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广州管圆线虫感染小鼠脾脏T淋巴细胞亚群和细胞因子的变化
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作者 罗晓东 沈二霞 +2 位作者 陈代雄 丁雪 李华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期574-578,591,共6页
目的观察小鼠感染广州管圆线虫后脾脏T淋巴细胞亚群及其细胞因子分泌水平的变化。方法用从感染褐云玛瑙螺分离的广州管圆线虫第3期幼虫感染BALB/c小鼠,感染后第19d及第25d分批处死小鼠,分离脾细胞,使用细胞内细胞因子荧光染色方法,用流... 目的观察小鼠感染广州管圆线虫后脾脏T淋巴细胞亚群及其细胞因子分泌水平的变化。方法用从感染褐云玛瑙螺分离的广州管圆线虫第3期幼虫感染BALB/c小鼠,感染后第19d及第25d分批处死小鼠,分离脾细胞,使用细胞内细胞因子荧光染色方法,用流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞中的T细胞亚群的含量,用双抗夹心ELISA法检测脾细胞培养上清细胞因子的浓度。结果与对照组比较,感染小鼠脾脏CD4+、CD4+IL-4+T淋巴细胞比例显著上升,而CD4+IL-17+、CD4+IFN-γ+T淋巴细胞比例显著下降;脾细胞培养上清细胞因子IL-4水平明显升高,而IL-17水平明显下降。同时,感染程度和感染时间等因素也可造成脾脏T淋巴细胞亚群及其细胞因子分泌水平的变化。结论小鼠感染广州管圆线虫后,表现以脾脏CD4+T淋巴细胞大量增殖和Th2型淋巴细胞极化为特点。 展开更多
关键词 广州管圆线虫 T淋巴细胞亚群 细胞因子
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日本血吸虫感染小鼠肠系膜淋巴结T细胞亚群的变化 被引量:8
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作者 黄俊 高志岩 +2 位作者 黎小妍 谢红艳 罗雪平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期103-106,共4页
目的:观察C57BL/6小鼠感染日本血吸虫(Schistosome japonicum,Sj)4~6周肠系膜淋巴结T细胞亚群的改变。方法:用Sj尾蚴腹贴法建立Sj感染的小鼠模型。4~6周后取肠系膜淋巴结做淋巴细胞计数,使用细胞内细胞因子染色的方法,利用流式细胞仪... 目的:观察C57BL/6小鼠感染日本血吸虫(Schistosome japonicum,Sj)4~6周肠系膜淋巴结T细胞亚群的改变。方法:用Sj尾蚴腹贴法建立Sj感染的小鼠模型。4~6周后取肠系膜淋巴结做淋巴细胞计数,使用细胞内细胞因子染色的方法,利用流式细胞仪检测肠系膜淋巴结淋巴细胞中分泌不同细胞因子的T细胞亚群含量的变化。结果:Sj感染C57BL/6小鼠4~6周后,肠系膜淋巴结细胞数量明显增多;流式细胞仪检测发现肠系膜淋巴结中CD4+T细胞中分泌IFN-γ的Th1细胞增多1倍,分泌IL-4和IL-5的Th2细胞增多近20倍,Th1/Th2轴发生偏移;分泌IL-17的Th17细胞也增多近5倍;分泌IFN-γ的CD8+T细胞也增多1倍。结论:日本血吸虫感染C57BL/6小鼠4~6周肠系膜淋巴结细胞增多,并向Th2和Th17型细胞极化。 展开更多
关键词 日本血吸虫 肠系膜淋巴结 THL7
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TLR7/8配体R-848体外抑制小鼠纯化B细胞产生IgE的机制研究
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作者 沈二霞 吴长有 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期640-644,共5页
目的:观察TLR7/8配体R-848对小鼠纯化B细胞产生IgE的调节作用及其可能机制。方法:制备小鼠脾细胞悬液,用磁珠分选出脾细胞中的CD19+B细胞;纯化的B细胞在基础培养液、含anti-CD40+IL-4加或不加R-848的培养液:采用ELISA的方法检测IgE的浓... 目的:观察TLR7/8配体R-848对小鼠纯化B细胞产生IgE的调节作用及其可能机制。方法:制备小鼠脾细胞悬液,用磁珠分选出脾细胞中的CD19+B细胞;纯化的B细胞在基础培养液、含anti-CD40+IL-4加或不加R-848的培养液:采用ELISA的方法检测IgE的浓度;流式细胞术检测B细胞的活化情况;CFSE标记B细胞,培养后检测细胞的分裂情况。结果:R-848以剂量依赖方式抑制anti-CD40+IL-4诱导的B细胞产生IgE,增强anti-CD40+IL-4诱导的B细胞的活化。R-848能够直接作用于B细胞,抑制anti-CD40+IL-4诱导的B细胞分裂。结论:R-848抑制B细胞产生IgE,可能与其抑制anti-CD40+IL-4诱导的B细胞的分裂有关。 展开更多
关键词 R-848 纯化B细胞 IGE 机制
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日本血吸虫TβRII样基因胞外段的克隆、表达及初步鉴定 被引量:1
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作者 陈姗 马长玲 +5 位作者 高志岩 麦璟莹 赵晶晶 朱郇悯 李小敏 李孜 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期356-359,共4页
目的获得日本血吸虫TGF-β受体II(TβRII)样基因的cDNA完整序列,克隆、原核表达其胞外段蛋白序列,并进行初步免疫学分析。方法应用RACE方法获得SjTβRII样基因cDNA全长序列,构建其胞外段(即N端)原核表达载体,在大肠埃希菌中IPTG诱导表达... 目的获得日本血吸虫TGF-β受体II(TβRII)样基因的cDNA完整序列,克隆、原核表达其胞外段蛋白序列,并进行初步免疫学分析。方法应用RACE方法获得SjTβRII样基因cDNA全长序列,构建其胞外段(即N端)原核表达载体,在大肠埃希菌中IPTG诱导表达,表达产物行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析。纯化重组蛋白并免疫大鼠制备抗血清,应用Western Blotting方法初步鉴定重组蛋白。结果获得日本血吸虫SjTβRII样基因的cDNA全长序列,为2283bp,编码760个氨基酸,其中胞外段长531bp,编码177个氨基酸。构建的重组质粒在大肠埃希菌中成功表达,经亲和层析获得了高纯度蛋白。重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清识别,表明其具有免疫原性和抗原性。结论首次获得日本血吸虫TβRII样基因的cDNA全长序列,其胞外段可在原核表达系统中获得具有免疫原性和抗原性的高效表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 SjTβRII 克隆 基因表达
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