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中国大陆广州管圆线虫病首例死亡病区终宿主鼠类的调查研究 被引量:21
1
作者 沈浩贤 谢瑾灼 +4 位作者 陈代雄 陈新宇 李小敏 马长玲 梁成结 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第2期126-127,共2页
目的 了解中国大陆广州管圆线虫病首例死亡病区终宿主种类及鼠类自然感染情况。方法 采用药械诱捕鼠类 ,解剖心肺 ,收集统计虫体。结果 褐家鼠、黄毛鼠、板齿鼠、黄胸鼠和小家鼠自然感染率分别为 8 33% (6 / 72 ) ,6 2 5 % (3/4 6 )... 目的 了解中国大陆广州管圆线虫病首例死亡病区终宿主种类及鼠类自然感染情况。方法 采用药械诱捕鼠类 ,解剖心肺 ,收集统计虫体。结果 褐家鼠、黄毛鼠、板齿鼠、黄胸鼠和小家鼠自然感染率分别为 8 33% (6 / 72 ) ,6 2 5 % (3/4 6 ) ,5 2 6 % (2 / 38) ,3 33% (1/ 30 )和 0 % (0 / 35 )。平均自然感染率为 5 4 3% (12 / 2 2 1)。结论 存在广州管圆线虫阳性鼠类 ,表明该地是广州管圆线虫自然疫源地。小家鼠不是广州管圆线虫的适宜终宿主。 展开更多
关键词 广州管圆线虫 终宿主 鼠类 调查研究 首例死亡病区
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免疫磁珠体外提纯胚胎大鼠神经干细胞的实验研究 被引量:5
2
作者 王彦惠 刘振华 +5 位作者 廖可立 姜晓丹 徐如祥 李留洋 彭杰 柳息洪 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期959-961,共3页
为建立免疫磁珠体外提纯胚胎神经干细胞 (NSC)的方法 ,制备胚胎SD大鼠的大脑皮质组织悬液 ,采用磁珠分选法选择Nestin阳性细胞群 ,台盼蓝染色观察活力 ,扫描电镜下行形态学观察 ,流式细胞仪检测荧光标记细胞的Nestin表达阳性率。结果发... 为建立免疫磁珠体外提纯胚胎神经干细胞 (NSC)的方法 ,制备胚胎SD大鼠的大脑皮质组织悬液 ,采用磁珠分选法选择Nestin阳性细胞群 ,台盼蓝染色观察活力 ,扫描电镜下行形态学观察 ,流式细胞仪检测荧光标记细胞的Nestin表达阳性率。结果发现 ,分选后所得细胞纯度达 (87 8± 2 4 ) % ,细胞活力 (94 8± 2 3) % ,流式细胞仪检测细胞Nestin阳性表达率为 (88 3± 1 0 4 ) % ,符合NSC的特点 ,扫描电镜观察可见细胞表面有数目不等的磁珠紧密结合。研究表明 ,磁性分选系统是一种有效的神经干细胞分离提纯方法 。 展开更多
关键词 神经干细胞 免疫磁珠 扫描电镜 流式细胞仪 神经巢蛋白 体外提纯
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C_(57)BL/6J小鼠超数排卵的研究 被引量:19
3
作者 戴丽军 黄月玲 叶炳飞 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2003年第1期51-53,共3页
目的 确定C57BL 6J小鼠超排的最佳激素剂量和最合适的注射间隔时间 ,提高超排率。方法  40只C57BL 6J雌鼠随机分为四组 ,分别用 5IU或 10IU的PMSG和HCG ,间隔 48h或 72h注射 ,比较排出卵母细胞的数量。结果  5IU +5IU剂量的PMSG和HC... 目的 确定C57BL 6J小鼠超排的最佳激素剂量和最合适的注射间隔时间 ,提高超排率。方法  40只C57BL 6J雌鼠随机分为四组 ,分别用 5IU或 10IU的PMSG和HCG ,间隔 48h或 72h注射 ,比较排出卵母细胞的数量。结果  5IU +5IU剂量的PMSG和HCG、间隔 48h注射组超排效果最好 ;8~ 10周龄雌鼠较 6~ 8周龄雌鼠超排效果好。结论 C57BL 6J小鼠超排的最佳激素剂量为 5IUPMSG +5IUHCG ,最合适的注射间隔时间为 48h ,处于繁殖期的雌鼠超排效果好。 展开更多
关键词 小鼠 超排卵 ACTH-促性腺激素 受体 促性腺素
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Fmr1基因敲除小鼠血清雌性激素含量的比较研究 被引量:7
4
作者 戴丽军 廖军 +1 位作者 黄月玲 叶炳飞 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第8期459-462,共4页
