硫化镍转化人支气管上皮细胞基因差异表达芯片的研究 被引量：1

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作者 宾晓农 吕嘉春 +2 位作者 谭敏 纪卫东 陈家堃 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第5期412-418,共7页

背景与目的近年研究发现硫化镍(NiS)可引起人支气管上皮细胞(humanbronchialepithelialcell,16HBE)发生恶性转化及转化细胞致癌性,其机制可能与NiS引起基因突变、多种转录因子的异常表达有关。为此,本研究利用NiS恶性转化的体外培养细... 背景与目的近年研究发现硫化镍(NiS)可引起人支气管上皮细胞(humanbronchialepithelialcell,16HBE)发生恶性转化及转化细胞致癌性,其机制可能与NiS引起基因突变、多种转录因子的异常表达有关。为此,本研究利用NiS恶性转化的体外培养细胞模型,用cDNA微阵列技术研究经NiS转化后的16HBE细胞基因的差异表达,从基因组水平探讨NiS所致细胞恶变的相关基因差异改变。方法分别提取16HBE和经NiS单独处理发生转化的NiS16HBE细胞的总RNA,逆转录合成cDNA并以Cy3dCTP和Cy5dCTP荧光素分别标记制作探针。探针混合后与含4000个人类基因的芯片杂交。以ScanArray4000扫描仪扫描芯片,以GenPixPro3.0软件分析荧光信号,然后对差异表达的基因进行生物学信息分析。结果NiS16HBE细胞样本与16HBE细胞样本比较,呈现差异表达的基因有151个(3.78%),其中81个(53.64%)上调,70个(46.36%)下调。结论NiS的转化作用与应激反应基因、免疫相关基因、DNA合成和修复基因、代谢相关基因、原癌基因和抑癌基因等多类基因的异常表达有关。 展开更多

关键词 硫化镍 人支气管上皮细胞 基因芯片

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限量饮食对致癌物活化代谢及DNA断裂的影响

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作者 陈雯 张桥 +1 位作者 吴中亮 周明武 《中山医科大学学报》 CSCD 1998年第4期269-272,共4页

目的：研究限量饮食（ＤＲ）对小鼠肝代谢活化致癌物以及致癌物导致的ＤＮＡ链断裂程度的影响。方法：用３２Ｐ后标记和高效液相色谱法测定致癌物ＤＮＡ主要加合物生成量；用随机寡核甘酸引物合成法（ＲＯＰＳ）测定ＤＮＡ链断裂程... 目的：研究限量饮食（ＤＲ）对小鼠肝代谢活化致癌物以及致癌物导致的ＤＮＡ链断裂程度的影响。方法：用３２Ｐ后标记和高效液相色谱法测定致癌物ＤＮＡ主要加合物生成量；用随机寡核甘酸引物合成法（ＲＯＰＳ）测定ＤＮＡ链断裂程度；用体外代谢酶活性测定法检测有关代谢酶的活性。结果：①限量饮食减少小鼠肝中黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）和２乙基氨基芴（２ＡＡＦ）ＤＮＡ加合物（ＡＦＣ８ｄＧ）的生成，同时也减少致癌物导致的ＤＮＡ链断裂；限量饮食增加苯并［ａ］芘（ＢａＰ）ＤＮＡ加合物（ＢａＰＮ２ｄＧ）和６硝基苯甲萘（６ＮＣ）ＤＮＡ总加合物的生成，也增加致癌物导致的ＤＮＡ链断裂。②在小鼠肝中，致癌物ＤＮＡ加合物的生成量与致癌物导致的ＤＮＡ链断裂程度密切相关；③限量饮食诱导某些与致癌物代谢有关的酶。结论：限量饮食特异地改变小鼠肝代谢酶的活性继而影响致癌物的代谢活化，这种作用在致癌过程的起始阶段可能起着重要的作用。 展开更多

关键词 限量饮食 膳食 DNA损伤 致癌物 活化代谢

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肺癌组织中DNA修复基因ERCC1的表达与多环芳烃 -DNA加合物的关系 被引量：13

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作者 王云南 吕嘉春 +1 位作者 曾波航 宾晓农 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期1153-1156,共4页

