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着丝粒蛋白-H对人胃癌细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 全天一 何本夫 +6 位作者 刘铁坚 李伟明 伍尚标 江庆萍 刘维强 刘海波 徐学虎 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期265-269,共5页
目的检测着丝粒蛋白-H(CENP-H)基因在人胃癌细胞系中的表达情况,研究CENP-H对胃癌细胞增殖的影响。方法采用QPCR、Western blot检测7株胃癌细胞系及永生化人胃粘膜上皮细胞中CENP-H的mRNA和蛋白表达水平。用重组逆转录病毒感染胃癌细胞... 目的检测着丝粒蛋白-H(CENP-H)基因在人胃癌细胞系中的表达情况,研究CENP-H对胃癌细胞增殖的影响。方法采用QPCR、Western blot检测7株胃癌细胞系及永生化人胃粘膜上皮细胞中CENP-H的mRNA和蛋白表达水平。用重组逆转录病毒感染胃癌细胞,建立稳定干扰内源性及高表达外源性CENP-H的胃癌细胞系,并利用Western blot及QPCR检测进行鉴定,最后采用MTT、平板克隆形成实验分析CENP-H对胃癌细胞增殖能力的影响。结果人胃癌细胞系中CENP-H蛋白及mRNA表达水平均高于永生化人胃粘膜上皮细胞。Western blot及QPCR鉴定结果表明成功建立稳定沉默内源性及高表达外源性CENP-H的胃癌细胞系。MTT、平板克隆形成实验显示干扰CENP-H后对胃癌细胞增殖能力起到抑制作用,过表达CENP-H后能促进胃癌细胞增殖。结论 CENP-H对胃癌细胞的增殖具有重要的作用,在胃癌的发生发展中可能扮演重要角色。 展开更多
关键词 着丝粒蛋白-H 胃癌 增殖 逆转录病毒 稳定细胞系
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RRM2基因表达水平与乳腺癌术后复发的关系 被引量:1
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作者 岑东芝 李伟明 +1 位作者 罗超元 黄波 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第4期416-419,共4页
目的探讨核苷酸还原酶亚单位M2(RRM2)在乳腺癌组织中的表达水平及与乳腺癌术后无复发生存(RFS)的关系。方法利用BRB-Array Tools软件回顾性分析了124例乳腺癌患者组织中的RRM2基因表达水平;Kaplan-Meier法计算生存率,制作生存曲线,并采... 目的探讨核苷酸还原酶亚单位M2(RRM2)在乳腺癌组织中的表达水平及与乳腺癌术后无复发生存(RFS)的关系。方法利用BRB-Array Tools软件回顾性分析了124例乳腺癌患者组织中的RRM2基因表达水平;Kaplan-Meier法计算生存率,制作生存曲线,并采用Log-Rank进行检验,应用Cox比例风险回归模型行多因素分析。结果乳腺癌患者RRM2基因的高表达与肿瘤分化程度和雌激素受体(ER)状态高度有关(P<0.01),而与患者的年龄、有无淋巴结转移无关;生存分析提示:随着RRM2基因表达增加,乳腺癌RFS显著缩短(χ2=6.198,P<0.05);应用多因素Cox模型分析表明,RRM2基因表达水平是RFS(P<0.05,Exp(B)=1.376)独立的危险因素。结论 RRM2基因高表达的乳腺癌患者的术后复发风险增加。 展开更多
关键词 RRM2 GEO数据库 乳腺癌
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miR-143在鼻咽癌细胞系中的表达及其对高转移细胞株5-8F的影响
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作者 钟文 何本夫 +3 位作者 全天一 朱成全 周思朗 陈永乐 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期582-585,共4页
目的检测鼻咽癌细胞系中miR-143表达情况,建立稳定高表达miR-143的鼻咽癌细胞系,为研究其在鼻咽癌的发生和发展中的作用机制提供可靠的细胞模型。方法采用QPCR方法检测鼻咽癌细胞系CEN1、CNE2、HONE1、5-8F、6-10B及人永生化鼻咽上皮细... 目的检测鼻咽癌细胞系中miR-143表达情况,建立稳定高表达miR-143的鼻咽癌细胞系,为研究其在鼻咽癌的发生和发展中的作用机制提供可靠的细胞模型。方法采用QPCR方法检测鼻咽癌细胞系CEN1、CNE2、HONE1、5-8F、6-10B及人永生化鼻咽上皮细胞NP69中miR-143的表达水平。构建重组逆转录病毒质粒pMSCV-puro-miR-143,包装逆转录病毒pMSCV-miR-143和pMSCV-Vector并感染鼻咽癌细胞,建立稳定高表达miR-143的鼻咽癌细胞系,并应用细胞黏附实验检测过表达mir-143后,鼻咽癌细胞对胞外基质的黏附性。结果鼻咽癌细胞系中miR-143的表达水平均低于对照组NP69细胞,其中高转移潜能细胞株5-8F的表达量最低,仅为对照组的3.03%,成瘤但不转移细胞株6-10B表达量最高,为对照组的63.59%。实时荧光定量PCR显示筛选后第7代细胞miR-143的表达水平比对照组高出达1080倍(P<0.05)。细胞黏附实验结果显示,过表达mir-143可降低5-8F细胞对胞外基质的黏附性。结论 miR-143在鼻咽癌细胞系中表达失常,其作用可能与鼻咽癌细胞的侵袭和转移相关;成功建立了稳定高表达miR-143的鼻咽癌细胞系,并初步确定miR-143能抑制5-8F细胞的黏附能力,为探索miR-143在鼻咽癌的发生和发展中的作用机制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 MIR-143 鼻咽癌 逆转录病毒 稳定细胞系 黏附
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