目的测定不同周龄和超排前后雌性Fmr1基因敲除FVB小鼠和背景FVB小鼠血清生殖激素雌二醇(E2)、孕酮(P)、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)含量,比较不同周龄和不同状态下敲除基因动物的血清性激素水平,研究敲除基因对动物的发育... 目的测定不同周龄和超排前后雌性Fmr1基因敲除FVB小鼠和背景FVB小鼠血清生殖激素雌二醇(E2)、孕酮(P)、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)含量,比较不同周龄和不同状态下敲除基因动物的血清性激素水平,研究敲除基因对动物的发育和生殖生理等方面的影响。方法用放射免疫分析法测定上述动物不同周龄和超排前后血清E2、P、LH和FSH的含量,测定Fmr1基因敲除小鼠不同周龄时的超排卵数,进行统计学分析。结果6周龄的雌性Fmr1基因敲除小鼠与FVB小鼠比较,LH、FSH值差异无显著性(P>0.05),E2的P值差异有显著性(P<0.05)。10周龄的两组动物间血清生殖激素水平和超排卵数均差异无显著性(P>0.05)。10周龄Fmr1基因敲除小鼠的超排卵数与6周龄动物比较差异有显著性(P<0.05)。结论敲除Fmr1基因对动物雌性激素的分泌有影响,该基因与动物的生殖生理有一定的关联。 展开更多
关键词 小鼠 敲除基因 Fmrl 小鼠 FVB 雌二醇 孕酮 促黄体激素 受体 促卵泡生成素
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影响胚胎早期发育环境因素的研究进展 被引量:14
5
作者 黄莉 王建华 《动物医学进展》 CSCD 2004年第1期7-10,共4页
妊娠期生理状态的改变 ,使母体对治疗药物和各种环境有害物质的吸收、分布和排泄发生了较大的改变。在发育初期 ,胚胎对治疗药物和环境因素的影响极为敏感 ,此时各种有害因素都可导致胚胎的损伤 ,甚至丢失。许多药物和环境因素是引起早... 妊娠期生理状态的改变 ,使母体对治疗药物和各种环境有害物质的吸收、分布和排泄发生了较大的改变。在发育初期 ,胚胎对治疗药物和环境因素的影响极为敏感 ,此时各种有害因素都可导致胚胎的损伤 ,甚至丢失。许多药物和环境因素是引起早期胚胎死亡或胎儿畸形的主要因素。环境类激素可直接作用于中枢神经内分泌调节系统 ,引起生殖激素分泌紊乱 ,出现生殖率下降和胚胎发育异常。重金属铅、镉、汞、砷可导致早期胚胎的丢失 ,或使胎儿出现畸形。对于药物和环境因素对胚胎发育的毒性评估 ,妊娠动物服用的剂量对妊娠结果仍然是最基本的方法 ,而用 BBDR模型来反映药物在低剂量情况下的作用以及在种间变化是近年来常用的模型。另一方面 ,细胞和分子的水平上观察环境毒物造成畸胎发生的机理也是活跃的研究领域。 展开更多
关键词 胚胎 早期发育 环境因素 生理状态 妊娠期 治疗药物 生殖激素 哺乳动物
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长爪沙鼠血清雌性激素的比较研究 被引量:6
6
作者 戴丽军 黄莉 廖军 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第4期246-248,共3页
目的测定长爪沙鼠、NIH小鼠和SD大鼠的血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,为研究长爪沙鼠的生殖和胚胎工程提供基础资料。方法用放射免疫分析法测定上述动物生产前后血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,进行统计学处理和分析。结果不同阶段雌性沙... 目的测定长爪沙鼠、NIH小鼠和SD大鼠的血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,为研究长爪沙鼠的生殖和胚胎工程提供基础资料。方法用放射免疫分析法测定上述动物生产前后血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,进行统计学处理和分析。结果不同阶段雌性沙鼠E2值差异无显著性(P>0.05),P值差异有显著性(P<0.01);E2值比较,处女期沙鼠与同期NIH和SD差异有显著性(P<0.01),而在经产期的动物间水平接近(P>0.05);P值比较,处女期沙鼠与NIH接近,与SD差异有显著性(P<0.01);而经产期沙鼠在三种动物中是最高的(P<0.01)。结论长爪沙鼠血清E2、P的含量具种属特异性,并随动物的生理发育时期而变化。 展开更多
