肺癌多种肿瘤耐药因子的表达及其临床意义 被引量：5

1

作者 周承志 李勇 +3 位作者 王春燕 黄振倩 谭获 徐军 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期215-218,共4页

目的:探讨多种肿瘤耐药因子在肺癌的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学法检测66例肺癌标本各种肿瘤耐药因子的表达水平。结果:1)突变型P53蛋白、P-糖蛋白(Pgp)、多药耐药相关蛋白(MRP1)、肺耐药相关蛋白(LRP)、谷胱甘肽-S-转移酶... 目的:探讨多种肿瘤耐药因子在肺癌的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学法检测66例肺癌标本各种肿瘤耐药因子的表达水平。结果:1)突变型P53蛋白、P-糖蛋白(Pgp)、多药耐药相关蛋白(MRP1)、肺耐药相关蛋白(LRP)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱ1(TOPOⅡ1)的表达率分别为74.24%、45.45%、51.52%、81.82%、81.82%、83.33%。2)不同耐药因子在不同肺癌的表达具有不同的特点,特别是在表达强度方面NSCLC(非小细胞肺癌)与SCLC(小细胞肺癌)存在显著差异性(P<0.05);且表达强阳性与不同的病理类型、TNM分期、分化程度、淋巴结转移及预后方面均存在显著差异性(P<0.05)。3)各耐药因子之间的相关性分析表明:P53蛋白、Pgp、MRP、GST-π的表达之间存在着显著相关性,而LRP、TOPOⅡ1可能是相对独立的耐药因素。结论:肺癌组织肿瘤耐药因子的表达可能在一定程度上提示肺癌的化疗效果和预后。 展开更多

关键词 肺肿瘤 免疫组织化学 多药耐药

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siRNA对恶性黑色素瘤A375细胞中HOXB7基因的干涉作用研究 被引量：2

2

作者 彭思达 葛林虎 +3 位作者 王春燕 于宝丹 郑丽霞 谭获 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期312-315,共4页

目的:观察靶向siRNA抑制恶性黑色素瘤细胞株A375同源盒基因HOXB7表达后,对相应生长因子bFGF表达水平及A375细胞生物学特性的影响。方法:根据HOXB7基因设计3条序列特异性的siRNA(si-HOXB7-1,si-HOXB7-2,si-HOXB7-3),在脂质体Lipofectamin... 目的:观察靶向siRNA抑制恶性黑色素瘤细胞株A375同源盒基因HOXB7表达后,对相应生长因子bFGF表达水平及A375细胞生物学特性的影响。方法:根据HOXB7基因设计3条序列特异性的siRNA(si-HOXB7-1,si-HOXB7-2,si-HOXB7-3),在脂质体Lipofectamine2000的介导下转染A375细胞,采用RT-PCR和FCM法来观察HOXB7及bFGF的基因沉默效应。MTT法检测A375细胞体外增殖活性。结果:3条siRNA均能不同程度地下调A375细胞HOXB7表达水平,第3条序列能更有效地封闭HOXB7基因,而空转组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:靶向HOXB7基因的siRNA可有效沉默HOXB7基因及其调控的基因bFGF的表达,并控制恶性黑色素瘤细胞的生长。 展开更多

关键词 SIRNA HOXB7 BFGF A375细胞株

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造血干细胞移植治疗血液病及实体瘤的疗效分析 被引量：1

3

作者 肖毅 张东华 +5 位作者 黄伟 黄振倩 李登举 孟凡凯 黄亮 谭获 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期644-647,652,共5页

