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应用酵母双杂交技术筛选与RANK蛋白新基序IVVY相互作用的蛋白
1
作者
王顺清
钟雯婷
+2 位作者
邓晖
毛平
许艳丽
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期730-732,737,共4页
目的:应用酵母双杂交技术筛选小鼠巨噬细胞中与核因子κB受体激活因子(RANK)蛋白上新基序IVVY相互作用的蛋白,以探寻RANKL/RANK系统中介导破骨细胞形成的RANK下游新信号转导蛋白。方法:应用GAL4酵母双杂交系统3,构建仅包含编码新基序535...
目的:应用酵母双杂交技术筛选小鼠巨噬细胞中与核因子κB受体激活因子(RANK)蛋白上新基序IVVY相互作用的蛋白,以探寻RANKL/RANK系统中介导破骨细胞形成的RANK下游新信号转导蛋白。方法:应用GAL4酵母双杂交系统3,构建仅包含编码新基序535IVVY538的一小段RANK的cDNA片段为诱饵质粒pGBKT7-IVVY,并与巨噬细胞cDNA文库质粒pGADT7-library共转化AH109酵母,筛选与RANK蛋白新基序IVVY相互作用的蛋白,通过回复性杂交实验验证其可靠性,并对阳性克隆进行测序和基因同源性分析。结果:筛选出4个可能与IVVY基序有相互作用的蛋白,包括Ring1和YY1结合蛋白(RYBP)、ATP结合盒、E2F转录因子和热休克蛋白8,其中表达RYBP的阳性克隆出现频率高、速度快。结论:应用酵母双杂交技术成功地筛选出4个可能与IVVY基序相互作用的候选蛋白,其中RYBP可能性最大。
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关键词
酵母双杂交
RANKL/RANK系统
IVVY基序
相互作用蛋白质
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题名
应用酵母双杂交技术筛选与RANK蛋白新基序IVVY相互作用的蛋白
1
作者
王顺清
钟雯婷
邓晖
毛平
许艳丽
机构
广州
医学院
附属
市
一人民医院
血液
科
广州医学院附属市一人民医院输血科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期730-732,737,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30871101)
广州市医药卫生科技重点资助项目(No.2006-ZDi-02)
文摘
目的:应用酵母双杂交技术筛选小鼠巨噬细胞中与核因子κB受体激活因子(RANK)蛋白上新基序IVVY相互作用的蛋白,以探寻RANKL/RANK系统中介导破骨细胞形成的RANK下游新信号转导蛋白。方法:应用GAL4酵母双杂交系统3,构建仅包含编码新基序535IVVY538的一小段RANK的cDNA片段为诱饵质粒pGBKT7-IVVY,并与巨噬细胞cDNA文库质粒pGADT7-library共转化AH109酵母,筛选与RANK蛋白新基序IVVY相互作用的蛋白,通过回复性杂交实验验证其可靠性,并对阳性克隆进行测序和基因同源性分析。结果:筛选出4个可能与IVVY基序有相互作用的蛋白,包括Ring1和YY1结合蛋白(RYBP)、ATP结合盒、E2F转录因子和热休克蛋白8,其中表达RYBP的阳性克隆出现频率高、速度快。结论:应用酵母双杂交技术成功地筛选出4个可能与IVVY基序相互作用的候选蛋白,其中RYBP可能性最大。
关键词
酵母双杂交
RANKL/RANK系统
IVVY基序
相互作用蛋白质
Keywords
Yeast two-hybrid
RANKL/RANK system
IVVY motif
Interactive protein
分类号
R733.3 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
应用酵母双杂交技术筛选与RANK蛋白新基序IVVY相互作用的蛋白
王顺清
钟雯婷
邓晖
毛平
许艳丽
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
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