关键词 沙鼠亚科 雌二醇 孕酮
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腺病毒E1A蛋白抑制大鼠肺泡上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位表达的机制研究 被引量:1
7
作者 方怡 李冰 +2 位作者 陈娟 刘启才 冉丕鑫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2382-2385,共4页
目的:研究腺病毒E1A蛋白抑制大鼠肺泡上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)表达的机制。方法:构建稳定表达腺病毒E1A蛋白的大鼠肺泡上皮细胞,将GCLC基因5’-上游调控序列不同长度的缺失体-萤火虫荧光素酶报道系统转染后分... 目的:研究腺病毒E1A蛋白抑制大鼠肺泡上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)表达的机制。方法:构建稳定表达腺病毒E1A蛋白的大鼠肺泡上皮细胞,将GCLC基因5’-上游调控序列不同长度的缺失体-萤火虫荧光素酶报道系统转染后分析转录活性的变化;检测AP-1、NF-κB、USF与GCLC基因调控序列的结合活性。结果:GCLC基因5’-上游调控序列报道系统检测结果显示大部分(9/11)缺失体的转录活性抑制,AP-1、NF-κB、USF与GCLC基因的结合活性增强,而对应的功能元件的转录活性降低。结论:腺病毒E1A蛋白通过抑制GCLC基因5’-上游调控序列的转录活性,扩大大鼠肺泡上皮细胞氧化应激时的氧化/抗氧化失衡,其机制可能涉及E1A对辅助转录因子的抑制。 展开更多
关键词 腺病毒E1A蛋白质类 Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 肺疾病 慢性阻塞性
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常用实验动物血清雌二醇和孕酮的测定及比较 被引量:5
8
作者 戴丽军 黄莉 廖军 《动物科学与动物医学》 2004年第11期56-57,共2页
目的测定NIH、BABL/C、C57BL/6J小鼠、SD、Wistar大鼠和长爪沙鼠等几种常用实验动物的血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,为动物生殖和胚胎工程等方面的研究提供基础资料。方法用放射免疫分析法测定上述动物生产前后血清雌二醇(E2)和孕酮(P)... 目的测定NIH、BABL/C、C57BL/6J小鼠、SD、Wistar大鼠和长爪沙鼠等几种常用实验动物的血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,为动物生殖和胚胎工程等方面的研究提供基础资料。方法用放射免疫分析法测定上述动物生产前后血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平,进行统计学处理和比较。结果在未生产动物中,血清E2、P的含量与特定物种的体重呈正相关的趋势(p<0.01);血清P的含量在动物生产前后变化较大,生产过动物均高于未生产动物(p<0.01)。结论动物血清E2、P的含量具种属特异性;但在已生产动物中似无明显关联。血清P的含量变化与其在动物体内的正常分泌及生理功能相对应。 展开更多
关键词 血清雌二醇 孕酮 血清E2 含量变化 实验动物 产前 C57BL/6 动物生产 胚胎工程 种属特异性
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刺激-分泌偶联离体嗜铬细胞模型的研究
9
作者 戴丽军 张昌杰 丘剑峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第5期261-263,共3页