目的评价造血干细胞移植(HSCT)治疗血液病和实体瘤的临床疗效及并发症。方法回顾性分析61例行HSCT的患者,其中19例为自体造血干细胞移植(auto-HSCT),37例为异基因造血干细胞移植(allo-HSCT),5例非血缘脐血移植(UCBT)。结果除2例成人UCB... 目的评价造血干细胞移植(HSCT)治疗血液病和实体瘤的临床疗效及并发症。方法回顾性分析61例行HSCT的患者,其中19例为自体造血干细胞移植(auto-HSCT),37例为异基因造血干细胞移植(allo-HSCT),5例非血缘脐血移植(UCBT)。结果除2例成人UCBT病例外,59例均获造血重建。在auto-HSCT、allo-HSCT(不包括UCBT病例)和UCBT后中性粒细胞绝对计数(ANC)≥0.5×109/L和血小板≥20×109/L所需的时间3组分别为(11.7±3.8)d和(12.7±5.4)d、(12.5±2.6)d和(13.8±4.3)d、(14.2±3.5)d和(30.4±10.5)d。auto-HSCT与allo-HSCT比较造血重建时间差异无显著性意义(P>0.05),但与UCBT组相比差异有极显著性意义(P<0.01)。allo-HSCT组急性移植物抗宿主病(aGVHD)发生率为24.3%,慢性移植物抗宿主病(cGVHD)发生率为35.1%,UCBT组未发生GVHD。auto-HSCT组、allo-HSCT组和UCBT组总生存率(OS),无病生存率(DFS)和累积复发率的Kaplan-Meier曲线无显著差异。auto-HSCT组中移植后免疫治疗组和非免疫治疗组的DFS及累积复发率的Kaplan-Meier曲线有显著差异。结论auto-HSCT与allo-HSCT的3年OS、DFS和复发率相当。auto-HSCT后的免疫治疗能有效降低复发率。非清髓造血干细胞移植(NST)对于有脏器功能受损或年龄大的患者是安全有效的,术后嵌合体的监测指导免疫抑制剂的调节和供者淋巴细胞输注(DLI)能有效预防复发。 展开更多

关键词 造血干细胞移植 血液病 实体瘤 总生存率 无病生存率

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异基因NK细胞在白血病小鼠单倍体相合骨髓移植中的作用(英文) 被引量：1

4

作者 王春燕 谭获 郭坤元 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期1005-1009,共5页

本研究观察异基因NK细胞在白血病小鼠单倍体相合骨髓移植中的作用。建立荷EL9611(H-2d)红白血病细胞的CB6F1H-2b/d小鼠动物模型,5天后将其随机分为7组,每组10只。CB6F1H-2b/d受鼠为移植组,9Gy(60Co)照射后以C57BL/6H-2b为供鼠,进行骨髓... 本研究观察异基因NK细胞在白血病小鼠单倍体相合骨髓移植中的作用。建立荷EL9611(H-2d)红白血病细胞的CB6F1H-2b/d小鼠动物模型,5天后将其随机分为7组,每组10只。CB6F1H-2b/d受鼠为移植组,9Gy(60Co)照射后以C57BL/6H-2b为供鼠,进行骨髓移植。对照组分为5组:对照1组为未治疗组;对照2组为单纯照射组;对照3组为阿糖胞苷治疗组:小鼠腹腔注射阿糖胞苷50mg/kg×6d;对照4组为单纯骨髓细胞移植组:小鼠照射后4小时移植C57BL/6H-2b小鼠骨髓细胞;对照5组为GVHD对照组:小鼠照射后4小时移植C57BL/6H-2b小鼠骨髓细胞和脾细胞。实验组分为2组:实验A组,照射后输注C57BL/6H-2b小鼠NK细胞1×106/只,4小时后移植C57BL/6H-2b小鼠骨髓细胞;实验B组:照射后同实验1组,4小时后移植C57BL/6H-2b小鼠骨髓细胞和脾细胞。以血象、体重、生存期和病理组织学变化为观察指标并作组间比较。结果表明,对照1、2、3、5组小鼠生存期分别为(10.10±0.88)天、(9.80±0.92)天、(22.70±3.23)天、(20.10±1.73)天,对照4组生存期为(30.10±15.95)天,其中2只小鼠超过30天;实验A、B组小鼠生存期分别为(39.10±18.11)天、(49.30±17.24)天,实验1组4只小鼠生存期超过30天,实验2组7只生存期超过30天,其中实验1组与对照1、2、3、5组比较均有显著性差异(p<0.01),实验2组同其他组比较均有显著性差异(p<0.05)。因白血病死亡的小鼠,可见肝脾明显肿大,结构破坏,有大量白血病细胞浸润。实验组长期存活的小鼠出现Y染色体(嵌合率80%-90%)。结论:在荷EL9611(H-2d)红白血病细胞CB6F1H-2b/d小鼠模型的单倍体相合骨髓移植中供者NK细胞具有杀灭白血病细胞并降低GVHD的双重作用。 展开更多

