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斑马鱼——一种理想的分子生物学研究的脊椎动物模型 被引量:6
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作者 江晓曦 郑文岭 +1 位作者 崔东 马文丽 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第2期74-74,共1页
关键词 斑马鱼 分子生物学 脊椎动物模型 基因组
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DNA测序中常见影响因素的研究 被引量:5
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作者 宋艳斌 马文丽 郑文岭 《生物技术通报》 CAS CSCD 2005年第1期44-46,共3页
对测序中的模板、引物、测序反应条件及测序反应纯化方法和仪器操作等进行研究。结果显示测序模板的纯度影响测序的质量 ,浓度对测序的长度有影响。引物设计时除符合一般设计原则外 ,Tm值最好在5 0℃~ 6 0℃之间 ,且无成串的G、C。改... 对测序中的模板、引物、测序反应条件及测序反应纯化方法和仪器操作等进行研究。结果显示测序模板的纯度影响测序的质量 ,浓度对测序的长度有影响。引物设计时除符合一般设计原则外 ,Tm值最好在5 0℃~ 6 0℃之间 ,且无成串的G、C。改变变性、退火、延伸的时间和温度对特殊DNA模板的序列测定有较好的效果。测序反应产物的纯化有几种方法 ,以 70 %乙醇沉淀法最经济、方便。因此模板的纯度和浓度对测序成功与否起决定作用。最佳反应条件可降低成本 ,提高测序成功率 ,乙醇沉淀法是首选的测序反应产物纯化方法。仪器操作熟练、正确与否也会影响测序结果。 展开更多
关键词 DNA测序 常见 乙醇沉淀法 影响 改变 成功率 序列测定 浓度 纯度 引物
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植物血凝素及淋巴因子激活的杀伤细胞体外抗肿瘤作用的MTT比色法分析 被引量:5
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作者 吴军 王晓怀 +1 位作者 杨太成 冼江 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第11期841-843,共3页
目的 检测植物血凝素及淋巴因子激活的杀伤细胞(PHA-LAK)的体外广谱抗肿瘤作用。方法 用MTT比色法测定 PHA-LAK对体外培养的K562、MGc80-3、143TK-、HeLa、LoVo等5种肿瘤细胞的杀伤活性... 目的 检测植物血凝素及淋巴因子激活的杀伤细胞(PHA-LAK)的体外广谱抗肿瘤作用。方法 用MTT比色法测定 PHA-LAK对体外培养的K562、MGc80-3、143TK-、HeLa、LoVo等5种肿瘤细胞的杀伤活性。结果PHA-LAK对5种不 同组织器官来源的肿瘤细胞均有明显杀伤活性,在效靶比为7.5:1.0时,PHA-LAK对143TK-细胞的杀伤率可高达 57.3%,杀伤效应随效靶比增加而升高;但在效靶比为15:1时,杀伤效应不随效靶比增加而增高数。结论 (1)来自健康献血 员的PHA-LAK对肿瘤细胞具非特异性杀伤活性,能较好解决传统过继免疫治疗中免疫效应细胞的数量和活性问题; (2)在一定的条件下,MTT法用于检测免疫效应细胞的杀瘤作用时才具灵敏、可靠的优点。 展开更多
关键词 MTT比色法 PHA-LAK 细胞毒性 植物血凝素 淋巴因子 肿瘤细胞 LAK TIL
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抗木瓜凝乳蛋白酶单链抗体基因的构建、初步筛选和鉴定 被引量:1
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作者 王舰平 赵树进 +3 位作者 王捷 武婕 杨太成 杨静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期689-692,共4页