目的 用离体蟾蜍肾上腺髓质嗜铬细胞建立刺激 分泌偶联的模型。方法 用胶原酶 (0 5mg ml)消化蟾蜍肾上腺 ,再用牛血清白蛋白 (5mg ml)终止消化 ,获得离体的蟾蜍肾上腺髓质嗜铬细胞。用乙酰胆碱 (2 0 0μmol L)或高K+ (6 5mmol L)刺... 目的 用离体蟾蜍肾上腺髓质嗜铬细胞建立刺激 分泌偶联的模型。方法 用胶原酶 (0 5mg ml)消化蟾蜍肾上腺 ,再用牛血清白蛋白 (5mg ml)终止消化 ,获得离体的蟾蜍肾上腺髓质嗜铬细胞。用乙酰胆碱 (2 0 0μmol L)或高K+ (6 5mmol L)刺激离体嗜铬细胞分泌儿茶酚胺。结果 消化培养后获得了离体的蟾蜍肾上腺髓质嗜铬细胞。ACh(2 0 0 μmol L)能刺激离体细胞分泌CA ,回归方程为Y =- 16 12 +16 94X ,r=0 995 1>α0 0 1 =0 95 87;K+(6 5mmol L)也能刺激离体细胞分泌CA ,回归方程为Y =12 5 3+7 933X ,r =0 994 2 >α0 0 1 =0 95 87。结论 离体的蟾蜍肾上腺髓质嗜铬细胞是理想的刺激 分泌偶联模型。由ACh和高K+ 促进的嗜铬细胞CA分泌具Ca2 + 浓度的依赖性。 展开更多
关键词 刺激-分泌偶联 嗜铬细胞 模型 肾上腺髓质 蟾蜍
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2,3,7,8-四氯苯并二噁英(TCDD)短期染毒可造成着床前胚胎丢失并伴随雌性生殖器官中毒物相关蛋白的诱导表达 被引量:9
10
作者 黄莉 黄韧 +3 位作者 冯媛瑜 刘寒英 丘剑峰 李冰 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2010年第3期334-342,共9页
为探明妊娠早期胚胎的丢失是否与卵巢、输卵管、子宫组织受到2,3,7,8-四氯苯并二噁英(TCDD)直接毒害有关,检测了NIH小鼠胚胎着床前期和后期TCDD暴露对胚胎毒性影响的敏感性,并利用免疫组化方法分析了模型动物肝脏、子宫、输卵管和卵巢... 为探明妊娠早期胚胎的丢失是否与卵巢、输卵管、子宫组织受到2,3,7,8-四氯苯并二噁英(TCDD)直接毒害有关,检测了NIH小鼠胚胎着床前期和后期TCDD暴露对胚胎毒性影响的敏感性,并利用免疫组化方法分析了模型动物肝脏、子宫、输卵管和卵巢组织中TCDD所引起的AhR、ARNT以及Cyp1a2分子标记物的变化.检测发现:妊娠第9d,100ng·kg-1·d-1剂量TCDD经口染毒,造成胚胎着床数量减少,且着床前期暴露的影响大于着床后期;子宫蜕膜反应受到明显抑制;胚胎迁移率没有明显变化,但胚胎数量减少.免疫组织化学分析发现正常组小鼠的肝脏、子宫、输卵管和卵巢组织中有AhR和Cyp1a2弱阳性信号表达,ARNT有细胞核的强阳性信号表达;妊娠第1~8d、第1~3d和第4~8d处理组小鼠肝脏、子宫、输卵管和卵巢组织中的AhR、Cyp1a2的阳性面积和光密度值均高于正常组;随处理时间和组织蓄积量的增加,ARNT在组织中的变化由胞核(妊娠第1~3d组)表达到胞浆(妊娠第4~8d组)表达,然后完全无表达(妊娠第1~8d组).以上研究结果表明:TCDD对早期妊娠小鼠子宫、输卵管和卵巢组织中的AhR、ARNT和Cyp1a2的激活和代谢方式与肝脏相同,说明雌性生殖系统中的组织有TCDD蓄积和代谢活性,这可能是导致早期胚胎迁移、着床等过程改变,造成胚胎丢失的重要原因. 展开更多
关键词 2 3 7 8-四氯苯并二噁英(TCDD) 胚胎丢失 毒性介导蛋白
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mtHSP70/HSV-tk重组沙门菌抗小鼠黑色素瘤的作用 被引量:8
11
作者 曾曙光 刘启才 +3 位作者 王素文 彭细毛 章锦才 张积仁 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期101-105,共5页
目的研究携带结核杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)、人单纯疱疹病毒一胸苷激酶(HSV-TK)双基因的重组沙门菌瘤内注射抗小鼠黑色素瘤的抑瘤效应。方法构建重组沙门菌SL7207/PCMV-mtHSP70-IRES-TK,建立小鼠黑色素瘤动物模型,瘤内注射重组沙门菌... 目的研究携带结核杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)、人单纯疱疹病毒一胸苷激酶(HSV-TK)双基因的重组沙门菌瘤内注射抗小鼠黑色素瘤的抑瘤效应。方法构建重组沙门菌SL7207/PCMV-mtHSP70-IRES-TK,建立小鼠黑色素瘤动物模型,瘤内注射重组沙门菌观察其抑瘤效应、荷瘤鼠的生存期并进行安全性评估。结果瘤内注射重组沙门菌,实验组抑瘤率显著高于对照组,延长荷瘤鼠生存期,重组菌治疗后荷瘤小鼠的生存状态良好,无腹泻,治疗期间体质量无明显改变。结论减毒沙门菌携带的mtHSP70/HSV-TK双基因真核共表达质粒瘤内注射对B16肿瘤细胞具有显著抑制作用。 展开更多