关键词 NK细胞 单倍体相合骨髓移植 白血病

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以组织因子为靶点的肿瘤免疫治疗结合物的合成及其对结直肠癌细胞的影响 被引量：2

5

作者 许希 饶本强 +4 位作者 梁绮雯 刘丹 谭获 汪建平 黄振倩 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期420-426,共7页

目的:构建含hFⅦ-LC+hIgG1-Fc cDNA的重组真核表达载体,并转染中国仓鼠卵巢细胞亚株CHO-K1获得以组织因子(TF)为靶点的免疫治疗结合物用于肿瘤的靶向治疗。方法:用分子生物学方法从汉族人肝组织和淋巴细胞中分别获得hFⅦ-LC和hIgG1-Fc ... 目的:构建含hFⅦ-LC+hIgG1-Fc cDNA的重组真核表达载体,并转染中国仓鼠卵巢细胞亚株CHO-K1获得以组织因子(TF)为靶点的免疫治疗结合物用于肿瘤的靶向治疗。方法:用分子生物学方法从汉族人肝组织和淋巴细胞中分别获得hFⅦ-LC和hIgG1-Fc DNA片段并用连接酶正向克隆入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中。以脂质体法转染阳性质粒入CHO-K1细胞,G418加压筛选获得阳性单克隆细胞;Excel 301无血清培养液扩大培养,培养液Ni-NTA亲和层析纯化和制备hFⅧ-LC+hIgG1-Fc融合蛋白,ELISA法检测该融合蛋白与TF的靶向作用,免疫激活物与结肠癌细胞HT-29及NK细胞混合培养检测结合物激活NK细胞的能力。结果:以汉族人肝组织和淋巴细胞为模板扩增的hFⅦ-LC和hIgG1-Fc DNA片段经测序证实与基因库报道的系列完全一致;经酶切分析、测序证实构建的hFⅦ-LC+hIgG1-Fc融合基因片段完整地落在真核表达质粒pcDNA3.1(+)的阅读框架中;Lipofectamine^(TM)2000转染试剂能获得含pcDNA3.1(+)-hFⅦ-LC+hIgG1-Fc阳性的CHO-K1细胞,经1g/L G418加压筛选可以获得分泌hFⅦ-LC+hIgG1-Fc融合蛋白的单克隆细胞株;ILExcel301无血清培养液用Ni-NTA亲和层析纯化可以制备1.3 mg hFⅦ-LC+hIgG1-Fc融合蛋白,经ELISA法鉴定与TF具有高亲和力,免疫激活物与结肠癌细胞HT-29及NK细胞混合培养表现出明显的激活NK细胞的能力。结论:成功构建了hFⅦ-LC+hIgG1-Fc融合蛋白的真核表达载体并获得了分泌hFⅦ-LC+hIgG1-Fc融合蛋白的CHO-K1单克隆细胞株,为制备以TF为靶点的肿瘤免疫治疗结合物奠定了基础。 展开更多

关键词 肿瘤靶向治疗 组织因子 免疫结合物 CHO-K1细胞

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133例恶性淋巴瘤骨髓细胞学分析 被引量：5

6

作者 郑润辉 王春燕 +5 位作者 谭获 黄振倩 黎庆恩 谢白露 刘丹 罗晓丹 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第24期1447-1449,共3页

