息学
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基因芯片筛选CD133^+/CD133^-肺腺癌细胞中新的耐药基因 被引量:3
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作者 王红艳 郑少秋 +1 位作者 涂永生 张雅洁 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期437-443,共7页
背景与目的肿瘤干细胞可能是肿瘤多药耐药的主要原因,CD133是目前较为公认的肿瘤干细胞标记物。本研究旨在应用功能分类基因芯片筛选CD133+和CD133-肺腺癌细胞中差异表达的肿瘤耐药基因,寻求新的肺癌耐药相关基因。方法免疫磁珠分选法分... 背景与目的肿瘤干细胞可能是肿瘤多药耐药的主要原因,CD133是目前较为公认的肿瘤干细胞标记物。本研究旨在应用功能分类基因芯片筛选CD133+和CD133-肺腺癌细胞中差异表达的肿瘤耐药基因,寻求新的肺癌耐药相关基因。方法免疫磁珠分选法分选A549细胞,采用功能分类基因芯片筛选CD133+和CD133-肺腺癌细胞中差异表达的肿瘤耐药基因,并使用RT-qPCR验证。顺铂半数有效抑制浓度(half inhibiting concentration,IC50)、阿霉素IC50作用A549细胞48 h后,RT-qPCR检测肿瘤耐药基因CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、GSK3α、PPARα和PPARβ/δ的表达变化。结果共筛查出31个差异表达的肿瘤耐药基因,与CD133-细胞相比,CD133+细胞有30个基因表达上调,1个基因表达下调。RT-qPCR结果与芯片一致。A549细胞经1.97μg/mL顺铂或0.61μg/mL阿霉素作用48 h后,CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、GSK3α、PPARα和PPARβ/δ等肿瘤耐药基因表达上调。结论利用功能分类基因芯片筛选出31个可能与CD133+肺腺癌细胞耐药相关的基因,其中CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、GSK3α、PPARα和PPARβ/δ为新发现的肺癌耐药相关基因。 展开更多
关键词 CD133 肺肿瘤 耐药 肿瘤耐药基因芯片
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CaN-NFATc3途径在大鼠腹主动脉球囊扩张术后再狭窄中的作用 被引量:3
4
作者 李晓云 熊龙根 +2 位作者 黎德恩 赵路宁 董颀 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1561-1565,共5页
目的研究钙调神经磷酸酶(CaN)及其下游活化T细胞核因子(NFATc3)在球囊扩张术后再狭窄中的作用,为防治血管再狭窄提供新的理论依据。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=12)、球囊组(n=12)、环孢菌素(Cs A)组(n=12)。球囊组大鼠用球囊扩... 目的研究钙调神经磷酸酶(CaN)及其下游活化T细胞核因子(NFATc3)在球囊扩张术后再狭窄中的作用,为防治血管再狭窄提供新的理论依据。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=12)、球囊组(n=12)、环孢菌素(Cs A)组(n=12)。球囊组大鼠用球囊扩张术损伤腹主动脉;Cs A组大鼠从手术前3d至实验结束,每天灌喂Cs A12.5 mg/(kg.d)-1。球囊损伤术后30 d取材,血管组织作苏木素—伊红(HE)染色、免疫组化检测CaN在血管壁中的水平,光学显微镜观察病理学改变;Rea1 time PCR技术检测血管壁组织中CaN、NFATc3的m RNA表达;Elisa法测定血清MCP-1水平。结果球囊损伤后血管壁出现新生内膜,且厚度不均;Cs A组与球囊损伤组相比较内膜增生、内膜/中膜厚度明显减轻(P<0.05)。与假手术组相比,球囊损伤组血管壁组织CaN蛋白及m RNA表达均明显升高、NFATc3的m RNA表达显著增加,血浆炎症因子MCP-1水平也升高(P<0.05)。Cs A组上述各项指标均显著低于球囊损伤组(P<0.05)。结论 CaN-NFATc3途径参与大鼠球囊损伤术后再狭窄的发生;Cs A通过抑制该通路减轻再狭窄的形成。 展开更多
关键词 再狭窄 钙调神经磷酸酶 活化T细胞核因子 环孢菌素