关键词 重组DNA 黑色素瘤 沙门氏菌 结核杆菌热休克蛋白70 人单纯疱疹病毒一胸苷激酶
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F10蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备 被引量:9
12
作者 付欣 邹东霆 +2 位作者 周问渠 邢福祺 李冰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期856-858,共3页
目的:表达F10蛋白,并制备兔抗F10多克隆抗体。方法:利用PCR方法扩增F10基因片段,经BamH I和EcoR I酶切后连接入pET-GST原核表达载体,构建的pET-GST/F10融合重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达蛋白,并以亲和层析的方法进行纯... 目的:表达F10蛋白,并制备兔抗F10多克隆抗体。方法:利用PCR方法扩增F10基因片段,经BamH I和EcoR I酶切后连接入pET-GST原核表达载体,构建的pET-GST/F10融合重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达蛋白,并以亲和层析的方法进行纯化。表达产物用SDS-PAGE电泳和Western blot进行分析鉴定。以纯化的F10蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗F10的多克隆抗体,并以ELISA法检测抗体效价。结果:经酶切和核酸序列分析证实重组质粒包含有正确编码的F10读码框。SDS-PAGE电泳分析显示pET-GST/F10诱导后表达一相对分子质量(Mr)约为61 000的融合蛋白,与预期结果相符。目的蛋白纯化后的纯度达90%以上,Western blot证实该蛋白是GST/F10的融合蛋白。将纯化的GST/F10融合蛋白免疫家兔,得到的兔抗F10抗体效价达1∶20 000。结论:成功构建了人F10基因原核表达载体,并获得了高纯度的F10重组蛋白及兔抗F10抗体,为下一步研究F10基因功能奠定了实验基础。 展开更多
关键词 F10基因 原核表达 抗体
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尾加压素Ⅱ促兔肺动脉平滑肌细胞增殖及机理探讨 被引量:6
13
作者 彭公永 何志义 +3 位作者 刘启才 李冰 钟南山 冉丕鑫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1597-1600,共4页
目的探讨尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,U-Ⅱ)对兔肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的作用及机理。方法采用植块法培养家兔PASMCs,以MTT测定和[3H]-胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)掺入法观察U-Ⅱ对PASMCs增殖的影响,加入不同浓度的几种细胞内信号转导阻断剂... 目的探讨尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,U-Ⅱ)对兔肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的作用及机理。方法采用植块法培养家兔PASMCs,以MTT测定和[3H]-胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)掺入法观察U-Ⅱ对PASMCs增殖的影响,加入不同浓度的几种细胞内信号转导阻断剂,观察对U-Ⅱ效应的影响。结果U-Ⅱ(10-9mol/L-10-7mol/L)浓度依赖地促进PASMCs的A值增加及[3H]-TdR掺入,以10-7mol/LU-Ⅱ的作用最明显,A值和[3H]-TdR掺入量分别较对照组高429%和685%(P<005)。10-10mol/LU-Ⅱ对PASMCs增殖无作用。尼卡地平、W7、H7、PD98059在一定浓度范围内(10-7mol/L-10-5mol/L)均可以浓度依赖地抑制U-Ⅱ诱导的PASMCs的A值增加及[3H]-TdR掺入增加。在浓度为10-5mol/L时,其抑制作用最明显,A值的抑制率分别为423%、196%、232%和105%(P<005),[3H]-TdR掺入量的抑制率分别为466%、98%、217%和147%(P<005)。结论U-Ⅱ具有较强的促PASMCs增殖的作用,其诱导PASMCs增殖是通过Ca2+、CaM、PKC、MAPK来介导的。 展开更多