目的 :探讨核苷酸切除修复基因ERCC1在肺癌中的表达及其与多环芳烃 (PAH) -DNA加合物的关系。方法 :用RT -PCR技术检测 15 0例肺癌、12 0例癌旁肺组织、4 0例肺良性病变和 4 0例正常肺组织中ERCC1基因mRNA的表达 ;用免疫法检测PAH -DNA... 目的 :探讨核苷酸切除修复基因ERCC1在肺癌中的表达及其与多环芳烃 (PAH) -DNA加合物的关系。方法 :用RT -PCR技术检测 15 0例肺癌、12 0例癌旁肺组织、4 0例肺良性病变和 4 0例正常肺组织中ERCC1基因mRNA的表达 ;用免疫法检测PAH -DNA加合物 ;分析有关暴露因素对修复基因ERCC1的表达和PAH -DNA加合物的影响 ,并探讨ERCC1与PAH -DNA加合物的关系。结果 :30 7% (4 6 / 15 0 )的肺癌组织和 2 5 % (1/ 4 0 )的正常肺组织存在ERCC1基因的表达低下 ;吸烟可抑制ERCC1基因的表达。肺组织中PAH -DNA加合物的水平与ERCC1基因表达呈显著负相关 ,Spearman相关系数为 - 0 6 4 8,P <0 0 1。结论 :ERCC1是参与修复DNA加合物等损伤的一个重要的核苷酸切除修复基因 。 展开更多

关键词 核苷酸类 肺肿瘤 DNA加合物 基因 ERCC1

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小檗碱对人肺癌GLC-82细胞凋亡的影响 被引量：4

4

作者 张贵平 张维文 +2 位作者 区彗坚 魏毅 吕嘉春 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第12期1389-1393,共5页

目的探讨生物碱类中药成分小檗碱(berber-ine)诱导人肺癌GLC-82细胞的凋亡作用。方法采用细胞培养技术,用不同浓度的小檗碱处理GLC-82细胞48h,用Hoechst33258染细胞核,在荧光显微镜下观察凋亡细胞核的形态变化,用QWin图象分析软件测量... 目的探讨生物碱类中药成分小檗碱(berber-ine)诱导人肺癌GLC-82细胞的凋亡作用。方法采用细胞培养技术,用不同浓度的小檗碱处理GLC-82细胞48h,用Hoechst33258染细胞核,在荧光显微镜下观察凋亡细胞核的形态变化,用QWin图象分析软件测量细胞核面积,计算凋亡率。采用MTT法测定细胞的增殖能力。小檗碱作用GLC-82细胞36h后,采用荧光免疫细胞化学SABC-Cy3法测定Caspase-3和PARP蛋白表达,在荧光显微镜下拍照,用QWin图象分析软件测定Caspase-3和PARP荧光强度值。结果小檗碱剂量依赖性的抑制GLC-82细胞增殖,半数生长抑制剂量IC50为19.9mg·L-1,上调凋亡促进因子Caspase-3,PARP蛋白表达增加,使GLC-82细胞呈现典型的凋亡形态学特征,胞核缩小,核质浓集,呈斑块状,有凋亡小体。结论小檗碱通过上调Caspase-3诱导人肺癌GLC-82细胞凋亡。 展开更多

关键词 盐酸小檗碱 GLC-82细胞 凋亡 CASPASE-3 PARP

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青石棉诱发BALB／c－3T3细胞恶性转化 被引量：3

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作者 刘云岗 刘玉清 +4 位作者 周谷 彭文珍 李寿祺 董奇男 詹承烈 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期298-301,共4页

用国产青石棉染毒ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３细胞７２ｈ后继续培养５ｗｋ，观察其恶性转化．试验结果表明，从１．０μｇ·ｃｍ－２剂量组开始转化率比阴性对照组增高（Ｐ＜０．０５），且有剂量反应关系．将各剂量组转化灶的细胞分别作... 用国产青石棉染毒ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３细胞７２ｈ后继续培养５ｗｋ，观察其恶性转化．试验结果表明，从１．０μｇ·ｃｍ－２剂量组开始转化率比阴性对照组增高（Ｐ＜０．０５），且有剂量反应关系．将各剂量组转化灶的细胞分别作软琼脂生长试验，结果均有细胞增殖成克隆；将２０μｇ·ｃｍ－２剂量组－转化灶的细胞分别接种至裸鼠皮下，ｗｋ４即形成接种部位包块，所有包块经病理组织学检查证实为纤维肉瘤．本研究首次证明青石棉可诱发ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３细胞恶性转化． 展开更多

关键词 青石棉 BALB c-3T3 细胞转化 化学致癌

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青石棉体外诱发细胞微核与多核 被引量：3

6

作者 刘云岗 刘玉清 +5 位作者 周谷 彭文珍 汪洋 李寿祺 董奇男 詹承烈 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期63-66,共4页

