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喉癌Hep-2细胞来源的exosomes提取和鉴定
1
作者
吉晓滨
梁俊毅
+1 位作者
刘启才
谢景华
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
CSCD
2015年第4期170-172,共3页
目的观察喉癌Hep-2细胞能否分泌exosomes,并从形态学角度鉴定。方法大量培养喉癌Hep-2细胞,热休克处理,收集培养上清液。通过3/0.8μm深层过滤小型滤芯对上清液进行预处理,去除直径较大的颗粒和杂质,利用超滤离心技术联合蔗糖密度梯度...
目的观察喉癌Hep-2细胞能否分泌exosomes,并从形态学角度鉴定。方法大量培养喉癌Hep-2细胞,热休克处理,收集培养上清液。通过3/0.8μm深层过滤小型滤芯对上清液进行预处理,去除直径较大的颗粒和杂质,利用超滤离心技术联合蔗糖密度梯度离心法,将上清液浓缩提纯,透射电镜对exosomes做鉴定。结果成功从喉癌Hep-2细胞培养上清液中分离提取出exosomes,电镜下观察exosomes呈圆形或椭圆形双层膜的囊泡状结构,直径约20~100 nm,密度较高,分散均匀。结论较先发现喉癌细胞自身能分泌exosomes,为喉癌免疫治疗做新的探求。
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关键词
肿瘤
鳞状细胞
细胞
培养的
显微镜检查
电子
透射
蔗糖密度梯度离心
超滤离心
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职称材料
MiR-499促进MSCs心肌样细胞分化及其机制的初步探讨
被引量：
2
2
作者
邓菊
区彩文
+3 位作者
张建武
吴智业
刘启才
陈敏生
《广州医学院学报》
2014年第1期1-4,共4页
目的:探讨miR-499体外是否能诱导大鼠骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化,并验证其是否通过靶作用于结肠腺瘤样息肉(APC)调控WNT信号通路发挥作用。方法:在MSCs中过表达miR-499后,Q-RT-PCR检测心肌特异性基因GATA4、Nkx2.5、c...
目的:探讨miR-499体外是否能诱导大鼠骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化,并验证其是否通过靶作用于结肠腺瘤样息肉(APC)调控WNT信号通路发挥作用。方法:在MSCs中过表达miR-499后,Q-RT-PCR检测心肌特异性基因GATA4、Nkx2.5、cTnI及miR-499及其靶基因APC的表达情况,双荧光素酶报告系统验证靶基因APC。结果:niR-499、GATA4、Nk2.5、cTnI表达明显上调(P<0.05),但APC表达无明显差异(P=0.3);双荧光素酶报告系统结果显示与转染空载体组比较荧光素酶活性无明显变化(P=0.37);结论:miR-499可促进MSCs向心肌样细胞分化,但不通过靶作用于APC发挥促分化作用。
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关键词
MICRORNA
骨髓间充质干细胞
心肌样细胞
WNT信号转导通路
大鼠
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职称材料
Caveolin-1基因重组腺病毒表达系统的构建与鉴定
3
作者
李二毛
沈飞
+4 位作者
张焕玲
蔡文松
朱光辉
刘启才
徐波
《广州医科大学学报》
2014年第4期9-12,18,共5页
目的:构建靶向肝脏的小凹蛋白-1 caveolin-1基因重组腺病毒并对该表达体系进行鉴定。方法:根据GeneBanks中caveolin-1的序列设计引物,以大鼠肝组织提取总RNA为模板,PCR扩增caveolin-1,并将caveolin-1序列克隆至pAdTrack-CMV质粒中,再与p...