关键词 尾紧张素类 肺动脉 平滑 血管
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挖空细胞的本质及尖锐湿疣病理诊断 被引量:9
14
作者 彭杰 彭杰青 +3 位作者 余俐 邬全会 暴菊英 柳息洪 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期492-495,共4页
目的 从分子生物学角度 ,寻找尖锐湿疣比较确切可行的病理诊断标准。方法 采用HE、HPV CAg免疫组化、HPV DNA原位杂交组化染色和超薄切片等方法检测 5 0例尖锐湿疣 ;用原位末端标记TUNEL染色 ,对 2 0例尖锐湿疣进行观察。结果 鳞状... 目的 从分子生物学角度 ,寻找尖锐湿疣比较确切可行的病理诊断标准。方法 采用HE、HPV CAg免疫组化、HPV DNA原位杂交组化染色和超薄切片等方法检测 5 0例尖锐湿疣 ;用原位末端标记TUNEL染色 ,对 2 0例尖锐湿疣进行观察。结果 鳞状上皮呈尖细的乳头状增生 ,角化不全和乳头纤维轴索中毛细血管丛状增生 ,棘层中上部和颗粒层有多少不等的挖空细胞 ,单个散在、成群或广泛分布 ,胞质空亮 ,核皱缩成星形或毛虫样 ,无炎细胞反应。原位杂交组化HPV DNA的阳性细胞比免疫组化HPV CAg阳性细胞明显增多。原位末端标记TUNEL染色及光镜、电镜观察 ,显示所有的挖空细胞均呈现细胞凋亡变化。结论 尖锐湿疣挖空细胞是由HPV所引起的凋亡细胞。从形态学上确认其凋亡特征即可确定尖锐湿疣的诊断 ,角化不全和乳头间质血管丛状增生可作佐证。难以确认挖空细胞的疑难病例 。 展开更多
关键词 挖空细胞 尖锐湿疣 病理诊断 原位杂交 形态学
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NP9对鼻咽癌细胞系CNE1基因表达谱的影响 被引量:3
15
作者 刘启才 李晓艳 +2 位作者 彭燕 李晓岩 李冰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期982-985,共4页
目的:确定NP9表达对鼻咽癌CNE1细胞基因表达谱的影响。方法:稳定表达NP9基因和稳定转染空载体的CNE1细胞分别作为基因芯片分析的实验组和对照组,用高通量的基因芯片筛选实验组细胞的差异表达基因,荧光定量逆转录PCR验证部分基因表达差... 目的:确定NP9表达对鼻咽癌CNE1细胞基因表达谱的影响。方法:稳定表达NP9基因和稳定转染空载体的CNE1细胞分别作为基因芯片分析的实验组和对照组,用高通量的基因芯片筛选实验组细胞的差异表达基因,荧光定量逆转录PCR验证部分基因表达差异。结果:所分析的14500个基因中,266个检测出有表达差异,其中82个基因呈现表达上调(RA>1),184个基因显示表达下调(RA<1)。显著上调和下调的基因分别为34个(RA>1.5)和75个(RA<1.5)。结论:NP9基因的表达导致了CNE1细胞中与细胞周期调控、细胞增殖和分化、细胞信号转导、细胞黏附相关基因表达的改变,为NP9的功能及分子机制研究提供了新的线索。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 基因 NP9 基因表达 CNE1细胞
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健乳灵对乳腺增生大鼠乳腺组织p16、p53表达的干预作用 被引量:9
16
作者 韦永芳 戴丽军 +5 位作者 刘寒英 黄月玲 黄霖 杨辉 叶振宇 刘华 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第5期271-273,i0001,共4页
目的研究健乳灵对乳腺增生大鼠乳腺组织中抑癌基因p16、p53表达的干预作用。方法用苯甲酸雌二醇和黄体酮制作乳腺增生病大鼠模型,分别用不同剂量的健乳灵治疗60 d,用免疫组化法测定乳腺组织的p16、p53表达水平。结果健乳灵能抑制乳腺上... 目的研究健乳灵对乳腺增生大鼠乳腺组织中抑癌基因p16、p53表达的干预作用。方法用苯甲酸雌二醇和黄体酮制作乳腺增生病大鼠模型,分别用不同剂量的健乳灵治疗60 d,用免疫组化法测定乳腺组织的p16、p53表达水平。结果健乳灵能抑制乳腺上皮增生,降低大鼠乳腺增生组织的p16、p53蛋白表达水平,与模型组比较有显著性差异(p<0.01)。结论健乳灵对大鼠的乳腺增生病有调节和治疗作用。 展开更多