目的:探讨恶性淋巴瘤骨髓浸润的临床特点。方法:回顾性分析133例经病理确诊的恶性淋巴瘤病例,分析其骨髓浸润情况。结果:133例恶性淋巴瘤患者中骨髓受累率为21.8%(29/133);在骨髓受累的病例中,淋巴肉瘤性白血病、骨髓侵犯、淋巴瘤细胞... 目的:探讨恶性淋巴瘤骨髓浸润的临床特点。方法:回顾性分析133例经病理确诊的恶性淋巴瘤病例,分析其骨髓浸润情况。结果:133例恶性淋巴瘤患者中骨髓受累率为21.8%(29/133);在骨髓受累的病例中,淋巴肉瘤性白血病、骨髓侵犯、淋巴瘤细胞比例未达5%的病例分别占31.0%(9/29)、55.2%(16/29)和13.8%(4/29)。在29例骨髓受累病例中,B细胞淋巴瘤占55.2%(16/29),T/NK细胞淋巴瘤占41.4%(12/29),霍奇金病占3.4%(1/29)。T/NK细胞淋巴瘤的骨髓受累率为37.5%(12/32),比B细胞淋巴瘤要高18.2%(16/88),两组具有统计学差异。结论:恶性淋巴瘤骨髓浸润比例高,不同的病理学类型骨髓受累的风险不一,总体而言T细胞淋巴瘤的骨髓浸润率更高,而且以淋巴肉瘤性白血病多见,骨髓细胞学检查对恶性淋巴瘤的正确分期、治疗方案的选择和预后判断有重要的意义。 展开更多

关键词 淋巴瘤 骨髓浸润 淋巴肉瘤性白血病

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TCR Vα23-Vβ13基因修饰T细胞及其特异性细胞毒活性研究 被引量：4

7

作者 尹青松 谭获 +4 位作者 杨力建 陈少华 查显丰 叶静梅 李扬秋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期260-267,共8页

目的:分析弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)抗原特异T细胞受体(TCR)Vα23-Vβ13基因修饰T细胞后的体外特异性杀伤活性。方法:扩增并克隆已鉴定的DLBCL患者外周血中单克隆增殖T细胞的TCR Vβ13和TCR Vα23基因全长序列,构建TCR Vβ13-IRES-TCR-V... 目的:分析弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)抗原特异T细胞受体(TCR)Vα23-Vβ13基因修饰T细胞后的体外特异性杀伤活性。方法:扩增并克隆已鉴定的DLBCL患者外周血中单克隆增殖T细胞的TCR Vβ13和TCR Vα23基因全长序列,构建TCR Vβ13-IRES-TCR-Vα23双基因重组质粒,经核转染的方法将其转染正常人T细胞,通过real-time PCR和Western blotting检测TCR Vβ13和TCR Vα23这2个外源基因在mRNA和蛋白水平的体外表达情况,并对TCR转基因T细胞进行体外细胞毒性检测。结果:经酶切分析和核酸序列测定证实重组质粒构建正确,转染正常人T细胞后,TCR Vβ13和TCR Vα23在mRNA及蛋白水平实现了共表达。转染后3 d,TCR转基因T细胞对DLBCL细胞株Toledo细胞的杀伤活性明显高于非特异细胞株Raji细胞和Molt-4细胞,显示出特异性细胞毒活性。结论:成功构建DLBCL相关抗原特异的TCR Vβ13-IRES-TCR Vα23双基因真核表达质粒;TCR基因修饰T细胞可获得特异性细胞毒活性。 展开更多

关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 TCR转基因 细胞毒活性

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体外诱导人脐血树突状细胞介导T细胞抗白血病的细胞毒性效应研究(英文) 被引量：3