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沉默TREM-2对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞迁移和侵袭的影响 被引量:5
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作者 黄生辉 李建华 +4 位作者 张玮琼 刘贵旺 许锦煌 郑沛中 黄建荣 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期134-139,共6页
目的:应用RNA干扰(RNAi)技术沉默类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)髓样细胞触发受体2(TREM-2)的表达,探讨TREM-2基因沉默对RA-FLS迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法:向RAFLS转染特异性的TREM-2 siRNA,利用RT-PCR法和Western ... 目的:应用RNA干扰(RNAi)技术沉默类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)髓样细胞触发受体2(TREM-2)的表达,探讨TREM-2基因沉默对RA-FLS迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法:向RAFLS转染特异性的TREM-2 siRNA,利用RT-PCR法和Western blot法检测沉默效果;CCK-8法检测各组细胞生长情况;Transwell小室测定细胞的迁移和侵袭能力;ELISA法检测细胞MMP-2和MMP-9的分泌水平;Western blot法分析沉默TREM-2基因对细胞PI3K/AKT通路的影响。结果:TREM-2 siRNA能显著降低RA-FLS中TREM2 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。沉默TREM-2基因后,各时点各组细胞的活力未见明显差异;特异性干扰组RA-FLS的迁移细胞数目与空白组和control siRNA组相比明显增多(P<0.05);TREM-2 siRNA组侵袭细胞数目相比空白组和control siRNA组明显增多(P<0.05);TREM-2 siRNA干扰后RA-FLS分泌的MMP-2显著增加(P<0.05)而MMP-9未见明显变化;特异性转染后的RA-FLS相对于对照组PI3K/AKT的磷酸化水平显著增强(P<0.05)。结论:TREM-2可能通过调节PI3K/AKT通路的活化对RA-FLS的迁移和侵袭能力发挥着重要作用。 展开更多
关键词 髓样细胞触发受体2 类风湿关节炎 滑膜细胞 细胞迁移 细胞侵袭 PI3K/AKT通路
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NF-κB在糖尿病性神经痛中的作用及机制 被引量:2
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作者 黄阳亮 钟祎 胡景鑫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1784-1788,共5页
目的:探讨NF-κB在糖尿病神经痛中的作用及机制。方法:用腹腔注射链脲霉素(streptozocin,STZ)的方法复制大鼠糖尿病模型;痛行为学方法检测大鼠双侧后肢机械性撤足阈值和热撤足阈值;Western blotting方法检测大鼠脊髓L4和L5背根神经节(do... 目的:探讨NF-κB在糖尿病神经痛中的作用及机制。方法:用腹腔注射链脲霉素(streptozocin,STZ)的方法复制大鼠糖尿病模型;痛行为学方法检测大鼠双侧后肢机械性撤足阈值和热撤足阈值;Western blotting方法检测大鼠脊髓L4和L5背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中p-NF-κB和t-NF-κB的表达。免疫组织化学方法检测抑制NF-κB对糖尿病性神经痛大鼠脊髓L4和L5 DRG中钠通道Nav1.7表达的影响。结果:注射STZ后第4周,大鼠双侧下肢机械性撤足阈值和热撤足阈值均明显下降,持续至术后12周;糖尿病性神经痛大鼠L4和L5DRG中p-NF-κB表达明显增加,鞘内注射NF-κB抑制剂PDTC可明显抑制糖尿病性神经痛大鼠L4和L5 DRG中p-NF-κB和Nav1.7的表达上调,大鼠后肢痛觉过敏现象也明显减轻。结论:L4和L5 DRG中p-NF-κB表达上调与糖尿病性神经痛的产生密切相关,抑制NF-κB活化可以阻断Nav1.7的表达上调并且改善大鼠痛觉过敏的症状。 展开更多