目的:构建靶向肝脏的小凹蛋白-1 caveolin-1基因重组腺病毒并对该表达体系进行鉴定。方法:根据GeneBanks中caveolin-1的序列设计引物,以大鼠肝组织提取总RNA为模板,PCR扩增caveolin-1,并将caveolin-1序列克隆至pAdTrack-CMV质粒中,再与pAd-easy质粒进行同源重组构建重组腺病毒载体,利用脂质体法于293细胞中进行包装重组腺病毒,RT-PCR检测caveolin-1基因的转录,Westernblotting检测caveolin-1蛋白的表达情况。结果:PCR及Western blotting检测结果表明成功构建出caveolin-1基因重组腺病毒。结论:成功构建出caveolin-1基因重组腺病毒,为进一步研究caveolin-1基因在肝纤维化及肝硬化疾病中的作用机制打下实验基础。
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关键词
小凹蛋白-1
腺病毒
肝纤维化
大鼠肝组织
CAVEOLIN-1
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职称材料
题名
喉癌Hep-2细胞来源的exosomes提取和鉴定
1
作者
吉晓滨
梁俊毅
刘启才
谢景华
机构
广州
市第一人民医院耳鼻咽喉科
广州医科大学
实验
医学
研究
中心
出处
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
CSCD
2015年第4期170-172,共3页
基金
广东省科技厅产业技术研究与开发资金计划项目(2012B031800340)
广州市科技和信息化局社会发展应用基础研究专项(2013J4100024)联合资助
文摘
目的观察喉癌Hep-2细胞能否分泌exosomes,并从形态学角度鉴定。方法大量培养喉癌Hep-2细胞,热休克处理,收集培养上清液。通过3/0.8μm深层过滤小型滤芯对上清液进行预处理,去除直径较大的颗粒和杂质,利用超滤离心技术联合蔗糖密度梯度离心法,将上清液浓缩提纯,透射电镜对exosomes做鉴定。结果成功从喉癌Hep-2细胞培养上清液中分离提取出exosomes,电镜下观察exosomes呈圆形或椭圆形双层膜的囊泡状结构,直径约20~100 nm,密度较高,分散均匀。结论较先发现喉癌细胞自身能分泌exosomes,为喉癌免疫治疗做新的探求。
关键词
肿瘤
鳞状细胞
细胞
培养的
显微镜检查
电子
透射
蔗糖密度梯度离心
超滤离心
Keywords
Neoplasms,Squamous Cell
Cells,Cultured
Microscopy,Electron,Transmission
sucrose density gradient centrifugation
ultrafiltration centrifugation
分类号
R739.65 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
MiR-499促进MSCs心肌样细胞分化及其机制的初步探讨
被引量：
2
2
作者
邓菊
区彩文
张建武
吴智业
刘启才
陈敏生
机构
广州医科大学
附属第二医院心内科
南方
医科大
学珠江医院心内科
广州医科大学实验医学中心
出处
《广州医学院学报》
2014年第1期1-4,共4页
基金
国家自然科学基金(31271053)
广东省自然学基金(52013010015314)
广东省中医药局项目(20122098)
文摘
目的:探讨miR-499体外是否能诱导大鼠骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化,并验证其是否通过靶作用于结肠腺瘤样息肉(APC)调控WNT信号通路发挥作用。方法:在MSCs中过表达miR-499后,Q-RT-PCR检测心肌特异性基因GATA4、Nkx2.5、cTnI及miR-499及其靶基因APC的表达情况,双荧光素酶报告系统验证靶基因APC。结果:niR-499、GATA4、Nk2.5、cTnI表达明显上调(P<0.05),但APC表达无明显差异(P=0.3);双荧光素酶报告系统结果显示与转染空载体组比较荧光素酶活性无明显变化(P=0.37);结论:miR-499可促进MSCs向心肌样细胞分化,但不通过靶作用于APC发挥促分化作用。
关键词
MICRORNA
骨髓间充质干细胞
心肌样细胞
WNT信号转导通路
大鼠
Keywords
microRNA
mesenchymal stem cells
eardiomyocyte-like cells
WNT signaling pathway
rat
分类号
R319 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
Caveolin-1基因重组腺病毒表达系统的构建与鉴定
3
作者
李二毛
沈飞
张焕玲
蔡文松
朱光辉
刘启才
徐波
机构
广州医科大学实验医学中心
广州
市第一人民医院普通外科
出处
《广州医科大学学报》
2014年第4期9-12,18,共5页
基金
广州市医药卫生科技重点项目(201102A212018)
王宝恩肝纤维化研究基金(20100020)
+1 种基金
广州市卫生局中西医结合科研项目(20112A011010)
广东省科技计划项目(2009B060700019)
文摘
目的:构建靶向肝脏的小凹蛋白-1 caveolin-1基因重组腺病毒并对该表达体系进行鉴定。方法:根据GeneBanks中caveolin-1的序列设计引物,以大鼠肝组织提取总RNA为模板,PCR扩增caveolin-1,并将caveolin-1序列克隆至pAdTrack-CMV质粒中,再与pAd-easy质粒进行同源重组构建重组腺病毒载体,利用脂质体法于293细胞中进行包装重组腺病毒,RT-PCR检测caveolin-1基因的转录,Westernblotting检测caveolin-1蛋白的表达情况。结果:PCR及Western blotting检测结果表明成功构建出caveolin-1基因重组腺病毒。结论:成功构建出caveolin-1基因重组腺病毒,为进一步研究caveolin-1基因在肝纤维化及肝硬化疾病中的作用机制打下实验基础。
关键词
小凹蛋白-1
腺病毒
肝纤维化
大鼠肝组织
CAVEOLIN-1
Keywords
adenovirus
liver fibrosis
rat liver tissue
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
喉癌Hep-2细胞来源的exosomes提取和鉴定
吉晓滨
梁俊毅
刘启才
谢景华
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
CSCD
2015
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
MiR-499促进MSCs心肌样细胞分化及其机制的初步探讨
邓菊
区彩文
张建武
吴智业
刘启才
陈敏生
《广州医学院学报》
2014
2
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职称材料
3
Caveolin-1基因重组腺病毒表达系统的构建与鉴定
李二毛
沈飞
张焕玲
蔡文松
朱光辉
刘启才
徐波
《广州医科大学学报》
2014
0
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职称材料
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