8

作者 谭获 曾林涓 叶絮 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期472-478,共7页

为了研究脐血淋巴细胞能否在体外培养成为特异性杀伤白血病细胞的杀伤性T细胞(CTL),联合细胞因子体外诱导脐血单个核细胞分化为树突状细胞(DC),再吞噬凋亡白血病细胞并将其抗原呈递给相同脐血的T淋巴细胞,得到杀伤性T细胞。用形态学及... 为了研究脐血淋巴细胞能否在体外培养成为特异性杀伤白血病细胞的杀伤性T细胞(CTL),联合细胞因子体外诱导脐血单个核细胞分化为树突状细胞(DC),再吞噬凋亡白血病细胞并将其抗原呈递给相同脐血的T淋巴细胞,得到杀伤性T细胞。用形态学及流式细胞术检测DC。CTL细胞的杀伤功能用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定。结果表明:12份脐血标本均可培养出形态典型的DC,DC的表面标志CD1a+、HLA DR+、CD86+、CD83+表达水平显著升高(P<0.05)。CTL可以杀伤未经培养的白血病细胞(效∶靶=50∶1对AML细胞的平均杀伤率为44.76±17.42%,对ALL细胞的平均杀伤率为8.50±4.25%),对相同患者缓解期的骨髓细胞杀伤率极低。结论: 在外体应用多种细胞因子刺激可诱导脐血单个核细胞分化成典型的DC;负载有白血病抗原的DC可诱导同一脐血的淋巴细胞生成白血病特异的杀伤性T细胞(CTL),所得CTL可特异性杀伤未经培养的白血病细胞而不严重伤害相同患者缓解期的骨髓细胞。 展开更多

关键词 白血病 脐血 树突状细胞 T细胞 免疫

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脐血CD34^+细胞及红系祖细胞扩增的实验研究 被引量：5

9

作者 张洁霞 毛平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期429-433,共5页

脐血是造血祖细胞的丰富来源之一,选择合适的培养条件,体外诱导其定向扩增为红系祖细胞,输入体内产生成熟红细胞。本实验旨在探讨脐血单个核细胞(MNC)体外红系定向扩增的理想因子组合(Flt3配基FL联合TPO、SCF、EPO及FL、SCF、TPO)对CD34... 脐血是造血祖细胞的丰富来源之一,选择合适的培养条件,体外诱导其定向扩增为红系祖细胞,输入体内产生成熟红细胞。本实验旨在探讨脐血单个核细胞(MNC)体外红系定向扩增的理想因子组合(Flt3配基FL联合TPO、SCF、EPO及FL、SCF、TPO)对CD34+细胞扩增的影响。将单个核细胞接种至stemspan无血清培养液中,共分3组:A组为对照组,B组为TPO+SCF+FL+EPO+IGF1组,C组为TPO+SCF+FL组,C组在第6天及以后换液加入EPO和IGF1。于培养0、6、10、14天进行细胞计数,细胞集落测定,流式细胞术测定细胞的CD34、CD34CD71、CD71GPA细胞的比例。结果表明:经10天培养后,B组总细胞数扩增6.89倍,而C组3.06倍;B组CD34+细胞增加4.83,而C组2.47倍;B组集落形成细胞数增加4.3倍,而C组增加2.5倍;B组红系祖细胞BFUE和CFUE数增加5.4倍,而C组3.1倍;B组CD34+CD71+细胞数增加8.72倍,而C组3.37倍;B组CD71+GPA+细胞数增加53.4倍,而C组30.29倍。结论:脐血MNC在无血清培养液中加入FL+SCF+TPO实现了CD34+细胞及集落形成细胞的扩增。脐血MNC在无血清培养液中加入FL+SCF+TPO+EPO+IGF1短期液体培养获得红系祖细胞的扩增,在第0天比6天加入EPO获得更多红祖细胞(P<0.05)。由于TPO+SCF+FL+EPO+IGF1组的集落形成细胞数、CFUE和BFUE数于第10天最多。 展开更多

关键词 脐血 单个核细胞 红系祖细胞 无血清培养 CD34^+细胞

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重组人p53腺病毒注射液治疗肺癌并肺不张2例及文献复习 被引量：2

10

作者 彭玉娜 谭获 +4 位作者 徐军 欧阳铭 杨劲松 黄健 何伟 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第22期1305-1307,共3页

