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基于胃蛋白酶耐受性的变性胶原蛋白定量分析方法
被引量：
3
1
作者
陈丽媛
梁杏
+3 位作者
彭琪惠
李奕恒
叶春婷
徐丽明
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期9-13,共5页
基于胶原蛋白的蛋白酶耐受性,建立变性胶原蛋白的定量分析方法。制备6组已知含量比的变性/非变性胶原蛋白混合样品,在液态胶原pH值约2.0的条件下,添加胃蛋白酶对样品中的变性胶原蛋白进行酶切,使其成为短肽,胃蛋白酶与胶原蛋白的质量比...
基于胶原蛋白的蛋白酶耐受性,建立变性胶原蛋白的定量分析方法。制备6组已知含量比的变性/非变性胶原蛋白混合样品,在液态胶原pH值约2.0的条件下,添加胃蛋白酶对样品中的变性胶原蛋白进行酶切,使其成为短肽,胃蛋白酶与胶原蛋白的质量比为1∶5,温度为30℃,消化24 h;然后采用NaCl沉淀法(NaCl终浓度为2 mol/L)对样品中的非变性胶原蛋白进行沉淀回收,并通过羟脯氨酸测定法检测其含量比。结果显示,6组样品中非变性胶原蛋白的回收率为89.96%~99.24%,表明本方法可以充分酶解变性胶原蛋白,而非变性胶原蛋白得以沉淀回收,可用于定量分析液态或海绵状、粉末状等酸溶性胶原蛋白原料和产品中变性胶原蛋白的含量比。
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关键词
胶原蛋白
变性胶原蛋白
胃蛋白酶耐受性
定量分析
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职称材料
胰蛋白酶消化法测定牛胶原蛋白三股螺旋结构的含量
被引量：
1
2
作者
梁健华
梁杏
李奕恒
《天然产物研究与开发》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第8期1378-1385,1377,共9页
本研究建立了一种测定胶原蛋白的三股螺旋结构含量的方法。该方法通过使用柱前衍生高效液相色谱(HPLC)法表征经胰蛋白酶酶解后胶原蛋白羟脯氨酸(Hyp)质量浓度的变化,进而对胶原蛋白的三股螺旋结构进行定量。探讨了不同的酶解时间(0~48h...
本研究建立了一种测定胶原蛋白的三股螺旋结构含量的方法。该方法通过使用柱前衍生高效液相色谱(HPLC)法表征经胰蛋白酶酶解后胶原蛋白羟脯氨酸(Hyp)质量浓度的变化,进而对胶原蛋白的三股螺旋结构进行定量。探讨了不同的酶解时间(0~48h)、酶与底物的比例(1∶100、1∶50和1∶20)和温度(20、25、30、37℃)对明胶降解率的影响。获得了酶解的最佳条件——当胰蛋白酶与底物的比例为1∶50时,25℃酶解3h。使用该方法对明胶胶原蛋白混合液检测,结果表明,该方法能灵敏(RSD<10%)的测定胶原蛋白三股螺旋结构的含量。该方法不仅可用于生物组织研究领域,也可用于胶原蛋白食品、保健品和组织工程产品质量的评价。
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关键词
活性
胶原蛋白
定量检测
三股螺旋结构
酶敏感性
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职称材料
题名
基于胃蛋白酶耐受性的变性胶原蛋白定量分析方法
被引量：
3
1
作者
陈丽媛
梁杏
彭琪惠
李奕恒
叶春婷
徐丽明
机构
中国食品药品检定研究院医疗器械检定所
广州创尔生物技术股份有限公司
广东赤萌医疗科技
有限公司
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期9-13,共5页
基金
中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金项目(2020C8)。
文摘
基于胶原蛋白的蛋白酶耐受性,建立变性胶原蛋白的定量分析方法。制备6组已知含量比的变性/非变性胶原蛋白混合样品,在液态胶原pH值约2.0的条件下,添加胃蛋白酶对样品中的变性胶原蛋白进行酶切,使其成为短肽,胃蛋白酶与胶原蛋白的质量比为1∶5,温度为30℃,消化24 h;然后采用NaCl沉淀法(NaCl终浓度为2 mol/L)对样品中的非变性胶原蛋白进行沉淀回收,并通过羟脯氨酸测定法检测其含量比。结果显示,6组样品中非变性胶原蛋白的回收率为89.96%~99.24%,表明本方法可以充分酶解变性胶原蛋白,而非变性胶原蛋白得以沉淀回收,可用于定量分析液态或海绵状、粉末状等酸溶性胶原蛋白原料和产品中变性胶原蛋白的含量比。
关键词
胶原蛋白
变性胶原蛋白
胃蛋白酶耐受性
定量分析
Keywords
collagen
denatured collagen
pepsin tolerance
quantitative analysis
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
胰蛋白酶消化法测定牛胶原蛋白三股螺旋结构的含量
被引量：
1
2
作者
梁健华
梁杏
李奕恒
机构
广州创尔生物技术股份有限公司
出处
《天然产物研究与开发》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第8期1378-1385,1377,共9页
基金
国家863项目子课题(2015AA033702)
广州开发区国际科技合作项目(2017GH09)
文摘
本研究建立了一种测定胶原蛋白的三股螺旋结构含量的方法。该方法通过使用柱前衍生高效液相色谱(HPLC)法表征经胰蛋白酶酶解后胶原蛋白羟脯氨酸(Hyp)质量浓度的变化,进而对胶原蛋白的三股螺旋结构进行定量。探讨了不同的酶解时间(0~48h)、酶与底物的比例(1∶100、1∶50和1∶20)和温度(20、25、30、37℃)对明胶降解率的影响。获得了酶解的最佳条件——当胰蛋白酶与底物的比例为1∶50时,25℃酶解3h。使用该方法对明胶胶原蛋白混合液检测,结果表明,该方法能灵敏(RSD<10%)的测定胶原蛋白三股螺旋结构的含量。该方法不仅可用于生物组织研究领域,也可用于胶原蛋白食品、保健品和组织工程产品质量的评价。
关键词
活性
胶原蛋白
定量检测
三股螺旋结构
酶敏感性
Keywords
active
collagen
quantitative determination
triple helix conformation
enzymatic sensitivity
分类号
R284 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于胃蛋白酶耐受性的变性胶原蛋白定量分析方法
陈丽媛
梁杏
彭琪惠
李奕恒
叶春婷
徐丽明
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
胰蛋白酶消化法测定牛胶原蛋白三股螺旋结构的含量
梁健华
梁杏
李奕恒
《天然产物研究与开发》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
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职称材料
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