关键词 糖尿病性神经痛 NF-ΚB 电压门控性钠通道 背根神经节
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Ⅰ期单侧后入路保留椎板切除上颈椎神经鞘膜瘤的解剖学特点及疗效分析 被引量:2
7
作者 黄阳亮 钟祎 刘少喻 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第5期568-571,共4页
目的评价Ⅰ期一侧后入路保留椎板切除C_(1/2)神经鞘膜瘤的解剖学特点及疗效。方法2009年1月至2014年1月对符合以下手术指征患者行Ⅰ期单侧后入路保留椎板切除C_(1/2)神经鞘膜瘤:(1)硬膜外占位;(2)经C_(1/2)椎板间隙偏一侧向外生长;(3)... 目的评价Ⅰ期一侧后入路保留椎板切除C_(1/2)神经鞘膜瘤的解剖学特点及疗效。方法2009年1月至2014年1月对符合以下手术指征患者行Ⅰ期单侧后入路保留椎板切除C_(1/2)神经鞘膜瘤:(1)硬膜外占位;(2)经C_(1/2)椎板间隙偏一侧向外生长;(3)具备神经鞘膜瘤影像学特征。共收治该类患者9例(男5例,女4例,平均年龄47.2岁,25至74岁)。收集颈椎JOA评分、术后轴性痛发生率、影像学特点、手术时间、出血量、并发症、末次随访颈椎侧位片寰齿前间隙等临床资料,经随访后予以分析总结。结果9例病例均得以随访,随访时间6至48个月,平均20个月。未出现复发病例,未出现颈椎失稳以及术后轴性疼痛病例,末次随访寰齿前间隙均小于2 mm。有神经功能损害的8例患者术前JOA评分(11.3±1.64),末次随访JOA评分(15.4±0.70),差异有统计学意义(P<0.05)。结论术前通过MRI判断上颈椎肿瘤类型,对符合手术指征的患者行Ⅰ期单侧后入路保留椎板切除上颈椎神经鞘膜瘤,术后疗效确切,可避免术后轴性痛,预后良好。 展开更多
关键词 上颈椎 神经鞘膜瘤 解剖学 后入路
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硫化氢对臭氧致小鼠气道炎症的影响 被引量:4
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作者 周玉波 扶招弟 +3 位作者 周丽芬 陈庆梓 杨春涛 李建华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1837-1842,共6页
目的:研究硫化氢(H_2S)对臭氧(O_3)暴露所致小鼠气道炎症的影响,并探究其机制。方法:32只C57BL/6小鼠随机分为正常对照(control)组、O_3组、硫氢化钠(NaHS)+O_3组以及NaHS组。第1、3、5天将O_3组和NaHS+O_3组小鼠置于2.14 mg/m^3O_3环... 目的:研究硫化氢(H_2S)对臭氧(O_3)暴露所致小鼠气道炎症的影响,并探究其机制。方法:32只C57BL/6小鼠随机分为正常对照(control)组、O_3组、硫氢化钠(NaHS)+O_3组以及NaHS组。第1、3、5天将O_3组和NaHS+O_3组小鼠置于2.14 mg/m^3O_3环境中暴露3 h,同时control组和NaHS组置于新鲜空气中暴露3 h。每次暴露前30 min,NaHS+O_3组和Na HS组小鼠腹腔注射Na HS(14μmol/kg)。末次暴露24 h后测定小鼠气道反应性,收集支气管肺泡灌洗液用于炎性细胞计数和总蛋白测定,收集肺组织标本行HE染色观察形态改变。测定肺组织中IL-6、IL-8、丙二醛(MDA)和NF-κB p65蛋白水平。结果:与control组相比,O_3组的气道反应性、炎性细胞数、总蛋白浓度和炎症评分,以及IL-6、IL-8、MDA和NF-κB p65蛋白水平明显增高,NaHS+O_3组则明显低于O_3组。结论:H_2S显著减轻了O_3暴露所致气道炎症反应,可能与抑制脂质过氧化和降低NF-κB表达相关。 展开更多
关键词 硫化氢 臭氧 气道炎症
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TRPC6在IL-1β诱导类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖中的作用 被引量:4
9
作者 刘贵旺 徐大为 +5 位作者 张玮琼 许锦煌 郑沛中 叶培 李建华 黄建荣 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期627-634,共8页