目的 :构建抗木瓜凝乳蛋白酶全套单链抗体 (scFv)噬菌体表面展示文库。方法 :从木瓜凝乳蛋白酶免疫小鼠的淋巴细胞中提取总RNA ,反转录成cDNA后 ,用抗体V区简并引物扩增全套VH 和VL 基因。经重叠延伸反应 ,装配成scFv基因 ,并将其克隆... 目的 :构建抗木瓜凝乳蛋白酶全套单链抗体 (scFv)噬菌体表面展示文库。方法 :从木瓜凝乳蛋白酶免疫小鼠的淋巴细胞中提取总RNA ,反转录成cDNA后 ,用抗体V区简并引物扩增全套VH 和VL 基因。经重叠延伸反应 ,装配成scFv基因 ,并将其克隆到噬粒载体pFAB5C中 ,构建scFv噬菌体抗体库。对抗体库进行亲和筛选后 ,用ELISA法鉴定抗木瓜凝乳蛋白酶的scFv。结果 :经 4轮“亲和 吸附 洗脱”的富集过程 ,得到ELISA活性较高可与木瓜凝乳蛋白酶结合的克隆。结论 :成功地构建了抗木瓜凝乳蛋白酶的scFv噬菌体展示文库 。 展开更多
关键词 木瓜凝乳蛋白酶 可变区基因 单链抗体 噬菌体抗体库
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TAT蛋白在介导外源物质进入细胞方面的应用 被引量:1
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作者 江晓曦 郑文岭 +1 位作者 崔东 马文丽 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第5期6-8,共3页
TAT蛋白能够介导多肽、蛋白质、基因等外源物质进入细胞 ,对机体没有毒性 ,对周围环境的影响也不敏感 ,因而可以直接应用于组织细胞。它能够引导外源基因定位于细胞核 ,具有其它介导方法所没有的优点。这些优点将使TAT蛋白在研究蛋白质... TAT蛋白能够介导多肽、蛋白质、基因等外源物质进入细胞 ,对机体没有毒性 ,对周围环境的影响也不敏感 ,因而可以直接应用于组织细胞。它能够引导外源基因定位于细胞核 ,具有其它介导方法所没有的优点。这些优点将使TAT蛋白在研究蛋白质功能、基因治疗等方面发挥极为重要的作用。TAT蛋白与细胞表面进行低亲和力的结合 ,以Caveolae途径进入细胞 。 展开更多
关键词 TAT蛋白 介导 外源物质 细胞 艾滋病毒
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一种酿酒酵母同源重组载体的筛选
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作者 郑文岭 江晓曦 +2 位作者 崔东 赵慧 马文丽 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期89-92,共4页
将携有mTn-3xHA/LacZ转座子的酿酒酵母文库质粒pHSS6转化大肠杆菌DH5α,挑取单菌落并提取其质粒.将纯化质粒分别用Not I酶切后,转化尿嘧啶缺陷型(ura-)酿酒酵母菌株INVSc1,使其同源重组到酿酒酵母基因组中,于SC/ura-平板上筛选.取长有... 将携有mTn-3xHA/LacZ转座子的酿酒酵母文库质粒pHSS6转化大肠杆菌DH5α,挑取单菌落并提取其质粒.将纯化质粒分别用Not I酶切后,转化尿嘧啶缺陷型(ura-)酿酒酵母菌株INVSc1,使其同源重组到酿酒酵母基因组中,于SC/ura-平板上筛选.取长有单菌落酵母的平板进一步筛选重组后上游有强启动子酿酒酵母文库质粒,用近300个质粒转化酵母菌株INVSc1,最终得到2株前端有强启动子的酿酒酵母质粒,这2个质粒可作为酿酒酵母同源重组载体广泛应用. 展开更多
关键词 酿酒酵母 同源重组 转座子 化学转化 同源重组载体
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自体外周血造血干细胞移植及移植物的免疫净化
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作者 吴军 王晓怀 杨太成 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第9期714-716,共3页
自体造血干细胞移植是保证大剂量化疗和放疗安全用于治疗恶性肿瘤的有效措施,而去除混杂在造血细胞群中的肿瘤细胞是减少疾病复发的关键。本文综述近年来用免疫学方法在体外净化自体外周血造血干细胞移植物的一些新进展。
关键词 自体移植 外周血造血干细胞移植 免疫净化 HSCT
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