采用国产青石棉对ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３细胞和Ｖ７９细胞染毒，发现该２种细胞均可被青石棉诱发微核与多核．并且观察到含青石棉细胞的微核细胞率和多核细胞率均显著高于不含青石棉的细胞，而后者又比阴性对照显著增高．这提示青石棉进... 采用国产青石棉对ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３细胞和Ｖ７９细胞染毒，发现该２种细胞均可被青石棉诱发微核与多核．并且观察到含青石棉细胞的微核细胞率和多核细胞率均显著高于不含青石棉的细胞，而后者又比阴性对照显著增高．这提示青石棉进入细胞是其发挥遗传毒性作用的重要条件，但并非必需条件．与青石棉样品比较（２２％），这２种细胞内所含青石棉长纤维（＞１０μｍ）比例增大（６０％－６６％），提示细胞对青石棉的吞噬或保留作用具有一定长度选择性． 展开更多

关键词 青石棉 细胞微核 细胞多核 肿瘤发生

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2,3,7,8-四氯苯二噁英对NIH小鼠胚胎发育的影响 被引量：2

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作者 黄莉 戴丽军 +2 位作者 叶炳飞 冯媛瑜 吕嘉春 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第3期150-153,共4页

目的探讨2,3,7,8四氯苯二英(TCDD)对NIH小鼠胚胎发育过程的影响。方法在NIH小鼠妊娠早期的1～8d,胚泡着床前期的1～3d和着床后期的4～8d,经口腔灌服0、2、50和100ng(kg·d)剂量的TCDD,在小鼠妊娠第9天和第18天时观察子宫内的胚胎... 目的探讨2,3,7,8四氯苯二英(TCDD)对NIH小鼠胚胎发育过程的影响。方法在NIH小鼠妊娠早期的1～8d,胚泡着床前期的1～3d和着床后期的4～8d,经口腔灌服0、2、50和100ng(kg·d)剂量的TCDD,在小鼠妊娠第9天和第18天时观察子宫内的胚胎发育形态。结果50、100ng(kg·d)剂量在妊娠早期1～8d染毒,使多数妊娠小鼠在第9天观察时子宫内胚胎全部丢失;在妊娠1～3d和4～8d染毒,使部分妊娠小鼠胚胎丢失,另外有部分胚胎吸收或发育阻滞。同时发现早期成活胚胎在发育过程中继续死亡,妊娠第18天时,胎鼠出生前成活率下降。结论小鼠妊娠早期染毒,引起小鼠妊娠早期胚胎丢失,着床后胚胎发育异常,出现阻滞和死亡。 展开更多

关键词 NIH小鼠 二噁英 氯苯 胚胎发育过程 妊娠早期 胚胎发育异常 着床前期 TCDD 发育形态 妊娠小鼠 小鼠胚胎 早期胚胎 着床后 子宫内 经口腔 染毒 丢失 成活率 出生前 剂量 天时 阻滞

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端粒酶抑制剂对口腔肿瘤细胞生长的影响 被引量：1

8

作者 杨志强 陈雯 +3 位作者 张桥 陈广胜 雷毅雄 易菲 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期231-234,共4页

目的　探讨端粒酶抑制剂作为肿瘤治疗药物的可行性。方法　选择人口腔鳞状细胞癌KB细胞株作为靶细胞 ,观察端粒酶抑制剂 3′_叠氮_3′_脱氧胸腺核苷 (AZT)和人端粒酶模板区的硫代反义寡核苷酸片断(AS_ONS)对上述肿瘤细胞株的作用 ,用MT... 目的　探讨端粒酶抑制剂作为肿瘤治疗药物的可行性。方法　选择人口腔鳞状细胞癌KB细胞株作为靶细胞 ,观察端粒酶抑制剂 3′_叠氮_3′_脱氧胸腺核苷 (AZT)和人端粒酶模板区的硫代反义寡核苷酸片断(AS_ONS)对上述肿瘤细胞株的作用 ,用MTT试验测定细胞毒作用 ;3H_TdR掺入试验测定细胞增殖速度 ;用端粒重复序列扩增法 (TRAP)半定量方法测定细胞染毒前后端粒酶活性的变化 ;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果　AS_ONS和AZT在一定剂量范围内有抑制肿瘤细胞株繁殖的作用 ,在抑制细胞生长的同时 ,端粒酶活性降低。此外 ,AS_ONS和AZT还有诱导细胞凋亡以及使细胞阻滞在G1 期的作用。结论　AZT和AS_ONS在体外有抑制端粒酶活性和抗肿瘤细胞增殖的作用 。 展开更多

关键词 端粒酶抑制剂 口腔肿瘤 细胞生长 影响 抗肿瘤药物 细胞凋亡

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三种抗氧化剂对青石棉诱发微核,多核及转化细胞生长的影响

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作者 刘云岗 刘玉清 +4 位作者 周谷 彭文珍 李寿祺 董奇男 詹承烈 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期67-70,共4页