关键词 乳腺增生病 健乳灵 P16 p53 蛋白表达
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糖皮质激素及NAC对腺病毒E1A蛋白上调IL-8及ICAM-1的抑制作用 被引量:4
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作者 郭园园 冉丕鑫 +3 位作者 张锦 郑西卫 李冰 陈娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期235-240,共6页
目的探讨腺病毒E1A蛋白在致炎因素TNF-α作用下对人肺腺癌细胞(A549)炎症因子IL-8和ICAM-1表达的影响以及地塞米松(DXM)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)的干预作用。方法构建稳定表达E1A蛋白的A549细胞系(E1A+组)及对照质粒转染细胞系(E1A-组)。... 目的探讨腺病毒E1A蛋白在致炎因素TNF-α作用下对人肺腺癌细胞(A549)炎症因子IL-8和ICAM-1表达的影响以及地塞米松(DXM)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)的干预作用。方法构建稳定表达E1A蛋白的A549细胞系(E1A+组)及对照质粒转染细胞系(E1A-组)。用TNF-α刺激、DXM以及NAC干预细胞,用ELISA检测炎症因子IL-8蛋白的表达,流式细胞术检测ICAM-1的表达。结果E1A+组在10μg.L-1的TNF-α作用前后细胞IL-8蛋白浓度分别为(48.49±0.27)ng.L-1和(22 841.75±12.92)ng.L-1,明显高于E1A-组作用前的(1.67±0.07)ng.L-1和作用后的(3 576.04±3.20)ng.L-1,两组相比差异有统计学意义(P<0.01)。与TNF-α单独作用组相比,DXM和NAC预作用细胞可明显降低TNF-α诱导下IL-8的高表达,差异有统计学意义(P<0.01)。E1A+组在10μg.L-1的TNF-α作用前后细胞ICAM-1蛋白浓度(荧光强度)分别为17.12±3.32和35.12±3.19,均高于E1A-组作用前0.59±0.09和作用后29.72±3.32,两组相比差异有统计学意义(P<0.01)。与TNF-α单独作用组相比,DXM和NAC预作用细胞可明显降低TNF-α诱导的ICAM-1的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 E1A蛋白能够增加TNF-α诱导下的IL-8和ICAM-1蛋白的表达。DXM和NAC能够明显拮抗TNF-α诱导下的IL-8和ICAM-1的蛋白表达,具有较强的抗炎作用。腺病毒E1A蛋白对NAC及DXM的抗炎作用无明显拮抗作用。 展开更多
关键词 腺病毒科 即早蛋白质类 糖皮质激素 N-乙酰半胱氨酸 炎症反应 慢性阻塞性肺疾病
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GSK3抑制剂氯化锂对FMR1基因敲除小鼠的自主活动的干预作用 被引量:4
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作者 曹开谊 陈希 +5 位作者 杨泉 孙卫文 黄越玲 沈岩松 戴丽军 陈盛强 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第9期1419-1422,共4页
目的:探讨GSK3抑制剂氯化锂对FMR1基因敲除小鼠的自主活动的干预作用及机制。方法:通过对90只30日龄FMR1基因敲除小鼠连续腹腔注射不同剂量氯化锂5d,行自主活动行为学实验,观察能否改善KO鼠的过度活动的表型;同时利用免疫印迹技术检测KO... 目的:探讨GSK3抑制剂氯化锂对FMR1基因敲除小鼠的自主活动的干预作用及机制。方法:通过对90只30日龄FMR1基因敲除小鼠连续腹腔注射不同剂量氯化锂5d,行自主活动行为学实验,观察能否改善KO鼠的过度活动的表型;同时利用免疫印迹技术检测KO及WT鼠的海马和皮层的GSK3β和P-GSK3β的变化。结果:在自主活动行为学实验中,KO鼠的活动次数比WT鼠的活动次数增多而站立次数比WT鼠减少,差异具有统计学意义(P<0.05);使用氯化锂后,KO鼠的活动次数明显减少及站立次数明显增多,差异均有统计学意义(P<0.05);免疫印迹实验结果:KO鼠P-GSK3β表达比WT鼠少,用氯化锂后,KO鼠P-GSK3β的表达增多。KO鼠和WT鼠使用氯化锂后,总的GSK3β无明显改变(P>0.05)。结论:GSK3β的抑制剂氯化锂能改善KO鼠的活动过度的表型,可能与氯化锂导致的P-GSK3β的表达增加有关,对FMR1基因敲除小鼠有治疗作用。 展开更多
