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18三体及假肥大型肌营养不良成纤维细胞系的建立
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作者 徐学虎 陈欣洁 +5 位作者 骆曦图 苏榕 骆玉梅 范勇 孙筱放 全天一 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1453-1456,共4页
目的:建立18三体及假肥大型肌营养不良胎儿皮肤成纤维细胞系。方法:3名在我院进行羊水染色体诊断或基因诊断,诊断为异常的胎儿。获得知情同意后,取1小块皮肤,进行成纤维细胞培养及鉴定。结果:对皮肤进行分离、培养,成功建立了3株疾病皮... 目的:建立18三体及假肥大型肌营养不良胎儿皮肤成纤维细胞系。方法:3名在我院进行羊水染色体诊断或基因诊断,诊断为异常的胎儿。获得知情同意后,取1小块皮肤,进行成纤维细胞培养及鉴定。结果:对皮肤进行分离、培养,成功建立了3株疾病皮肤成纤维细胞系,包括1株18三体、2株假肥大型肌营养不良,并进行了传代、冻存、复苏及鉴定。在传代培养过程中核型稳定,STR基因检测对这些细胞系进行个体识别。结论:本研究在体外建立了稳定的18三体及假肥大型肌营养不良胎儿皮肤成纤维细胞系,为进一步研究相关疾病提供充足的细胞来源。 展开更多
关键词 成纤维细胞 核型分析 肌营养不良 杜氏
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结肠癌患者血清VEGF、CEA和CRP联合检测的临床意义 被引量:10
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作者 伍尚标 陈戎 +1 位作者 苏榕 李志发 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第13期2393-2394,共2页
目的:研究血清癌胚抗原(CEA)、血管内皮生长因子(VEGF)和C反应蛋白(CRP)联合检测在结肠癌诊断治疗中的临床价值。方法:收集40例结肠癌患者(结肠癌组),30例良性病变患者(良性病变组)和30例正常对照者(正常对照组)的静脉血标本,应用ELISA... 目的:研究血清癌胚抗原(CEA)、血管内皮生长因子(VEGF)和C反应蛋白(CRP)联合检测在结肠癌诊断治疗中的临床价值。方法:收集40例结肠癌患者(结肠癌组),30例良性病变患者(良性病变组)和30例正常对照者(正常对照组)的静脉血标本,应用ELISA法检测血清VEGF含量,用放射免疫法分析CEA含量,采用胶乳增强免疫比浊法检测CRP含量并用Beckman Coulter Lx20全自动生化分析仪进行测定。结果:结肠癌组患者VEGF、CEA和CRP含量均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。良性病变组VEGF水平高于正常对照组(P<0.05);CRP也明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。结肠癌组VEGF和CEA水平高于良性病变组(P<0.05)。血清VEGF、CEA和CRP联合检测的敏感性、特异性和诊断阳性率分别为85.6%、66.8%和93.2%。结论:血清VEGF、CEA和CRP联合检测可提高结肠癌患者诊断的敏感性和诊断符合率,为结肠癌患者术前临床诊治和术后辅助治疗提供帮助。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 血管内皮生长因子 癌胚抗原 C反应蛋白
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miR-148a克隆及逆转录病毒载体构建 被引量:2
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作者 徐学虎 全天一 +2 位作者 曾伟霞 陈欣洁 李伟明 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1545-1547,1557,共4页
目的克隆微小RNA hsa-miR-148a并构建逆转录病毒表达载体。方法将PCR扩增得到的miR-148a前体序列和pMSCV载体经双酶切连接产生pMSCV-miR-148a逆转录病毒表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆。用pMSCV-miR-148a和PIK packaging质粒... 目的克隆微小RNA hsa-miR-148a并构建逆转录病毒表达载体。方法将PCR扩增得到的miR-148a前体序列和pMSCV载体经双酶切连接产生pMSCV-miR-148a逆转录病毒表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆。用pMSCV-miR-148a和PIK packaging质粒以磷酸钙共沉淀法转染包装细胞293FT,包装产生逆转录病毒。将病毒感染NIH3T3细胞进行滴度测定。结果经双酶切鉴定和测序证实,成功构建了miR-148a的逆转录病毒表达载体pMSCV-miR-148a。并测得病毒滴度为5×108CFU/ml。结论以miR-148a前体序列构建的逆转录病毒表达载体pMSCV-miR-148a能够产生高滴度的逆转录病毒,为深入研究miR-148a的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 has-miR-148a DNA甲基转移酶 肿瘤 甲基化 逆转录病毒
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着丝粒蛋白-H对人胃癌细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 全天一 何本夫 +6 位作者 刘铁坚 李伟明 伍尚标 江庆萍 刘维强 刘海波 徐学虎 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期265-269,共5页
目的检测着丝粒蛋白-H(CENP-H)基因在人胃癌细胞系中的表达情况,研究CENP-H对胃癌细胞增殖的影响。方法采用QPCR、Western blot检测7株胃癌细胞系及永生化人胃粘膜上皮细胞中CENP-H的mRNA和蛋白表达水平。用重组逆转录病毒感染胃癌细胞... 目的检测着丝粒蛋白-H(CENP-H)基因在人胃癌细胞系中的表达情况,研究CENP-H对胃癌细胞增殖的影响。方法采用QPCR、Western blot检测7株胃癌细胞系及永生化人胃粘膜上皮细胞中CENP-H的mRNA和蛋白表达水平。用重组逆转录病毒感染胃癌细胞,建立稳定干扰内源性及高表达外源性CENP-H的胃癌细胞系,并利用Western blot及QPCR检测进行鉴定,最后采用MTT、平板克隆形成实验分析CENP-H对胃癌细胞增殖能力的影响。结果人胃癌细胞系中CENP-H蛋白及mRNA表达水平均高于永生化人胃粘膜上皮细胞。Western blot及QPCR鉴定结果表明成功建立稳定沉默内源性及高表达外源性CENP-H的胃癌细胞系。MTT、平板克隆形成实验显示干扰CENP-H后对胃癌细胞增殖能力起到抑制作用,过表达CENP-H后能促进胃癌细胞增殖。结论 CENP-H对胃癌细胞的增殖具有重要的作用,在胃癌的发生发展中可能扮演重要角色。 展开更多
关键词 着丝粒蛋白-H 胃癌 增殖 逆转录病毒 稳定细胞系
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