目的:探讨重组人p53腺病毒注射液(rAd-p53)治疗肺癌并肺不张的疗效和安全性。方法:在纤维支气管镜下为2例肺癌并肺不张的患者直接向肿瘤组织中注射rAd-p53(今又生)治疗,观察疗效并进行文献复习。结果:1例患者局部注射rAd-p53后,用药一... 目的:探讨重组人p53腺病毒注射液(rAd-p53)治疗肺癌并肺不张的疗效和安全性。方法:在纤维支气管镜下为2例肺癌并肺不张的患者直接向肿瘤组织中注射rAd-p53(今又生)治疗,观察疗效并进行文献复习。结果:1例患者局部注射rAd-p53后,用药一侧的肺部分复张,而未注射rAd-p53的对侧肺病灶进行性增大;另1例注射rAd-p53,14天后复查胸片发现病肺部分复张,37天后完全复张;2例患者第2次用药后均出现发热,口服消炎镇痛药处理后缓解。结论:rAd-p53局部注射治疗肺癌并肺不张有一定的疗效,主要不良反应为发热。 展开更多

关键词 p53局部注射 肺癌 肺不张

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抗原特异TCR α和β链基因克隆及分子空间结构预测 被引量：1

11

作者 尹青松 谭获 +4 位作者 陈少华 杨力建 李萡 叶静梅 李扬秋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期349-352,共4页

目的扩增弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)相关抗原特异T细胞克隆的全长TCRα和β链基因序列,并对其三维空间结构进行预测。方法从已鉴定的2例伴有克隆性增殖TCR Vα6和Vβ13亚家族T细胞的DLBCL患者外周血中克... 目的扩增弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)相关抗原特异T细胞克隆的全长TCRα和β链基因序列,并对其三维空间结构进行预测。方法从已鉴定的2例伴有克隆性增殖TCR Vα6和Vβ13亚家族T细胞的DLBCL患者外周血中克隆全长TCRα和β基因序列,利用Primer Premier 5.0分析软件推算其相应的氨基酸序列,并通过自动化蛋白质模建服务器SWISS-MODEL进行三维空间结构预测。然后利用蛋白质三维图像分析软件Rasmol对所获得的TCR三维空间结构进行显示和分析。结果获得DLBCL相关抗原特异TCRα6和β13全长基因序列及其氨基酸序列。2例患者的TCR Vα6的空间结构与PDB ID:3ffcD模型相似,序列同源性分别为92.16%和91.71%;而2个TCR Vβ13也均具有同一个空间结构模型PDB ID:2ialD,序列同源性分别为92.95%和92.18%。结论来自不同DLBCL患者外周血中克隆性增殖的TCR Vα6或Vβ13亚家族T细胞的TCR具有高度同源性的空间结构,提示其可能识别相同的肿瘤抗原表位。 展开更多

关键词 T细胞受体 CDR3区 同源建模 弥漫大B细胞淋巴瘤

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以浅表淋巴结肿大伴腹痛首诊的小细胞肺癌一例

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作者 周承志 黄振倩 +2 位作者 欧阳铭 谭获 徐军 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第1期88-88,共1页

患者 男性， 60岁，因发现颈部肿物伴腹痛1月余于2005年2月12日入院。患者于1月前出现颈部肿物，并呈进行性增大伴轻度疼痛，伴腹痛。 无咳嗽及咯血丝痰史。入院查体：一般生命体征稳定。双侧颈部，左锁骨上，右腋下，双侧腹股沟可触及... 患者 男性， 60岁，因发现颈部肿物伴腹痛1月余于2005年2月12日入院。患者于1月前出现颈部肿物，并呈进行性增大伴轻度疼痛，伴腹痛。 无咳嗽及咯血丝痰史。入院查体：一般生命体征稳定。双侧颈部，左锁骨上，右腋下，双侧腹股沟可触及多个肿大淋巴结。 展开更多

关键词 浅表淋巴结肿大 小细胞肺癌 腹痛 首诊 颈部肿物 生命体征稳定 入院查体 进行性增大 肿大淋巴结 60岁

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HA-1树突状细胞核酸疫苗的构建及其特异性CTL的诱导

13

作者 汪涯雅 张东华 +6 位作者 刘文励 周红升 张路 戴敏 黄振倩 谭获 熊平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期1178-1182,共5页