关键词 脆性X综合征 自主活动 磷酸化GSK3β 氯化锂 FMR1基因敲除
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整合荧光素酶的稳定细胞克隆建立裸鼠肺癌静脉移植瘤模型的探索 被引量:4
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作者 张金栋 吕景礼 +2 位作者 周问渠 刘启才 李晓艳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第7期1055-1057,共3页
目的:应用建立的整合荧光素酶的稳定细胞克隆构建裸鼠肺癌模型,并用活体成像技术检测肿瘤成瘤及变化。方法:细胞计数分析其生长特性,体外测定不同数量的细胞的发光强度;尾静脉注射接种BLAB/c nu/nu裸鼠,活体成像系统监测裸鼠体内肿瘤的... 目的:应用建立的整合荧光素酶的稳定细胞克隆构建裸鼠肺癌模型,并用活体成像技术检测肿瘤成瘤及变化。方法:细胞计数分析其生长特性,体外测定不同数量的细胞的发光强度;尾静脉注射接种BLAB/c nu/nu裸鼠,活体成像系统监测裸鼠体内肿瘤的生长及转移,肿瘤组织切片验证移植瘤的病理特性。结果:在稳定表达荧光素酶的SPC-A-1-luc+细胞基因组中能有效扩增到荧光素酶基因;该细胞系具有与母细胞相同的生长曲线,体外检测发现其发光强度与细胞数量呈正相关;尾静脉接种裸鼠后肺部成瘤率为100%,且信号强度随时间递增。结论:建立了稳定整合Luciferase基因的肺腺癌细胞株SPC-A-1-luc+稳定克隆,尾静脉接种后可有效构建肺部肺腺癌成瘤模型,并可动态监测肿瘤的生长及转移。 展开更多
关键词 荧光素酶 SPC-A-1细胞 移植瘤 活体成像
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结核杆菌热休克蛋白70与绿色荧光蛋白基因真核共表达质粒的构建 被引量:3
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作者 曾曙光 张积仁 +4 位作者 章锦才 吴世卿 刘启才 艾伟健 薛国初 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期433-436,445,共5页
目的利用pIRES-EGFP载体构建含有人巨细胞病毒(cytomegaloviru,CMV)启动子调控表达的结核杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因双顺反子真核表达载体pCMV-hsp70-IRES-EGFP。方法根据mtHSP70基因全长cDNA的特异引物... 目的利用pIRES-EGFP载体构建含有人巨细胞病毒(cytomegaloviru,CMV)启动子调控表达的结核杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因双顺反子真核表达载体pCMV-hsp70-IRES-EGFP。方法根据mtHSP70基因全长cDNA的特异引物PCR扩增获得mtHSP70基因序列。将PCR产物进行T载体克隆获得重组质粒PMD-18T-mtHSP70,测序分析选定序列正确的克隆提取质粒,用限制性内切酶Xho I和EcoR I酶切pMD18T-TK和pCMV-IRES-EGFP质粒。将mtHSP70基因定向亚克隆至pCMV-IRES-EGFP载体,酶切鉴定,构建获得含mtHSP70和EGFP基因的重组质粒。Lipofectamine介导下转染B16细胞,并分别在荧光显微镜下观察EGFP的表达和以Westernblot检测mtHSP70蛋白表达情况。结果酶切见特异酶切图谱,该载体在瞬时表达时获得mtHSP70/EGFP的良好表达。结论含mtHSP70和EGFP基因双顺反子真核表达载体pCMV-mtHSP70-IRES-EGFP构建成功,为研究基于以GFP为报告基因的mtHSP70的肿瘤DNA疫苗对肿瘤的治疗作用及机制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 结核杆菌 热休克蛋白70 增强型绿色荧光蛋白 真核表达 免疫治疗 肿瘤
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