目的:应用RNA干扰技术研究瞬时受体电位通道6(TRPC6)对IL-1β诱导的类风湿关节炎(RA)成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖的影响。方法:RT-qPCR法检测RA和骨关节炎(OA)患者滑膜组织中TRPC6 mRNA的表达水平。组织块联合酶消化法培养RA-FLS... 目的:应用RNA干扰技术研究瞬时受体电位通道6(TRPC6)对IL-1β诱导的类风湿关节炎(RA)成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖的影响。方法:RT-qPCR法检测RA和骨关节炎(OA)患者滑膜组织中TRPC6 mRNA的表达水平。组织块联合酶消化法培养RA-FLS。流式细胞术鉴定RA-FLS。将不同浓度(0、0.25、0.5、1、2、4、8、16μg/L)的重组人IL-1β与RA-FLS共培养36 h,CCK-8法检测细胞活力的改变;16μg/L的IL-1β作用RA-FLS不同时间(12、24、36、48、60、72 h),CCK-8法检测细胞活力的改变。特异性TRPC6-siRNA转染RA-FLS后,采用RT-qPCR和Western blotting检测沉默效率。在IL-1β存在和不存在的条件下,CCK-8法、Ed U标记法和流式细胞术检测TRPC6干扰组与对照组的细胞活力、Ed U阳性细胞比率和(G_2/M+S)期比率的差异。结果:RA患者滑膜组织中TRPC6的mRNA表达水平相对于OA患者明显增加(P<0.05)。TRPC6-siRNA能显著降低RA-FLS中TRPC6 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。IL-1β能诱导RA-FLS增殖(P<0.05)。沉默TRPC6后,在IL-1β的诱导环境下,特异性干扰组RA-FLS的活力、Ed U阳性细胞比率和(G_2/M+S)期比率与空白组和对照组相比均明显降低(P<0.05),而在不含IL-1β的条件下,干扰组与空白组和对照组相比差异均无统计学显著性。结论:TRPC6参与IL-1β诱导的RA-FLS增殖过程,沉默TRPC6能降低IL-1β诱导的RA-FLS增殖水平。 展开更多
关键词 瞬时受体电位通道6 类风湿关节炎 滑膜细胞 细胞增殖
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四硫代钼酸铵作为新型硫化氢供体的鉴定及其对皮肤细胞的保护作用
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作者 孟富慧 陈利 +5 位作者 徐适 鲜明 张辉 李建华 董颀 杨春涛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2271-2276,共6页
目的:本研究旨在检测金属络合物四硫代钼酸铵(ATTM)的硫化氢(H2S)释放能力并进一步观察其减轻氧化应激诱导的皮肤细胞损伤的作用。方法:反应瓶法检测ATTM在细胞培养基中释放的H2S,二氯二氢荧光素二乙酸酯或罗丹明123染色结合荧光... 目的:本研究旨在检测金属络合物四硫代钼酸铵(ATTM)的硫化氢(H2S)释放能力并进一步观察其减轻氧化应激诱导的皮肤细胞损伤的作用。方法:反应瓶法检测ATTM在细胞培养基中释放的H2S,二氯二氢荧光素二乙酸酯或罗丹明123染色结合荧光显微镜照相术分别检测细胞内活性氧簇(ROS)的含量和线粒体膜电位(ΔΨm),用试剂盒检测细胞存活率和乳酸脱氢酶(LDH)的释放。结果:与H2S供体GYY4137类似,ATTM在细胞培养基中可剂量依赖性地释放H2S。在25~400μmol/L的浓度范围内,ATTM处理对人皮肤细胞(Ha Ca T细胞)的存活率无明显影响(P〉0.05)。紫外线照射或外源性给予ROS供体(过氧化氢,H2O2)处理均可增加Ha Ca T细胞内ROS的含量。400μmol/L H2O2处理可明显降低Ha Ca T细胞的存活率(P〈0.01),而在H2O2处理前给予ATTM预处理,细胞存活率明显提高,其中在100和200μmol/L浓度时ATTM具有最好的细胞保护作用(P〈0.01)。400μmol/L H2O2处理还可损害细胞的ΔΨm和细胞膜并使LDH释放增加(P〈0.01)。而在细胞遭受损伤前给予200μmol/L ATTM预处理可明显改善ΔΨm的水平(P〈0.05)并抑制LDH从细胞内释放(P〈0.01)。结论:ATTM具有释放H2S的能力并可保护人皮肤细胞对抗氧化应激诱导的损伤效应。 展开更多
关键词 HACAT细胞 硫化氢 四硫代钼酸铵 氧化应激
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