在青石棉诱发Ｖ７９细胞微核与多核模型的基础上，以维生素Ｅ（ＶＥ），β－胡萝卜素（β－Ｃａｒ）或亚硒酸钠（Ｓｅ）分别与青石棉同时处理细胞，观察上述抗氧化剂对其微核细胞率与多核细胞率的影响．发现ＶＥ和Ｓｅ可分别降低其微核... 在青石棉诱发Ｖ７９细胞微核与多核模型的基础上，以维生素Ｅ（ＶＥ），β－胡萝卜素（β－Ｃａｒ）或亚硒酸钠（Ｓｅ）分别与青石棉同时处理细胞，观察上述抗氧化剂对其微核细胞率与多核细胞率的影响．发现ＶＥ和Ｓｅ可分别降低其微核细胞率或多核细胞率，β－Ｃａｒ对二者均无影响．采用青石棉诱发的ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３恶性转化细胞，观察上述物质对其克隆形成率（ＣＦＥ）和细胞生长的影响．发现Ｓｅ，β－Ｃａｒ和ＶＥ分别在１０，６和２５０μｍｏｌＬ－１以上浓度出现ＣＦＥ降低，且细胞生长受抑． 展开更多

关键词 抗氧化剂 青石棉 微核 多核 细胞转化

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肺癌和肺癌前病变组织中维甲酸受体的表达

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作者 王云南 赵红军 +1 位作者 黎银燕 吕嘉春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期2466-2467,2470,共3页

目的:探讨维甲酸受体(RAR)在肺癌癌前病变(支气管黏膜上皮不典型增生)和肺癌病变中的表达。方法:在40例正常肺组织、41例支气管黏膜上皮不典型增生组织及143例肺癌患者手术标本中,用免疫组化的方法检测RAR的表达,分析RAR基因在肺癌变不... 目的:探讨维甲酸受体(RAR)在肺癌癌前病变(支气管黏膜上皮不典型增生)和肺癌病变中的表达。方法:在40例正常肺组织、41例支气管黏膜上皮不典型增生组织及143例肺癌患者手术标本中,用免疫组化的方法检测RAR的表达,分析RAR基因在肺癌变不同阶段间的变化。结果:80.0%(32/40)的正常肺组织中可检测到RAR基因的蛋白表达;68.3%(28/41)的支气管黏膜上皮不典型增生组织和57.6%(83/143)的肺癌组织中可检出RAR(P<0.05);且随着肺组织癌变过程的变化,RAR基因蛋白的表达呈逐渐降低的趋势(P<0.01)。吸烟者RAR蛋白检出率低于非吸烟者。结论:RAR表达下降与肺组织癌变过程密切相关,吸烟暴露可导致RAR基因表达降低,检测RAR基因表达下降可能为肺癌的早期临床诊断提供科学依据。 展开更多

关键词 肺肿瘤 癌前病变 受体 维甲酸

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PFP、GrB真核共表达载体的构建及表达分析

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作者 李秀英 夏良平 赖延东 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期492-495,共4页

目的:体外扩增出PFP、GrB基因的全片段并构建共表达重组体pVAX1-PIG(即pVAX1-PFP-IRES-GrB),分析其在人喉癌细胞Hep-2中的表达情况。方法:利用RT-PCR的方法从人的喉癌组织浸润淋巴细胞中扩增全长PFP、GrB的cDNA片段并构建共表达重组体pV... 目的:体外扩增出PFP、GrB基因的全片段并构建共表达重组体pVAX1-PIG(即pVAX1-PFP-IRES-GrB),分析其在人喉癌细胞Hep-2中的表达情况。方法:利用RT-PCR的方法从人的喉癌组织浸润淋巴细胞中扩增全长PFP、GrB的cDNA片段并构建共表达重组体pVAX1-PIG。利用脂质体LipofectamineTM2000将重组真核表达载体pVAX1-PIG转染入人的Hep-2细胞株中,采用RT-PCR、间接免疫荧光法分析其在人Hep-2中的表达情况。结果:经双酶切、测序法证实已成功扩增PFP、GrB基因的全长cDNA,并构建共表达重组体pVAX1-PIG,在荧光显微镜下可见已转染pVAX1-PIG的人Hep-2细胞的胞浆发出苹果绿色荧光。结论:成功扩增PFP、GrB全片段、构建共表达重组体pVAX1-PIG,并在人Hep-2细胞中检测到PFP、GrB蛋白的表达,穿孔素(PFP)/颗粒酶B共同表达能够介导细胞的凋亡,为其在喉癌治疗中的应用研究奠定了基础。 展开更多

关键词 穿孔素 颗粒酶B 共表达 间接免疫荧光

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