本研究以次要组织相容性抗原HA-1为靶点,构建HA-1树突状细胞核酸疫苗用于造血干细胞移植后抗白血病治疗。体外培养移植供者树突状细胞,用流式细胞术、混合淋巴细胞反应检测其免疫活性,通过电转法将HA-1基因转染树突状细胞,构建树突状细... 本研究以次要组织相容性抗原HA-1为靶点,构建HA-1树突状细胞核酸疫苗用于造血干细胞移植后抗白血病治疗。体外培养移植供者树突状细胞,用流式细胞术、混合淋巴细胞反应检测其免疫活性,通过电转法将HA-1基因转染树突状细胞,构建树突状细胞核酸疫苗。48小时后检测HA-1蛋白表达情况。将转染后的树突状细胞与同基因淋巴细胞共孵育诱导特异性CTL,应用LDH释放实验检测其体外杀伤活性。结果表明经外周血单核细胞诱导的树突状细胞表达树突状细胞表型,能刺激同种淋巴细胞增殖。电转48小时后,Westernblot可检测到HA-1蛋白表达。诱导的CTL体外杀伤活性高于对照组。结论次要组织相容性抗原HA-1可作为造血干细胞移植后抗白血病治疗的靶点。 展开更多

关键词 树突状细胞 HA-1基因 树突状细胞核酸疫苗 造血干细胞移植 细胞毒性T淋巴细胞

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特异诱导脐血CD8^+抗白血病细胞毒淋巴细胞的研究(英文)

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作者 谭获 刘芯 叶絮 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第1期129-133,共5页

微小残留病灶(minimal residual disease,MRD)的存在是导致白血病复发的主要根源,特异性免疫治疗能有效地清除MRD,其中的策略之一就是诱导并回输白血病特异性的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)。本实验的目的是研究脐血... 微小残留病灶(minimal residual disease,MRD)的存在是导致白血病复发的主要根源,特异性免疫治疗能有效地清除MRD,其中的策略之一就是诱导并回输白血病特异性的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)。本实验的目的是研究脐血能否在体外诱导生成CD8+CTL,所生成的CD8+CTL能否特异性杀伤白血病细胞,从而确定脐血淋巴细胞的利用价值及用于特异性免疫治疗的可行性。通过联合细胞因子体外诱导脐血单个核细胞(mononuclear cells,MNC)分化为树突状细胞(dendritic cells,DC),同时负载U937冻融抗原;成熟DC刺激同源的脐血T淋巴细胞成为CTL,经MACS磁珠分选出CD8+CTL。用倒置显微镜、扫描电镜及流式细胞仪等方法检测DC,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定杀伤活性。结果显示,10份人脐血标本均可培养出形态典型、功能成熟的DC。3组效应细胞CD8+CTL、CD8-CTL和T淋巴细胞(TL)组在相同效靶比(40∶1)对U937细胞株的杀伤率分别为(66.36±12.43)%、(34.47±8.19)%和(15.79±4.64)%,以CD8+CTL组最高;效靶比为40∶1时,CD8+CTL对U937细胞株的杀伤率(66.36%)高于对K562细胞株的杀伤率(41.97%)(P<0.05);而CD8-CTL对U937细胞株和K562细胞株的杀伤率无显著差异(P>0.05)。结论:用负载U937白血病细胞株抗原的成熟脐血DC可使脐血淋巴细胞诱导产生特异性的CD8+CTL;CD8+CTL对U937白血病细胞株的杀伤活性强于CD8-CTL的作用;CD8+CTL对U937白血病细胞株杀伤具有特异性。 展开更多

关键词 CD8^+细胞毒性T淋巴细胞 免疫治疗 白血病 脐血 树突状细胞

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异基因性NK细胞在小鼠体内抗白血病作用

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作者 王春燕 谭获 郭坤元 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期658-661,777,共5页

目的：观察异基因性NK细胞在小鼠体内抗白血病作用。方法：建立荷EL9611（H-2^d）红白血病细胞的CB6F1^H-2b/d小鼠动物模型,30只红白血病小鼠随机分为5组,每组6只。实验1组：每只小鼠输注NK细胞2×10^5;实验2组：每只小鼠输注NK细胞... 目的：观察异基因性NK细胞在小鼠体内抗白血病作用。方法：建立荷EL9611（H-2^d）红白血病细胞的CB6F1^H-2b/d小鼠动物模型,30只红白血病小鼠随机分为5组,每组6只。实验1组：每只小鼠输注NK细胞2×10^5;实验2组：每只小鼠输注NK细胞5×10^5;对照1组：未治疗组;对照2组：阿糖胞苷治疗组;对照3组：同基因NK细胞治疗组。以血象、体重、生存时间和病理组织学变化为观察指标并作组间比较。结果：①生存时间两实验组之间比较差异无显著性（P〉0.05）。对照2组、实验组生存时间高于对照1组（P〈0.01）;对照2组高于实验组（P〈0.01）;实验组高于对照3组（P〈0.01）。②注入EL9611后第10天,原始细胞占有核细胞的百分比两个实验组比较差异无显著性（P〉0.05）;对照2组、实验1、2组低于对照1组（P〈0.01）;对照2组低于实验组（P〈0.01）;实验组低于对照3组（P〈0.01）。③小鼠发病时脾脏明显肿大,肿大脾脏可达正常5-7倍,HE染色后,镜下可见脾脏正常组织结构破坏,有弥漫白血病细胞侵润。结论：在荷EL9611（H-2^d）红白血病CB6F1^H-2b/d动物模型上证实来源于H-2b的NK细胞能延长荷EL9611（H-2^d）红白血病细胞CB6F1^H-2b/d小鼠的生存时间。 展开更多

关键词 杀伤细胞 天然 抗白血病活性 疾病模型 动物 小鼠

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GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS对血小板聚集和胞浆游离钙的影响 被引量：1

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作者 李海明 尹松梅 +5 位作者 谢双锋 聂大年 李益清 王秀菊 马丽萍 吴裕丹 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第A03期176-180,共5页

【目的】探讨血小板GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS对血小板聚集和血小板[Ca^(2+)]i的影响。【方法】比浊法测定PAG:采用Fura-3/AM荧光探针标记血小板胞浆钙离子,使用共聚焦显微镜观察单个血小板荧光强度的变化,计算机图像系统分析血小板[Ca^(... 【目的】探讨血小板GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS对血小板聚集和血小板[Ca^(2+)]i的影响。【方法】比浊法测定PAG:采用Fura-3/AM荧光探针标记血小板胞浆钙离子,使用共聚焦显微镜观察单个血小板荧光强度的变化,计算机图像系统分析血小板[Ca^(2+)]i的变化。【结果】凝血酶(0.03 U/mL)为激动剂时,血小板PAG(M)为(78.2±12.4)%。在所取的62.5～1000μmol/L RGDS内的5种浓度下,RGDS可呈浓度依赖性地抑制凝血酶诱导的PAG(M)。正常人静息血小板[Ca^(2+)]i荧光强度值为376.1±70.5;凝血酶(0.03 U/mL)激动的血小板[Ca^(2+)]i荧光强度值升高为977.9±108.8;GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS(250μmol/L)对静息血小板的[Ca^(2+)]_i荧光强度值无抑制作用;GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS(250μmol/L)作用于血小板后,凝血酶(0.03 U/mL)激动的血小板[Ca^(2+)]i荧光强度值升高受到抑制,抑制率为(9.37±7.5)%。【结论】凝血酶(0.03 U/mL)可以引起血小板的聚集和血小板[Ca^(2+)]i的升高。GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS可以抑制凝血酶(0.03 U/mL)引起的血小板聚集和[Ca^(2+)]i的升高。 展开更多

关键词 血小板 GPⅡb/Ⅲa受体拈抗剂 血小板聚集 钙

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